The importance of analysis of nonsaturation of lipids of blood plasma in newborns with low and extremely low body mass at birth

Full Text

Д ля периода адаптации недоношенных новорожденных характерно высокое напряжение метаболических процессов. В течение периода новорожденности у них достаточно интенсивно происходит структурное и функциональное созревание органов и систем, для чего требуется высокое энергетическое обеспечение [1, 2]. Кроме того, недоношенные дети, в особенности с низкой и экстремально низкой массой тела при рождении, находятся в группе риска по реализации врожденной инфекции и развитию раннего или позднего неонатального сепсиса. К факторам риска развития сепсиса прежде всего относится недоношенность, потому что у недоношенных детей слабые противоинфекционные барьеры на пути инфекционного агента и они иммунологически не защищены от инфекции в силу особенностей их организма [3]. Чем больше степень недоношенности, тем с большими проблемами в лечении и выхаживании приходится сталкиваться. Компенсаторные возможности детского организма велики, но и они испытывают огромную нагрузку в период неонатальной адаптации. Наряду со многими метаболическими нарушениями, характерными для периода новорожденности, в последние годы существенное внимание уделяется липидным нарушениям, в частности показателям обмена холестерина, триглицеридов, фосфолипидов, неэтерифицирован- ных жирных кислот (НЭЖК). Работами последних лет показана важная роль ненасыщенных жирных кислот (ННЖК) в образовании в организме высокоактивных веществ, среди которых особого внимания заслуживают арахидоновая (предшественник простагландинов), а также линолевая и лино- леновая кислоты. Эти кислоты обладают очень высокой способностью участвовать в реакциях присоединения или разделения по месту двойных связей (ДС) [4]. У новорожденных с течением внутриутробной инфекции, в том числе TORCH-комплекса, органами-мишенями являются не только клетки эпителия слизистых и кожи, иммунной системы, а и эндотелий сосудов, нейроны и нейроглия, содержащая запасы стволовых клеток. Недостаточная активность макрофагов-моноцитов ухудшает барьерную функцию органов с дополнительным поражением нейронов, миокардиоцитов, гепатоцитов и других клеток персистирующими инфекциями и развитием системной воспалительной реакции мезенхимальных тканей [5]. При остром течении воспалительного процесса в первую очередь мобилизуются ННЖК, углеродная цепь которых содержит ДС, что приводит к значительным морфологическим и функциональным изменениям клеточных мембран: увеличению жесткости, нарушению трансмембранного транспорта, процессов диффузии, изменению активности ряда мембраносвязанных ферментов, нарушению баланса в системе оксиданты-антиоксиданты [6-8]. Известно также, что при активно текущем воспалительном процессе изменяются жирно-кислотный спектр и концентрация ННЖК в крови, и эти изменения касаются как НЭЖК, так и кислот липидного комплекса. Выявлена корреляция тяжести состояния больного с характером и степенью сдвигов концентрации НЭЖК. Высокая метаболическая активность жирных кислот (ЖК), особенно ненасыщенных, участие их в процессах перекисного окисления липидов, синтеза простагландинов вызывают необходимость более углубленного изучения этого класса липидов. Однако определение спектра ЖК газохроматографическим методом малопригодно для мониторинга недоношенных новорожденных из-за большой продолжительности исследования и его сложности. Новым и перспективным методом оценки нарушений липидного обмена является определение общей ненасыщенности липидов сыворотки крови, которая зависит от суммарного количества ДС в ННЖК. Материал и методы Ненасыщенность липидов плазмы крови при рождении и в разные сроки постнатального развития (ДС, ммоль/л; M ± m) Группа детей Срок исследования 1-е сутки 3-и сутки 14-е сутки 1 мес 1-я (n = 3) 10,80± 0,50* 7,5± 1,20** 15,5± 2,23*** 21,7± 3,10*** 2-я (n = 2) 11,00± 0,31* 16,5± 2,05** 15,6± 1,85 20,3± 1,88*** 3-я (n = 7) 12,9± 1,41 13,0± 2,13 14,1± 2,48 12,5± 1,46 4-я (n = 3) 10,67± 1,39* 8,9± 1,91* 11,0± 1,52 - 5-я (n = 4) 13,9± 2,45 15,4± 2,12 12,3± 1,50 - Группа сравнения (n = 7) 15,4± 2,00 15,4± 2,10 - - Примечание. * - p < 0,05 - достоверность различий показателей у детей 1-х суток жизни с показателями в группе сравнения; ** - p < 0,05 - с показателями у детей 3-х суток жизни; *** - p < 0,05 - с показателями у детей 14-х суток жизни. Теоретический интерес и практическая значимость исследований побудили нас определить ненасыщен- ность липидов сыворотки крови (это сделано впервые) у доношенных новорожденных, недоношенных новорожденных с низкой и экстремально низкой массой тела, получавших лечение в условиях ОРИТН. Под наблюдением находились 25 детей, 7 из которых - здоровые доношенные новорожденные, вошедшие в группу сравнения. В основную группу вошли дети, гестационный возраст которых составил 28-40 нед, постнатальный возраст - от 1 сут жизни до 1 мес, масса тела при рождении была 750- 4020 г, которые находились в условиях ОРИТН. У всех детей основной группы при рождении выявлены признаки реализации врожденной инфекции, прежде всего пневмонии, потребовавшей проведения искусственной вентиляции легких (ИВЛ), интенсивной терапии в условиях ОРИТН, а также лабораторные признаки активного течения системной воспалительной реакции (СВР). В 1-й группе были недоношенные новорожденные с экстремально низкой массой тела (менее 1000 г) при рождении (12%), во 2-й - недоношенные новорожденные с очень низкой массой тела (1001-1500 г) при рождении (8%), в 3-й - недоношенные новорожденные с низкой массой тела (1501-2000 г) при рождении (28%), в 4-й - дети, у которых масса тела при рождении составила 2001-2500 г (12%), в 5-й - доношенные дети (16%), находившиеся с рождения в условиях ОРИТН. Ненасыщенность липидов плазмы крови определяли при рождении (пуповинная кровь), на 3-и, 14-е сутки жизни и в 1-й месяц постнатального возраста. Определение ненасыщенности липидов плазмы крови (ДС) проводили методом озонирования с помощью отечественного прибора АДС-5М, разработанного в Институте химической физики им. Н.Н. Семенова РАН [9]. Метод озонирования основан на взаимодействии озона со связью С=С ННЖК в эквимольном соотношении. Расход озона на химическую реакцию регистрировался спектрофотометрически. Метод характеризуется высокой чувствительностью, точностью (±1%), селективностью и экспрессностью (1-3 мин на одно определение). Полученные данные обработаны методом вариационной статистики с использованием пакета статистических программ Stat Soft 60. Результаты и обсуждение В таблице представлены результаты исследования ненасыщенности липидов плазмы крови - ДС. Нами определены нормативные значения ненасы- щенности липидов плазмы крови (в ммоль/л) у 7 здоровых доношенных новорожденных (группа сравнения) в 1- е сутки жизни (при рождении): ДС=15,4 ± 2,0 ммоль/л. Сравнительный анализ уровня ДС в этих группах в зависимости от компенсации метаболических нарушений показал, что его динамика напрямую зависела от степени проявления признаков врожденной инфекции и от гестационного возраста. Оказалось, что при нарастании активности инфекционного процесса (лейкоцитоз/лейкопения, тромбоцитопения, высокий уровень С-РБ, ПКТ) уровень ДС достоверно снижался. У 20% детей с признаками течения врожденной инфекции, подтвержденной клинико-лабораторными данными, с первых суток жизни уровень ДС был ниже - 10 (8,24±2,0) ммоль/л. Сравнительный анализ показал, что у новорожденных 1-й и 2-й групп уровень ДС был значительно ниже по сравнению с таковым в группе сравнения. Наиболее низкий уровень ДС был у детей 1-й группы на 1-е и 3-и сутки жизни (p < 0,05 и p < 0,01 соответственно). Дети 1-й группы, перенесшие фетоплацентарную недостаточность во время внутриутробного развития, гипоксию при рождении, а также находящиеся на полном парентеральном питании в связи с развитием энтероколита, безусловно, испытывают глубокий дефицит ННЖК. К двум неделям жизни отмечалась нормализация уровня ДС (15,5 ± 2,23 ммоль/л), что обусловлено стабилизацией общего состояния ребенка и эффективностью проводимой терапии. Именно у детей 1-й группы, которые длительно находились на полном парентеральном питании и испытывали дефицит основных нутриентов, выявлялось самое низкое значение ДС. Кроме того, нами отмечено, что длительное сохранение показателя ДС на низких цифрах (7,5 ± 1,2 ммоль/л) является прогностически крайне неблагоприятным признаком, свидетельствующим о слабой эффективности проводимой терапии либо об отсутствии ответа на нее организма больного, вплоть до летального исхода при тяжелом течении врожденной инфекции, и является основанием для принятия кардинальных мер по изменению тактики лечения, прежде всего по усилению антиоксидантной, мембраностабилизирующей, антипротеолитической терапии. В работе была выявлена закономерность изменения уровня насыщенности - ДС (достоверное снижение) в зависимости от тяжести системной воспалительной реакции во 2 - 5-й группах, но в 1-й группе - у детей с экстремально низкой массой тела при рождении - эти изменения более выраженные, более глубокие, что обусловлено их физиологическими особенностями (глубокой незрелостью). У новорожденных 2 - 5-й групп при стабилизации клинического состояния и нормализации показателей СВР к 3-м, 4-м суткам и 1 мес жизни уровень ДС постепенно нормализовался. Организм здорового человека имеет ограниченные возможности синтезировать необходимое количество ННЖК, больные люди и недоношенные новорожденные практически не могут самостоятельно синтезировать их [5] . Течение инфекционного процесса, электролитные нарушения, дефицитные состояния приводят к избыточному накоплению перекисей липидов, являющихся, как известно, ингибиторами тканевого дыхания, что в свою очередь усугубляет метаболические нарушения [10]. Число ДС в составе ЖК является тестом, который позволяет оценить насыщенность их пула в составе липидов плазмы крови. Определение уровня ДС является дополнительным методом динамического наблюдения за состоянием новорожденного в период адаптации, особенно в условиях проводимой интенсивной терапии в ОРИТН. Кроме того, изменения уровня ДС могут служить прогностически значимым критерием оценки тяжести состояния новорожденного в критическом состоянии. Наиболее выраженные нарушения уровня ненасы- щенности липидов - ДС отмечались у новорожденных с низкой и экстремально низкой массой тела при рождении. Наиболее длительно низкий уровень показателя ДС сохранялся у новорожденных с подтвержденным клинико-лабораторными данными течением инфекционного процесса (сепсиса), независимо от гестационно- го возраста. Наблюдение за динамикой ненасыщенности липидов сыворотки крови у новорожденных свидетельствует о том, что показатель ДС можно использовать в качестве дополнительного критерия в лабораторной диагностике и для мониторинга, а также для объективизации формирования адекватной тактики лечения (введения антиоксидантной терапии, иммунокорригирующей терапии, мембраностабилизирующих препаратов), прогнозирования осложнений. Эти предварительные данные диктуют необходимость более детального изучения взаимосвязи содержания ДС в липидных компонентах крови у новорожденных в период адаптации.

About the authors

Tat’yana I. Turkina

The N.I. Pirogov Russian national research medical university Minzdrav of Russia

Email: kldkaf@yandex.ru
MD, PhD, DSc 117997 Moscow, Russia

S. N Scherbo

The N.I. Pirogov Russian national research medical university Minzdrav of Russia

117997 Moscow, Russia

E. V Kolodiiy

The N.I. Pirogov Russian national research medical university Minzdrav of Russia

117997 Moscow, Russia

M. V Degtyareva

The N.I. Pirogov Russian national research medical university Minzdrav of Russia

117997 Moscow, Russia

E. V Kiseleva

The N.N. Semenov institute of chemical physics of the Russian academy of sciences

Moscow, Russia

P. D Vaganov

The N.I. Pirogov Russian national research medical university Minzdrav of Russia

117997 Moscow, Russia

V. V Talitskiy

The N.I. Pirogov Russian national research medical university Minzdrav of Russia

117997 Moscow, Russia

References

Supplementary files