Молекулярно-генетические предикторы некротизирующего энтероколита у новорожденных


Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация

Цель. Установить молекулярно-генетические предикторы некротизирующего энтероколита (НЭК) у глубоконедоношенных детей. Материалы и методы. В исследование были включены 590 новорожденных различного гестационного возраста (ГВ 24-41 недель), родившихся в «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России и поступивших в отделение реанимации и интенсивной терапии Центра в период с января 2015 по декабрь 2017гг. Обор биологического материала для молекулярно-генетического исследования (венозная кровь и буккальный соскоб) производился в первые часы жизни до начала медикаментозной терапии и энтерального питания. Проводилось измерение уровней экспрессии генов (IL1b, IL6, IL8, IL10, П12а, IL15, IL18, TNFa, TGFb1, TBX21, GATA3, RORC2, CD45, CD68, CD69, TLR2, TLR4, TLR9, MMP8) у новорожденных с НЭК и без развития данного осложнения. Результаты. Развитие НЭК различной степени тяжести было зарегистрировано у 25 из 590 новорожденных (4,2%). Из исследования были исключены 172 новорожденных ввиду недостаточного количества/качества биоматериала. Из 418 новорожденных НЭК был диагностирован у 18 детей, 16 из которых родились ранее 33-й недели беременности. В связи с этим сравнительному анализу подверглись биологические образцы только 130 недоношенных детей, родившихся на 24-32-й неделях беременности. Проведено сравнение уровня экспрессии генов иммунного ответа в клетках биологических образцов 16 глубоконедоношенных детей, течение неонатального периода которых было осложнено развитием НЭК, с аналогичными показателями 114 глубоконедоношенных детей, у которых в течение неонатального периода не было выявлено развития НЭК. Установлено статистически значимое повышение экспрессии гена TLR4 в клетках венозной крови в первые часы жизни у глубоконедоношенных новорожденных с развившимся НЭК. Также отмечена тенденция к снижению GATA3 у новорожденных с реализацией НЭК по сравнению с группой контроля. Был проведен ROC-анализ десятичного логарифма соотношения уровней экспрессии указанных генов, который показал, что Lg(TLR4/GATA3) обладает хорошей диагностической ценностью: при пороговом значении 0,74 чувствительность модели составила 88%, а специфичность - 77%; прогностическая ценность положительного результата (PPV) - 39%, прогностическая ценность отрицательного результата (NPV) - 97%. При исследовании экспрессии генов TLR4, GATA3 в буккальном эпителии статистически значимых различий между группами новорожденных получено не было. Уровни экспрессии других генов статистически значимо не различались между группами. Заключение. Определение экспрессии гена TLR4 в клетках венозной крови глубоконедоношенных новорожденных, родившихся на 24-32 неделях гестации, в первые часы жизни может быть использовано в качестве предиктора последующего развития НЭК.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Ирина Владимировна Никитина

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России

Email: i_nikitina@oparina4.ru
к.м.н., в.н.с. отделения реанимации и интенсивной терапии №2 института неонатологии и педиатрии, заведующая учебной частью, доцент кафедры неонатологии, ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России

Андрей Евгеньевич Донников

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России

Email: a_donnikov@oparina4.ru
к.м.н., заведующий лабораторией молекулярно-генетических методов, врач клинической лабораторной диагностики Института репродуктивной генетики

Ольга Александровна Крог-Йенсен

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России; ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет)

Email: olgaborisevich@gmail.com
к.м.н., врач-неонатолог отделения реанимации и интенсивной терапии №2 Института неонатологии и педиатрии, доцент кафедры неонатологии, ФГАОУ ВО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова» Минздрава России

Регина Викторовна Крашенинникова

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России

Email: r_krasheninnikova@oparina4.ru
врач клинической лабораторной диагностики лаборатории молекулярно-генетических методов

Оксана Сергеевна Непша

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России

Email: o_nepsha@oparina4.ru
научный сотрудник отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия имени профессора Б.В. Леонова Института репродуктивной медицины

Анна Алексеевна Ленюшкина

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России

Email: a-lenushkina@yandex.ru
к.м.н., заведующая отделением реанимации и интенсивной терапии №2 института неонатологии и педиатрии

Дмитрий Николаевич Дегтярев

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России; ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет)

Email: d_degtiarev@oparina4.ru
д.м.н., профессор, заместитель директора по научной работе, заведующий кафедрой неонатологии, ФГАОУ ВО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России

Список литературы

  1. Дорофеева Е.И., Подуровская Ю.Л., Буров А.А., Рюмина И.И., Нароган М.В., Грошева Е.В., Ионов О.В, Балашова Е.Н., Киртбая А.Р., Дегтярев Д.Н., Хаматханова Е.М. Диагностика и консервативное лечение новорожденных с некротизирующим энтероколитом (проект клинических рекомендаций). Неонатология: новости, мнения, обучение. 2014; 2: 84-92.
  2. Hull M.A., Fisher J.G., Gutierrez I.M., Jones B.A., Kang K.H., Kenny M. et al. Mortality and management of surgical necrotizing enterocolitis in very low birth weight neonates: a prospective cohort study. J. Am. Coll. Surg. 2014; 218(6): 1148-55. https://dx.doi.org/10.1016/j.jamcollsurg.2013.11.015.
  3. Kastenberg Z.J., Sylvester K.G. The surgical management of necrotizing enterocolitis. Clin. Perinatol. 2013; 40(1): 135-48. https://dx.doi.org/ 10.1016/j. clp.2012.12.011.
  4. Biouss G, Antounians L., Li B., O'Connell J.S., Seo S., Catania V.D. et al. Experimental necrotizing enterocolitis induces neuroinflammation in the neonatal brain. J. Neuroinflammation. 2019; 16(1): 97. https://dx.doi. org/10.1186/s12974-019-1481-9.
  5. Tremblay Ё., Thibault M.P., Ferretti E., Babakissa C., Bertelle V., Bettolli M. et al. Gene expression profiling in necrotizing enterocolitis reveals pathways common to those reported in Crohn’s disease. BMC Med. Genomics. 2016; 9: 6. https:// dx.doi.org/10.1186/s12920-016-0166-9.
  6. Yin Y., Liu F, Li Y., Tang R., Wang J. mRNA expression of TLR4, TLR9 and NF-kB in a neonatal murine model of necrotizing enterocolitis. Mol. Med. Rep. 2016; 14(3): 1953-6. https://dx.doi.org/10.3892/mmr.2016.5455.
  7. Silveira-Lessa AL, Quinello C., Lima L., Redondo A.C.C., Ceccon M.E.J.R., Carneiro-Sampaio M. et al. TLR expression, phagocytosis and oxidative burst in healthy and septic newborns in response to Gram-negative and Gram-positive rods. Hum. Immunol. 2016; 77(10): 972-80. https://dx.doi.org/10.1016/j. humimm.2016.07.230.
  8. Fenton T.R., Kim J.H. A systematic review and meta-analysis to revise the Fenton growth chart for preterm infants. BMC Pediatr. 2013; 13: 59. https://dx.doi. org/10.1186/1471-2431-13-59.
  9. Wynn J.L. Defining neonatal sepsis. Curr. Opin. Pediatr. 2016; 28(2): 135-40. https://dx.doi.org/10.1097/MOP.0000000000000315.
  10. Weiss S.L., Peters M.J., Alhazzani W, Agus M.S.D., Flori H.R., Inwald D.P et al. Surviving sepsis campaign international guidelines for the management of septic shock and sepsis-associated organ dysfunction in children. Pediatr. Crit. Care Med. 2020; 21(2): e52-106. https://dx.doi.org/10.1097/ PCC.0000000000002198.
  11. Голубцова Ю.М., Дегтярев Д.Н. Современные подходы к профилактике, диагностике и лечению раннего неонатального сепсиса. Неонатология: новости, мнения, обучение. 2014; 2: 15-25. [Golubtsova Yu.M., Degtyarev D.N. Modern approaches to preventing, diagnosing, and treating early-onset neonatal sepsis. Neonatology: News, Opinions, Training. 2014; 2: 15-25. (in Russian)].
  12. Антонов А.Г., Байбарина Е.Н., Балашова Е.Н., Дегтярев Д.Н., Зубков В.В., Иванов Д.О., Ионов О.В., Карпова А.Л., Киртбая А.Р., Крохина К.Н., Крючко Д.С., Ленюшкина А.А., Ли А.Г., Малютина Л.В., Мебелова И.И., Никитина И.В., Петренко Ю.А., Рындин А.Ю., Рюмина И.И., Романенко А.В. и др. Врожденная пневмония (клинические рекомендации). Неонатология: новости, мнения, обучение. 2017; 4: 133-48. [Antonov A.G., Baybarina E.N., Balashova E.N., Degtyarev D.N., Zubkov V.V. et al. Congenital pneumonia (clinical practice guidelines). Neonatology: News, Opinions, Training. 2017; 4: 133-48. (in Russian)].
  13. Lemaitre B., Nicolas E., Michaut L., Reichhart J.M., Hoffmann J.A. Pillars article: the dorsoventral regulatory gene cassette spatzle/Toll/cactus controls the potent antifungal response in Drosophila adults. Cell. 1996. 86: 973-83. J. Immunol. 2012; 188(11): 5210-20.
  14. Майданник В.Г. Toll-подобные рецепторы и почки. Международный журнал педиатрии, акушерства и гинекологии. 2014; 6(1): 98-108. [Maidannik V.G. Toll-like receptors and kidneys. International Journal of Pediatrics, Obstetrics and Gynecology. 2014: 6(1): 98-108. (in Russian)].
  15. Rosadini C.V., Kagan J.C. Early innate immune responses to bacterial LPS. Curr. Opin. Immunol. 2017; 44: 14-9. https://dx.doi.org/10.1016/j.coi.2016.10.005.
  16. Никитина И.В., Донников А.Е., Крог-Йенсен О.А., Ленюшкина А.А., Быстрицкий А.А., Крючко Д.С., Ионов О.В., Зубков В.В., Дегтярев Д.Н. Генетические полиморфизмы у детей, ассоциированные с развитием врожденных инфекций. Акушерство и гинекология. 2019; 11: 175-85. https:// dx.doi.org/10.18565/aig.2019.11.175-185.
  17. Yamamoto Y., Gaynor R.B. Role of the NF-kappaB pathway in the pathogenesis of human disease states. Curr. Mol. Med. 2001; 1(3): 287-96. https://dx.doi.org/ 10.2174/1566524013363816.
  18. Wu H., Chen G., Wyburn K.R., Yin J., Bertolino P., Eris J.M. et al. TLR4 activation mediates kidney ischemia/reperfusion injury. J. Clin. Invest. 2007; 117(10): 2847-59. https://dx.doi.org/10.1172/ JCI31008.
  19. Robertson S.A., Hutchinson M.R., Rice K.C., Chin P.Y., Moldenhauer L.M., Stark M.J. et al. Targeting Toll-like receptor-4 to tackle preterm birth and fetal inflammatory injury. Clin. Transl. Immunology. 2020; 9(4): e1121. https:// dx.doi.org/10.1002/cti2.1121.
  20. Helmo F.R., Alves E.A.R., De Andrade Moreira R.A., Severino V.O., Rocha L.P., Monteiro M.L.G.D.R. et al. Intrauterine infection, immune system and premature birth. J. Matern. Fetal Neonatal Med. 2018; 31(9): 1227-33. https://dx.doi.org /10.1080/14767058.2017.1311318.
  21. Equils O., Lu D., Gatter M., Bertolotto C., Arditi M., McGregor J.A. et al. Chlamydia heat shock protein 60 induces trophoblast apoptosis through TLR4. J. Immunol. 2006; 177(2): 1257-63. https://dx.doi.org/10.4049/ jimmunol.177.2.1257.
  22. Flemming A. Deciphering the gut-brain link in NEC. Nat. Rev. Immunol. 2019; 19(2): 70-1. https://dx.doi.org/10.1038/s41577-018-0115-2.
  23. Redondo A.C.C., Ceccon M.E.J.R., Silveira-Lessa A.L., Quinello C., Palmeira P., Carvalho W.B. et al. TLR-2 and TLR-4 expression in monocytes of newborns with late-onset sepsis. J. Pediatr. (Rio J). 2014; 90(5): 472-8. https://dx.doi.org/ 10.1016/j.jped.2013.12.012.
  24. Denning N.L., Prince J.M. Neonatal intestinal dysbiosis in necrotizing enterocolitis. Mol. Med. 2018; 24(1): 4. https://dx.doi.org/10.1186/s10020-018-0002-0.
  25. Hackam D.J., Afrazi A, Good M., Sodhi C.P. Innate immune signaling in the pathogenesis of necrotizing enterocolitis. Clin. Dev. Immunol. 2013; 2013: 475415. https://dx.doi.org/10.1155/2013/475415.
  26. Jia H, Sodhi C.P, Yamaguchi Y., Lu P., Martin L.Y., Good M. et al. Pulmonary epithelial TLR4 activation leads to lung injury in neonatal necrotizing enterocolitis. J. Immunol. 2016; 197(3): 859-71. https://dx.doi.org/10.4049/ jimmunol.1600618.
  27. Hui L, Dai Y, Guo Z., Zhang J., Zhen F., Bian X. et al. Immunoregulation effects of different 76T cells and toll-like receptor signaling pathways in neonatal necrotizing enterocolitis. Medicine (Baltimore). 2017; 96(8); e6077. https:// dx.doi.org/10.1097/MD.0000000000006077.
  28. Su T.Y., Chen I.L., Huang H.C. ID: 373. Salivatory cytokine - a non-invasive predictor for the development of bronchopulmonary dysplasia in premature neonates. Pediatr. Res. 2019; 86(Suppl. 1: The 3rd Congress of Joint European Neonatal Societies. 17-21 September 2019 Maastricht, the Netherlands.)
  29. Никитина И.В., Непша О.С., Донников А.Е., Трофимов Д.Ю., Милая О.В., Дегтярева А.В., Ионов О.В., Зубков В.В., Дегтярев Д.Н. Современные возможности молекулярно-генетических методов в диагностике раннего неонатального сепсиса у недоношенных новорожденных. Акушерство и гинекология. 2016; 12: 106-13. https://dx.doi.org/10.18565/aig.2016.12.106 13
  30. Takaku M., Grimm S.A., Shimbo T., Perera L., Menafra R., Stunnenberg H.G. et al. GATA3-dependent cellular reprogramming requires activation-domain dependent recruitment of a chromatin remodeler. Genome Biol. 2016; 17: 36. https://dx.doi.org/10.1186/s13059-016-0897-0.
  31. Минеев В.Н., Сорокина Л.Н., Еремеева А.В. Транскрипционные факторы gata-3, Foxp3 и их кооперативные взаимодействия при бронхиальной астме. Вестник Санкт-Петербургского университета. Медицина. 2012; 4: 23-31.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© ООО «Бионика Медиа», 2020