Obstetrics and GynecologyObstetrics and GynecologyАкушерство и гинекология0300-90922412-5679Bionika Media63161910.18565/aig.2023.293Original ArticlesОригинальные статьиResearch ArticleBalance of pro-inflammatory and anti-inflammatory cytokines of fetal membranes of patients with prelabor rupture of membranes at termБаланс провоспалительных и противовоспалительных цитокинов плодных оболочек при доношенной беременности и дородовом излитии околоплодных водhttps://orcid.org/0000-0001-5879-418XKaganovaMaria A.КагановаМария Александровна
Russian Federation

PhD, Associate Professor at the Department of Obstetrics and Gynecology

к.м.н., доцент кафедры акушерства и гинекологии

mkaganova@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0003-3390-8034SpiridonovaNatalia V.СпиридоноваНаталья Владимировна
Russian Federation

Dr. Med. Sci., Professor, Head of the Department of Obstetrics and Gynecology, Institute of Vocational Education

д.м.н., профессор, заведующая кафедрой акушерства и гинекологии ИПО

nvspiridonova@mail.ruSamara State Medical University, Ministry of Health of the Russian FederationФГБОУ ВО «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации04032024357620305202403052024Copyright ©; 2024, Bionika MediaCopyright ©; 2024, ООО «Бионика Медиа»2024Bionika MediaООО «Бионика Медиа»https://journals.eco-vector.com/0300-9092/article/view/631619

Objective: To investigate the mRNA expression levels of pro-inflammatory (IL-1β, IL-6, IL-8, IL-17A, IL-18, IL-23, TNF-α, and IFN-γ) and anti-inflammatory (IL-4, IL-10, TGFβ) cytokines in the membranes of patients with prelabor rupture of membranes at term (PROM).

Materials and methods: During a clinical study at the Samara State Medical University, 40 pregnant women with full-term pregnancies were studied. The inclusion criteria were singleton pregnancy, gestational age 37.0-41.0 weeks without non-obstetric comorbidities, exacerbation of chronic and acute inflammatory diseases, and obstetric complications (placental insufficiency, preeclampsia). All patients delivered via cesarean section. Indications for planned surgery were abnormal fetal position and presentation, and postoperative uterine scar (control group, n=16). An additional indication for emergency cesarean section was premature rupture of the membranes (study group, n=24). The mRNA expression levels of IL-1β, IL-6, IL-8, IL-17A, IL-18, IL-23, TNFα, IFN-γ, IL-4, IL-10, and TGF-β were determined using RT-PCR (RT-PCR DNA technology).

Results: Expression of the mRNA genes IL-1β, IL-8, IL-18, and TNFα was observed in almost all subjects in both groups. The expression of IL-17 mRNA was not determined in any patient; IL-23 – in 7/24 (29.2%) of the study group and 3/16 (18.8%) of the control group; IL-4 expression – in 5/24 (20.8%) and 4/16 (25.0%), respectively, at an extremely low level. Expression of IL-6 and IFN-γ mRNA genes was observed slightly more often in 16/24 (66.7%) and 17/24 (70.8%) patients in the study group and in 6/16 (37.5%) and 7/16 (43.7%) patients in the control group. Significant differences between the groups were observed only for the expression of IL-8 gene mRNA – 105.44 (23.7; 648.93) RU and 33.49 (20.0; 116.6) RU and TGFβ – 216.63 (129.5; 329.9) RU and 112.5 (36.7; 182.4) RU in the study group and control group, respectively.

Conclusion: In patients with PROM, the main changes in the fetal membranes are a 3.1-fold increase in the expression of the IL-8 gene mRNA, which ensures the migration of immunocompetent cells (p=0.022), and a 1.9-fold increase in the expression of the TGFβ gene mRNA, which is responsible for epithelial-mesenchymal transition and thinning of the fetal membranes (p=0.024),

Цель: Оценить уровень экспрессии мРНК генов провоспалительных (ИЛ-1β, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-17А, ИЛ-18, ИЛ-23, TNFα, IFN-γ) и противовоспалительных (ИЛ-4, ИЛ-10, TGFβ) цитокинов в плодных оболочках при их преждевременном разрыве (ПРПО) при доношенной физиологически протекающей беременности.

Материалы и методы: В ходе исследования на клинической базе ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России (CГКБ №1 им. Н.И. Пирогова) обследованы 40 беременных с доношенной беременностью. Критерии включения в исследование: одноплодная беременность, срок гестации 37,0–41,0 недели без сопутствующей соматической патологии, обострения хронических и острых воспалительных заболеваний, акушерских осложнений (признаки плацентарной недостаточности, преэклампсии). Все пациентки были родоразрешены путем операции кесарева сечения: в плановом порядке показаниями являлись неправильное положение и предлежание плода, рубец на матке после операции – группа сравнения (n=16); в неотложном порядке дополнительным показанием являлось преждевременное излитие околоплодных вод – основная группа (n=24). Уровни экспрессии мРНК генов ИЛ-1β, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-17А, ИЛ-18, ИЛ-23, TNFα, IFN-γ, ИЛ-4, ИЛ-10, TGF-β определялись методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ООО «ДНК-технология»).

Результаты: Экспрессия мРНК генов ИЛ-1β, ИЛ-8, ИЛ-18, TNFα наблюдалась практических у всех обследованных обеих групп. Экспрессия мРНК генов ИЛ-17 не определялась ни у одной пациентки; ИЛ-23 – у 7/24 (29,2%) основной группы и 3/16 (18,8%) группы сравнения; экспрессия ИЛ-4 – у 5/24 (20,8%) и 4/16 (25,0%) соответственно на крайне низком уровне. Экспрессия генов мРНК ИЛ-6 и IFN-γ наблюдалась несколько чаще: у 16/24 (66,7%) и 17/24 (70,8%) в основной группе, у 6/16 (37,5%) и 7/16 (43,7%) – в группе сравнения. Количественно значимые различия в группах были получены только для экспрессии мРНК генов ИЛ-8 – 105,44 (23,7; 648,93) ОЕ и 33,49 (20,0; 116,6) ОЕ и TGFβ – 216,63 (129,5; 329,9) ОЕ и 112,5 (36,7; 182,4) ОЕ в основной группе и группе сравнения соответственно.

Заключение: При ПРПО основные изменения на плодных оболочках заключаются в повышении экспрессии мРНК гена ИЛ-8, обеспечивающего миграцию иммунокомпетентных клеток, в 3,1 раза (р=0,022) и экспрессии мРНК гена TGFβ, ответственного за эпителиально-мезенхимальный переход и истончение плодных оболочек, в 1,9 раза (р=0,024),

mRNAcytokinespolymerase chain reactionpregnancymembranespremature rupture of membranesIL-1βIL-6IL-8IL-17AIL-18IL-23TNFαIFN-γIL-4IL-10TGFβмРНКцитокиныполимеразная цепная реакциябеременностьплодные оболочкипреждевременный разрыв плодных оболочекИЛ-1βИЛ-6ИЛ-8ИЛ-17АИЛ-18ИЛ-23TNFαIFN-γИЛ-4ИЛ-10TGFβMenon R., Moore J.J. Fetal membranes, not a mere appendage of the placenta, but a critical part of the fetal-maternal interface controlling parturition. Obstet. Gynecol. Clin. North Am. 2020; 47(1): 147-62. https://dx.doi.org/10.1016/ j.ogc.2019.10.004.Болотских В.М., Айламазян Э.К., ред. Преждевременное излитие околоплодных вод: теория и практика. Санкт-Петербург: Эко-Вектор; 2018. 191с. [Bolotskikh V.M., Ajlamazjan Je.K., eds. Premature discharge of amniotic fluid: theory and practice. St Petersburg: Eco-Vector; 2018. 191p. (in Russian)].Доброхотова Ю.Э., Трофимов Д.Ю., Щеголев А.И., Бурменская О.В., Веселовская Ю.С., Митрофанова Ю.В., Оленев А.С., Пастарнак А.Ю., Гогичаев Т.К. Особенности экспрессии мРНК гена прогестерониндуцированного блокирующего фактора в плаценте при преждевременных родах. Акушерство и гинекология. 2017; 7: 62-7. [Dobrokhotova Yu.E., Trofimov D.Yu., Shchegolev A.I., Burmenskaya O.V., Veselovskaya Yu.S., Mitrofanova Yu.V., Olenev A.S., Pastarnak A.Yu., Gogichaev T.K. Placental PIBF1 gene mRNA expression during preterm labor. Obstetrics and Gynecology. 2017; (7): 62-7. (in Russian)]. https://dx.doi.org/10.18565/aig.2017.7.62-7.Доброхотова Ю.Э., Бондаренко К.Р., Гущин А.Е., Румянцева Т.А., Долгова Т.В., Кузнецов П.А., Джохадзе Л.С. Результаты исследования цервико-вагинальной микробиоты методом ПЦР в реальном времени у беременных с угрожающими преждевременными родами. Акушерство и гинекология. 2018; 11: 50-9. [Dobrokhotova Yu.E., Bondarenko K.R., Gushchin A.E., Rumyantseva T.A., Dolgova T.V., Kuznetsov P.A., Dzhokhadze L.S. The results of the examination of cervical-vaginal microbiota in pregnant women with threatened preterm birth using a real-time polymerase chain reaction. Obstetrics and Gynecology. 2018; (11): 50-9. (in Russian)]. https://dx.doi.org/10.18565/aig.2018.11.50-59.Oh K.J., Romero R., Park J.Y., Lee J., Conde-Agudelo A., Hong J.S., Yoon B.H. Evidence that antibiotic administration is effective in the treatment of a subset of patients with intra-amniotic infection/inflammation presenting with cervical insufficiency. Am. J. Obstet. Gynecol. 2019; 221(2): 140.e1-140.e18. https://dx.doi.org/10.1016/j.ajog.2019.03.017.Tchirikov M., Schlabritz-Loutsevitch N., Maher J., Buchmann J., Naberezhnev Y., Winarno A.S., Seliger G. Mid-trimester preterm premature rupture of membranes (PPROM): etiology, diagnosis, classification, international recommendations of treatment options and outcome. J. Perinat. Med. 2018; 46(5): 465-88. https://dx.doi.org/10.1515/jpm-2017-0027.Низяева Н.В., Карапетян А.О., Гапаева М.Д., Приходько А.М., Синицына В.А., Баев О.Р. Повышение ангиогенеза как фактора, способствующего разрыву плодных оболочек при физиологическом течении беременности и при преждевременных родах. Гены и клетки. 2019; 14(3): 164-5. [Nizyaeva N.V., Karapetyan A.O., Gapaeva M.D., Prikhod'ko A.M., Sinitsyna V.A., Baev O.R. Povyshenie angiogeneza kak faktora, sposobstvuyushchego razryvu plodnykh obolochek pri fiziologicheskom techenii beremennosti i pri prezhdevremennykh rodakh. Genes & Cells. 2019; 14(3): 164-5. (in Russian)]. https://dx.doi.org/10.23868/gc123216.Hadley E.E., Sheller-Miller S., Saade G., Salomon C., Mesiano S., Taylor R.N., Taylor B.D., Menon R. Amnion epithelial cell-derived exosomes induce inflammatory changes in uterine cells. Am. J. Obstet. Gynecol. 2018; 219(5): 478.e1-478.e21. https://dx.doi.org/10.1016/j.ajog.2018.08.021.Николаева А.М., Бабушкина Н.П., Рябов В.В. Некоторые про- и противовоспалительные цитокины, полиморфные варианты их генов и постинфарктное ремоделирование сердца. Российский кардиологический журнал. 2020; 25(10): 4007. [Nikolaeva A.M., Babushkina N.P., Ryabov V.V. Some pro- and anti-inflammatory cytokines, their genetic polymorphism and postinfarct cardiac remodeling. Russian Journal of Cardiology. 2020; 25(10): 4007. (in Russian)]. https://dx.doi.org/10.15829/1560-4071-2020-4007.Zakar T., Paul J.W. Fetal membrane epigenetics. Front. Physiol. 2020; 11: 588539. https://dx.doi.org/10.3389/fphys.2020.588539.Janzen C., Sen S., Lei M.Y., Gagliardi de Assumpcao M., Challis J., Chaudhuri G. The role of epithelial to mesenchymal transition in human amniotic membrane rupture. J. Clin. Endocrinol. Metab. 2017; 102(4): 1261-9. https://dx.doi.org/ 10.1210/jc.2016-3150.Richardson L.S., Taylor R.N., Menon R. Reversible EMT and MET mediate amnion remodeling during pregnancy and labor. Sci. Signal. 2020; 13(618): eaay1486. https://dx.doi.org/10.1126/scisignal.aay1486.Sharma A., Kumar D., Moore R.M., Deshmukh A., Mercer B.M., Mansour J.M., Moore J.J. Granulocyte macrophage colony stimulating factor (GM-CSF), the critical intermediate of inflammation-induced fetal membrane weakening, primarily exerts its weakening effect on the choriodecidua rather than the amnion. Placenta. 2020; 89: 1-7. https://dx.doi.org/10.1016/ j.placenta.2019.10.003.Murray E.J., Gumusoglu S.B., Santillan D.A., Santillan M.K. Manipulating CD4+ T cell pathways to prevent preeclampsia. Front. Bioeng. Biotechnol. 2022; 9: 811417. https://dx.doi.org/10.3389/fbioe.2021.811417.Piccinni M.P., Raghupathy R., Saito S., Szekeres-Bartho J. Cytokines, hormones and cellular regulatory mechanisms favoring successful reproduction. Front. Immunol. 2021; 12: 717808. https://dx.doi.org/10.3389/fimmu.2021.717808.Motedayyen H., Fathi F., Fasihi-Ramandi M., Ali Taheri R. The effect of lipopolysaccharide on anti-inflammatory and pro-inflammatory cytokines production of human amniotic epithelial cells. Reprod. Biol. 2018; 18(4): 404-9. https://dx.doi.org/10.1016/j.repbio.2018.09.005.Zhu J., Ma C., Zhu L., Li J., Peng F., Huang L., Luan X. A role for the NLRC4 inflammasome in premature rupture of membrane. PLoS One. 2020; 15(8): e0237847. https://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0237847.