The diagnostic value of determination of haptoglobin level and ceruloplasmin activity in patients with ovary cancer

Full Text

Н есмотря на интенсификацию развития новых методов диагностики и лечения, рак яичников по- прежнему является актуальной проблемой здравоохранения. Даже при ранних стадиях на фоне проводимого лечения остается высокой частота рецидивирования этого заболевания, до 30% больных умирают в дальнейшем от прогрессирования опухолевого процесса [1-4]. Раннее выявление субклинических локальных рецидивных опухолей позволит своевременно продолжить специальное лечение и улучшить прогноз заболевания, поэтому ведется поиск диагностических маркеров, способствующих улучшению ранней диагностики прогрессирования рака яичников. В связи с большой актуальностью изучения данной патологии и развитием новых протеомных технологий в 2003 г. были опубликованы результаты широкомасштабного протеомного исследования, посвященного поиску биомаркеров для ранней диагностики рака яичников [5]. В качестве потенциального биомаркера первичного рака яичников было предложено определение альфа-субъединицы гаптоглобина. Дальнейшие исследования подтвердили значимость определения данного белка для ранней диагностики заболевания и прогноза выживаемости больных с различными стадиями заболевания [6-11]. Показано, что содержание гаптоглобина в крови неспецифически повышается не только при острых воспалительных процессах, но и при злокачественных новообразованиях различной локализации (молочной железы, легкого, желудочно-кишечного тракта, при урогенитальной патологии, злокачественных лимфомах, лейкозе) [7, 9, 12-14]. С обменом железа, в котором определенную роль играет гаптоглобин, тесно связан обмен меди. У онкологических больных при различной локализации опухоли обнаружено повышение уровня другого белка острой фазы воспаления церулоплазмина, осуществляющего в крови транспорт меди [15-17]. Ранее нами также было выявлено увеличение оксидазной активности церулоплазмина в крови онкологических больных с различной локализацией опухоли, в том числе при раке яичников [18, 19]. Было высказано предположение, что церулоплазмин используется опухолевыми клетками как эндогенный стимулятор развития новых кровеносных сосудов [20]. Обращает на себя внимание то, что в известных исследованиях содержание гаптоглобина и церулоплазмина определяли для оценки значения этих белков в ранней диагностике первичного онкологического процесса. Целью нашей работы являлось сопоставление результатов исследования содержания гаптоглобина и церулоплазмина в крови больных раком яичников, находившихся на послеоперационном мониторинге, с динамикой ультразвуковой картины рецидива рака яичников в целом и с типом кровотока в рецидивной опухоли. Материал и методы В исследование включили 61 больную раком яичников III-IV стадии (45-75 лет, серозная цистаденокар- цинома). Все больные прооперированы в объеме надвла- галищной ампутации матки с придатками с резекцией большого сальника и получили 6 курсов адъювантной химиотерапии, у всех была достигнута полная клиническая ремиссия. В дальнейшем по результатам УЗ- мониторинга у 50 больных выявлен локальный рецидив в полости малого таза, а 11 женщин продолжали наблюдаться без рецидива, оставаясь в состоянии ремиссии. В процессе мониторинга больных проводили УЗ-оценку эффективности лечения рецидива с помощью определения совокупности сонографических признаков локальных опухолевых характеристик в стандартных режимах настройки ультразвукового сканера IU 22 PHILIPS. Согласно разработанной в ФГБУ РНИОИ методике определения внутриопухолевых параметров артериального кровотока, по максимальным артериальным скоростям оценивали интенсивность васкуляризации и скорость кровотока в рецидивных опухолях в контрольном допплеровском объеме (гиперваскулярный, изоваскуляр- ный, гиповаскулярный, аваскулярный кровоток) [21]. Среди больных с рецидивом у 10 была аваскулярная рецидивная опухоль (группа I), у 20 женщин в сосудах рецидивной опухоли регистрировали гиперинтенсивный кровоток (группа II), у остальных интенсивность васку- ляризации и скорость кровотока имели промежуточные значения. Содержание гаптоглобина в плазме крови определяли иммунотурбидиметрическим методом на биохимическом анализаторе cObAS INTEGRA 400 ("Roche"). Оксидазную активность церулоплазмина оценивали колориметрически [22]. Контрольную группу составили 30 практически здоровых женщин без онкогинекологи- ческой патологии. Статистическую обработку результатов проводили, используя параметрические и непараметрические критерии. Различия считали статистически достоверными при p < 0,05-0,001 или имеющими тенденцию к достоверности при 0,1 > p > 0,05. Результаты и обсуждение Анализ содержания в крови гаптоглобина показал, что по сравнению со значением в группе здоровых женщин у больных раком яичников, находящихся в состоянии ремиссии, его уровень был выше на 50% при p < 0,05 (при этом его значение попадало в референтный интервал - менеее 2 г/л), а у больных с рецидивом - выше на 121% при p < 0,01 (см. таблицу и рисунок). В группе больных с рецидивом, у которых УЗ-картина отражала положительную динамику противоопухолевого лечения, уровень гаптоглобина 1,76 ± 0,17 г/л соответствовал значениям в группе больных с ремиссией, что было на 48% выше (p < 0,05), чем в группе здоровых женщин (см. рисунок). В группе больных с рецидивом с отрицательной динамикой УЗ-картины содержание гаптоглобина составило 2,93 ± 0,34 г/л (вышло за пределы референтного значения 2 г/л), что превышало в 2,5 раза уровень у здоровых женщин (p < 0,001) и было на 65% выше (р < 0,01) значений в группе больных с ремиссией. Оценка уровня гаптоглобина в группах с различным типом кровотока в рецидивной опухоли показала, что в группе I (аваскулярный рецидив) уровень данного белка был выше на 57%, в группе II (гиперинтенсивный кровоток в рецидивной опухоли) - на 134% соответствующего значения в группе здоровых женщин (см. таблицу, рисунок). В группе больных с аваскулярным рецидивом содержание данного белка достоверно не отличалось от значения в группе больных в состоянии ремиссии. В группе женщин с гиперинтенсивным кровотоком в рецидивной опухоли содержание гаптоглобина было достоверно выше по сравнению со значением как в группе с ремиссией - на 56% (р < 0,01), так и в группе с аваскулярным рецидивом - на 49% (р < 0,01). При анализе величины оксидазной активности церулоплазмина в плазме крови больных, находящихся в ремиссии, не было выявлено достоверных отличий от уровня контрольной группе (см. таблицу, рисунок). В то же время в группе больных с рецидивом рака яичников данный показатель возрастал в среднем на 19% по сравнению с уровнем у здоровых женщин и больных в ремиссии. При этом его увеличение отмечалось уже в группе больных с аваскулярной рецидивной опухолью (23%) по сравнению с уровнем контроля и в группе больных, находящихся в ремиссии (р < 0,05), а в группе с гиперинтенсивным кровотоком оксидазная активность церулоплазмина оставалась повышенной (хотя и недостоверно из-за большой ошибки средней) на 20% по сравнению со значением в группе больных с ремиссией. Таким образом, исследование содержания гаптогло- бина в крови показало, что у больных раком яичников в ремиссии его уровень повышен по сравнению с уровнем в группе здоровых женщин, однако его значения попадают в референтный интервал до 2 г/л. При обнаружении локального аваскулярного рецидива не отмечено изменения содержания гаптоглобина по сравнению с уровнем у больных в ремиссии. При этом, согласно нашим данным, происходит значительное нарастание уровня данного белка при усилении васкуляризации рецидивной опухоли в результате неэффективной терапии больных с рецидивом, т. е. на более поздних этапах формирования рецидивной опухоли. О биологическом значении этого явления в настоящее время известно немного. Установлено, что синтез гаптоглобина может происходить не только в печени, но и в опухолевых клетках при раке эндометрия, раке яичников [9, 23]. Это может быть обусловлено основной функцией гаптогло- бина - связыванием в прочный комплекс гемоглобина и предотвращением потери очень ценного для организма железа. Гаптоглобин является транспортным белком, он необратимо связывает поступающий в плазму гемоглобин в прочный комплекс, обладающий пероксидазной активностью, препятствуя, таким образом, развитию свободнорадикальных окислительных реакций. Обнаруженная нами динамика уровня гаптоглобина в крови больных раком яичников с различной васкуляризацией рецидивной опухоли подтверждает некоторые данные литературы о возможности участия этого белка в процессах неоангиогенеза как фактора, модулирующего пролиферацию и дифференциацию эндотелиальных клеток при формировании новых сосудов [24-26]. Однако полный спектр функций данного белка при онкологической патологии недостаточно известен. Содержание гаптоглобина и оксидазная активность церулоплазмина в плазме крови больных раком яичников Группы Белок контрольная (п = 30) ремиссия (п = 11) рецидив (п = 50) I (п = 10) II (п = 20) Г аптогло- бин, г/л 1,19 ± 0,10 1,78 ± 0,22 р1 < 0,05 2,63 ± 0,25 р1 < 0,05 р21 < 0,05 1,87 ± 0,10 р1 < 0,05 2,78 ± 0,23 р1 < 0,001 р2 < 0,01 р23 < 0,01 Церулоплазмин, мкМ/л 1,38 ± 0,09 1,36 ± 0,16 1,64 ± 0,10 0,1 > рг > 0,05 1,70 ± 0,08 р1 < 0,05 0,1 > р2 > 0,05 1,63 ± 0,14 Примечание. Достоверность различий между группами: р1 по сравнению с контрольной, р2 по сравнению с группой с ремиссией, р3 по сравнению с группой I. В отличие от динамики содержания гаптоглобина достоверные изменения активности церулоплазмина мы наблюдали уже у больных с аваскулярным рецидивом, т. е. на более раннем этапе формирования рецидивной опухоли. Это может свидетельствовать о более ранней активации метаболизма меди, что связано прежде всего с активизацией энергозависимого процесса пролиферации, поскольку медь входит в состав фермента дыхательной цепи митохондрий цитохром С-оксидазы. Медь также играет важную роль в процессах ангиогенеза на уровне экспрессии и функционирования проангиоген- ных медиаторов (таких как интерлейкины 1, 6, 8, фибро- нектин, ангиогенин, фактор роста эндотелия сосудов, фактор роста фибробластов), участвует в модуляции подвижности эндотелиальных клеток [27-32]. Кроме того, нельзя забывать о важной роли церулоплазмина как основного неферментативного антиоксиданта плазмы крови, являющегося эффективным тушителем свободных радикалов. Ранее нами представлены данные о снижении интенсивности хемилюминесценции плазмы крови в стадии аваскулярного рецидива [33], что может свидетельствовать о важности контроля интенсивности свободнорадикального окисления в крови на начальных этапах формирования рецидивной опухоли. % £ 150 О О. II о 100- О* д/Ф 50- (Л® а*» А*1 а*' Л* л® а»' (00s t\ev Гаптоглобин Церулоплазмин Динамика содержания гаптоглобина и оксидазной активности церулоплазмина в плазме крови больных раком яичников (контроль - уровень у здоровых женщин). Достоверность различий между группами: * - по сравнению с контрольной, # - по сравнению с группой с ремиссией, ** - по сравнению с группой с аваскулярным рецидивом. Заключение Анализ результатов исследования показал более значительное изменение содержания гаптоглобина при выраженной васкуляризации рецидивной опухоли. При этом изменение оксидазной активности церулоплазмина было менее значительным, хотя и предшествовало изменению содержания гаптоглобина, поскольку выявлено на этапе аваскулярного рецидива. Сопоставление результатов биохимического исследования и результатов УЗ-мониторинга больных раком яичников с рецидивом дает более полную картину динамики заболевания и эффективности проводимого лечения рецидива. Следовательно, проведение этих доступных биохимических исследований можно рекомендовать в качестве дополнительных тестов при обследовании женщин с данным заболеванием.

About the authors

E. I Surikova

The Rostov research institute of oncology, Minzdrav of Russia

344037 Rostov-on-Don, Russia

Irina A. Goroshinskaia

The Rostov research institute of oncology, Minzdrav of Russia

Email: iagor17@mail.ru
MD, PhD, DSc 344037 Rostov-on-Don, Russia

N. A Maksimova

The Rostov research institute of oncology, Minzdrav of Russia

344037 Rostov-on-Don, Russia

P. S Kachesova

The Rostov research institute of oncology, Minzdrav of Russia

344037 Rostov-on-Don, Russia

M. M Sergeeva

The Rostov research institute of oncology, Minzdrav of Russia

344037 Rostov-on-Don, Russia

References

Supplementary files