PROAPOPTOTIC MARKERS IN DISSEMINATED SCLEROSIS

Full Text

Введение Современное состояние учения о рассеянном склерозе (РС) позволяет рассматривать его как модель взаимодействия иммунной, нервной и эндокринной систем в условиях прогредиентного течения патологического процесса, что придает проблеме фундаментальное значение [7]. Рассеянный склероз - аутоиммунное заболевание нервной системы, характеризующееся образованием множественных очагов демиелинизации в головном и спинном мозге, с неуклонно прогрессирующими неврологическими симптомами и быстрой инвалидизацией больных [1]. Интерес к РС обусловлен выраженной клинической вариабельностью, непредсказуемостью прогноза, неизвестной этиологией и недостаточно изученным патогенезом заболевания [7, 9]. За последние годы отмечается существенный рост заболеваемости РС во многих странах мира, в том числе и в ряде регионов Российской Федерации, что, на наш взгляд, связано с открытием специализированных центров [1-3, 7, 12]. В России заболеваемость РС колеблется от 30 до 100 случаев на 100 тыс. населения [2, 7]. Распространенность рассеянного склероза в Пермском крае составила на 01.01.2014 г. 41,2 случая на 100 тыс. населения, что позволяет отнести наш регион к зоне среднего риска развития РС [3]. По данным Всемирной организации здравоохранения, PC является основной причиной необратимой утраты трудоспособности лиц молодого возраста. До 50 % больных через 10 лет после начала PC имеют трудности в выполнении профессиональных обязанностей, через 15 лет - в самостоятельном передвижении, а при длительности более 20 лет - проблемы в самообслуживании [2, 7, 12]. В связи с этим изучение патогенеза РС, маркеров клеточной гибели при данном заболевании является чрезвычайно важным и может способствовать поиску новых методов лечения. Одним из предполагаемых механизмов запуска процессов демиелинизации при РС является активация провоспалительных цитокинов. К одному из таких цитокинов относится растворимый Fas-антиген sAPO-1/Fas. Данные о корреляциях sAPO-1/Fas с полом и возрастом у здоровых лиц противоречивы [4], что требует дальнейших исследований больших выборок лиц в широком возрастном диапазоне и при тщательном исключении заболеваний, способных вызвать изменение уровня sAPO-1/Fas, среди которых рак толстой кишки, новообразования матки, молочных желез, щитовидной железы. [6]. Апоптоз - программируемая гибель клеток, представляющая собой одну из форм физиологических реакций организма, направленных на элиминацию генетически чужеродных клеток и поддержание гомеостаза [6]. Регуляция апоптоза в нервной системе осуществляется многочисленными сигнальными системами. При этом пути реализации этого процесса могут быть различными: модуляция активности ферментов, модуляция факторов транскрипции (р 53, АР-1, NF-кВ), прямая активация генов раннего немедленного ответа (c-jun, c-fos). В настоящее время выделены три фазы апоптоза: инициация (индукция), эффекторная и деградация [4, 6]. Апоптоз может быть запущен путем активации поверхностно-экспрессируемых «рецепторов смерти», относящихся к надсемейству фактора некроза опухоли (TNF) (внешний путь), или нарушениями функции внутриклеточных органелл (внутренний путь). Триггером наружного пути апоптоза является связывание лигандов с одним экспрессируемым на мембране «рецептором смерти» или более. Лиганды для этих рецепторов включают TNFα, FAS-лиганд и апоптозиндуцирующий лиганд рецептора TNF (TNF-receptor apoptosis-inducing ligand - TRAIL) [8]. Цель работы - исследовать количественное содержание sAPO-1/FAS в сыворотке крови пациентов с рассеянным склерозом и у здоровых взрослых. Материалы и методы исследования За период с 2006 по 2016 г. проанализированы данные 1084 больных рассеянным склерозом, среди них 677 женщин (62,5 %) и 407 мужчин (37,5 %). Возраст больных рассеянным склерозом варьировался от 17 до 68 лет, в среднем 44,5 ± 4,5 г. Из общего количества больных 38,6 % (419 чел.) составили городские жители, 61,4 % (665 чел.) - жители других территорий Пермского края. Начало заболевания пришлось на возраст 32,57 ± 5,6 г. Длительность болезни колебалась от 0,1 до 32 лет, в среднем 8,8 ± 10,7 г. Суммарный балл инвалидизации по шкале EDSS больных основной группы составил 4,46 ± 1,56. Заболевание расценено как легкое у 37,5 % больных, средней тяжести - у 56,1 %, тяжелое - у 6,4 %. На основании большой выборки сделаны выводы о факторах риска развития РС. Проведено исследование эмоционального статуса и количественного содержания sAPO-1/FAS 46 пациентов, не отличающихся от массивной выборки по полу, возрасту, степени инвалидизации, тяжести и типу течения заболевания. У 36 человек установлен ремиттирующий РС, у 8 - вторично-прогрессирующий, у 2 - первично-прогрессирующий типы течения. Большинство больных имели инвалидность (61,5 %). Диагноз рассеянного склероза устанавливался на основании международных критериев [9, 10], оценки неврологического статуса, данных магнитно-резонансной томографии головного и спинного мозга, которая проводилась на низкопольном МР-томографе Magneton-Open (Siemens Medical) с напряженностью магнитного поля 1,5 Т в соответствии с общепринятым протоколом. Тяжесть клинического состояния определялась по системе Kurtzke, включающей оценку по шкале функциональных систем и по расширенной шкале инвалидизации (EDSS). К группе здоровых относились взрослые без клинических признаков серьезных текущих заболеваний центральной нервной системы или неврологического дефицита, без клинически значимых патологических отклонений по данным общего анализа крови и мочи, общетерапевтического биохимического анализа крови, без тяжелых соматических заболеваний, признаков острых инфекционных заболеваний. Трем взрослым из группы здоровых выполнена магнитно-резонансная томография головного мозга по стандартному протоколу (1,5 Т) в режимах T1, T2, FLAIR, DWI (очаговые изменения вещества мозга выявлены не были). Количественное определение sAPO-1/FAS проводилось в человеческой сыворотке методом иммуноферментного анализа. Для исследования использовался иммуноферментный набор для количественного определения sAPO-1/FAS «Human sAPO-1/Fas Platinum ELISA» (BMS245) производства «Bender MedSystems GmbH (eBioscience)», Vienna, Austria. Статистическая обработка результатов осуществлялась при помощи пакета прикладных программ Statistica 6.0 с использованием описательной статистики (определение выборочного среднего М и среднего квадратичного отклонения σ), непараметрических методов (сопоставление независимых групп с использованием критерия Манна-Уитни). Анализ зависимостей осуществлялся с помощью рангового коэффициента корреляции r Спирмена. При p < 0,05 различия считались достоверными. Результаты и их обсуждение В результате проведенного нами исследования в популяции пациентов с РС в Пермском крае были выявлены следующие факторы риска развития заболевания: вирусные инфекции (р < 0,005) как факторы, «запускающие» начало и обострение РС, наличие в анамнезе хронического тонзиллита (р < 0,008), перенесенная коревая инфекция, возраст матери от 31 до 40 лет (р < 0,04), контакт после достижения 15-летнего возраста с красками (р < 0,002), металлами (р < 0,001), а также проживание в непосредственной близости от химического производства (р < 0,01). В клинической картине рассеянного склероза у пациентов (n = 46) доминировали мозжечковые (69 %), пирамидные (76 %), сенсорные (32 %), тазовые (67 %) и зрительные (22 %) нарушения. При оценке эмоциональных нарушений у больных РС уровень депрессии по шкале Бека составил 10,32 ± 4,12 балла, что существенно (р = 0,001) превышало контрольные значения. Полученные значения реактивной и личностной тревоги также превышали контрольные показатели и составили 41,24 ± 3,28 и 44,88 ± 5,12 балла соответственно, достигая высокого уровня. Среднее содержание sAPO-1/Fas (sCD-95) в сыворотке крови пациентов с РС составило 389,6 ± 20,8, что отличается (p = 0,02) от группы здоровых лиц (310,16 ± 26,7). Отсутствие значимых различий между группами по среднему возрасту и соотношению мужчин и женщин, отсутствие корреляций с данными факторами в контрольной группе позволяет предположить отсутствие влияния пола и возраста на результаты исследования. У пациентов с РС выявлена прямая корреляционная связь (R = 0,41, р = 0,044) между степенью инвалидизации по шкале EDSS и количественным содержанием сывороточного sAPO-1/Fas (sCD-95). Также в результате корреляционного анализа получена прямая зависимость между степенью реактивной тревоги и депрессии пациентов (R = 0,76, р = 0,000). Нарастание неврологического дефицита c оценкой его по шкале EDSS также сопровождается увеличением выраженности тревожно-депрессивных расстройств, что закономерно, так как именно эти симптомы максимально влияют на качество жизни больных и их функциональные возможности. Анализ связи количественного содержания сывороточного sAPO-1/Fas (sCD-95) с выраженностью нарушений различных функций нервной системы, оцененных по EDSS, показал, что существует прямая зависимость проапоптотического маркера с выраженностью пирамидных (R = 0,37, р = 0,034), координаторных (R = 0,57, р = 0,004) и когнитивных (R = 0,40, р = 0,049) нарушений. Выводы Полученные результаты продемонстрировали, что у больных рассеянным склерозом наблюдается высокая степень реактивной и личностной тревожности, коморбидная с доклинической стадией депрессии. Наличие прямой корреляционной связи между степенью инвалидизации по шкале EDSS и количественным содержанием сывороточного sAPO-1/Fas (sCD-95) позволяет предположить участие провоспалительного реактивного фактора апоптоза sAPO-1/Fas (sCD-95) в патогенезе развития аутоиммунного процесса при рассеянном склерозе. Полученные научные данные о запуске внешнего пути апоптоза активацией поверхностно-экспрессируемых «рецепторов смерти», в том числе Fas-лиганда, могут способствовать поиску новых препаратов в лечении рассеянного склероза.

About the authors

A V Zhelnin

Email: zhelna54@mail.ru

References

Supplementary files