PhD student
аспирант
PhD, Senior Researcher of Proteomics of Human Reproduction
к.ф-м.н., с.н.с. лаборатории протеомики репродукции человека
MD, PhD, Senior Researcher
д.м.н., профессор РАН, в.н.с.
PhD, Head of Laboratory of Proteomics of Human Reproduction
к.б.н., зав. лабораторией протеомики репродукции человека
PhD, Researcher of Proteomics of Human Reproduction
к.ф.м.н., научный сотрудник лаборатории протеомики репродукции человека
Student
студентка 1-го
MD, PhD, professor, Head of the Department of Pathological Anatomy of the medical faculty
д.м.н., профессор, зав. кафедрой патологической анатомии лечебного факультета 1-го
Academician of the Russian Academy of Sciences, Professor, Honoured Scientist of the Russian Federation, Deputy Director for Scientific Affairs
академик РАН, профессор, заслуженный деятель науки РФ, заместитель директора по научной работе
PhD, Head of Department of Systems Biology in Reproduction
к.ф-м.н., руководитель отдела системной биологии в репродукции
Objective. To enhance the efficiency of diagnosing external genital endometriosis by direct mass spectrometry. Subjects and methods. A case-control study covered 100 patients with external genital endometriosis (a study group) and 50 patients with uterine myoma (a control group) who had been operated on at the Gynecology Department, V.I. Kulakov Research Center of Obstetrics, Gynecology, and Perinatology, Ministry of Health of the Russian Federation. The diagnosis of external genital endometriosis was based on diagnostic and therapeutic laparoscopy and finally confirmed histologically. To determine the lipid composition of blood and peritoneal fluid, their samples were obtained from all the study participants. The lipidome was qualitatively and quantitatively assessed using electrospray mass spectrometry. An analysis revealed more than 140 molecular characteristics, most of which were five lipid classes: phosphatidylcholines, phosphatidylethanolamines, sphingomyelins, diglycerides, and triglycerides. The obtained experimental data were analyzed using the multivariate partial lest squares-discriminant analysis (PLS-DA). The created statistical models well group data based on a case-control sign and could identify lipids, which make the greatest contribution to the clustering of the data. Results. Unlike the comparison group, the patients with endometriosis showed a substantial decrease in the blood and peritoneal fluid level of four lipids: phosphatidylcholine PC 36:4, lysophosphatidylcholine LPC 16:0, sphingomyelin SM 34:1, and phosphoethanolamine PE O-34:1. The level of phosphoethanolamine PE 0-20:0 was increased not only in the endometrial tissues, but also in the biological fluids of patients with endometriosis, suggesting the possible diagnostic value of this lipid. The sensitivity and specificity of the method was 93% and 95%, respectively for blood plasma; those were 90 and 95% for peritoneal fluid. Conclusion. This investigation confirms the involvement of phospholipids and sphingolipids in the pathophysiology of endometriosis and opens up new possibilities for the noninvasive diagnosis of external genital endometriosis.
Цель исследования. Повышение эффективности диагностики наружного генитального эндометриоза методом прямой масс-спектрометрии. Материал и методы. В исследовании по типу случай-контроль участвовали 100 пациенток с наружным генитальным эндометриозом и 50 пациенток контрольной группы с миомой матки, подвергшихся оперативному лечению в гинекологическом отделении ФГБУ НЦАГиП им. В.И. Кулакова МЗ РФ. Наружный генитальный эндометриоз был диагностирован на основании лечебно-диагностической лапароскопии и окончательно подтвержден гистологически. У всех участниц исследования производился забор крови и перитонеальной жидкости для определения их липидного состава. Качественную и количественную оценку липидома проводили с помощью масс-спектрометрии с электрораспылением. В результате анализа было выявлено более 140 молекулярных признаков, большую часть которых составляли липиды пяти классов: фосфатидилхолины, фосфатидилэтаноламины, сфингомиелины, ди- и триглицериды. Полученные экспериментальные данные были проанализированы с помощью многофакторного метода PLS-DA. Созданные статистические модели хорошо группируют данные по признаку случай-контроль и позволили выявить липиды, дающие наибольший вклад в кластеризацию данных. Результаты. Выявлено значительное снижение уровня четырех липидов в крови и перитонеальной жидкости больных эндометриозом, в отличие от пациенток группы сравнения, а именно: фосфатидилхолина PC 36:4, лизофосфатидилхолина LPC 16:0, сфингомиелина SM 34:1, фосфаэтаноламина PE 0-34:1. Уровень фосфаэтаноламина PE 0-20:0 оказался повышенным не только в эндометриоидных тканях, но и в биологических жидкостях больных эндометриозом, что свидетельствует о возможной диагностической ценности данного липида. Чувствительность метода для плазмы крови составила 93%, специфичность - 95%; для перитонеальной жидкости чувствительность - 90%, специфичность - 95%. Заключение. Данное исследование подтверждает участие фосфолипидов и сфинголипидов в патофизиологии эндометриоза, а также открывает новые возможности для неинвазивной диагностики наружного генитального эндометриоза.