Диагностическая значимость предактивированных ней-трофилов при преэклампсии

Цель исследования. Изучить взаимосвязь содержания предактивированных (праймированных) нейтрофилов в периферической крови беременных с преэклампсией. Материал и методы. В исследование включены 14 женщин с преэклампсией (основная группа - I) и 15 женщин с физиологически протекающей беременностью (контрольная группа - II) и 11 небеременных женщин (для получения нормативных значений). В периферической крови определяли формил пептид (fMLP), градиенты фиколл-гипак (1,077 и 1,119 г/мл), люцигенин, среда RPMI-1640, среда Хенкса, эмбриональная сыворотка телят - Sigma-Aldrich. Выделяли нейтрофилы из крови, полученной из локтевой вены (антикоагулянт гепарин 35 МЕ/мл), на двухступенчатом градиенте фиколл-гипак. Эритроциты разрушали с помощью гипотонического лизиса. Нейтрофилов в суспензиях было не менее 96%. Живые клетки в тесте с трипановым синим составляли 94%. Готовые суспензии содержали 1^106 клеток/мл. В качестве стимулятора использовали формил-метионил-лейцил-фенилаланинин (fMLP, 2 мкМ). Образование радикалов кислорода регистрировали с помощью люминофора-люцигенина (30 мкМ) на хемилюминометре «Биотокс-7» (Россия) в имп/сек. Определяли максимальную амплитуду образования радикалов, время ее достижения, а также свето-сумму за фиксированный период времени. Результаты. В суспензиях клеток небеременных женщин отмечалось монотонное «спонтанное» увеличение образования радикалов кислорода с очень низкой скоростью. У здоровых беременных скорость возрастает в 1,3 раза (р>0,05). Скорость «спонтанной» генерации радикалов кислорода резко возрастала у беременных с преэклампсией. В этой группе образование радикалов кислорода достигает максимальных значений и выходит на плато через 24±7мин. По-видимому, «спонтанное» образование радикалов обусловлено стимуляцией исходно праймированных нейтрофилов в результате их адгезии на стенках кюветы. Для проверки этого предположения к суспензиям добавляли стандартный стимулятор fMLP, который выраженным образом стимулировал генерацию радикалов кислорода нейтрофилами женщин с преэклампсей. Следует отметить, что как у небеременных женщин, так и у здоровых беременных fMLP значительно слабее увеличивал уровень радикалов по сравнению с ответами нейтрофилов женщин с преэклампсией. Заключение. Потенциирование ответа на формил пептид на фоне «спонтанной» стимуляции нейтрофилов беременных женщин с преэклампсией свидетельствует о присутствии в их периферической крови праймированных клеток. Такой суммарный ответ позволяет предположить, что механизм стимуляции нейтрофилов в результате адгезии на стенке кюветы и при действии fMLP разный, носит аддитивный характер и осуществляется с помощью разных процессов.

преэклампсия, оксидативный стресс, предактивированные нейтрофилы, праймирование