VZAIMOSVYaZ' ANTIMIKROBNYKh PEPTIDOV, SEKRETORNYKh IMMUNOGLOBULINOV I MIKROBIOTY KOZhI PRI AKNE

详细

全文:

Наиболее многочисленными резидентными родами бактерий, населяющих кожу человека в норме, являются Staphylococcus spp. и Propionibacterium spp., причем именно эти рода считают значимыми в патогенезе акне вульгарис. Развитие воспаления при акне сопровождается активацией врожденного и адаптивного иммунитета. Одним из важных факторов врожденного гуморального иммунитета являются антимикробные пептиды (АМП), активные против всех классов микроорганизмов. В секрете потовых желез человека насчитывают свыше 10 видов АМП, механизм действия которых на патогены сводится в основном к деструкции мембран цитоплазмы. На этом свойстве АМП основана недавно разработанная нами методика, позволяющая оценить суммарную активность АМП в водорастворимой фракции кожного секрета. Использование данной методики позволило ответить на вопрос, отличается ли активность АМП при акне от таковой у людей с нормальной кожей, а также сравнить полученные данные с уровнями секреторного иммуноглобулина класса А и основными представителями микробиоты кожи. Материал и методы. Пациентов с акне (всего 49 человек) различали по степени тяжести: 1 - легкая, 2 - средняя, 3 - среднетяжелая, 4 - тяжелая. Контрольная группа состояла из 33 человек без клинических проявлений. Стафилококковую микрофлору высевали с кожи лица методом отпечатков с кожи лица и идентифицировали по стандартной схеме [В.Г. Арзуманян и соавт., 2004]. Пропионовые бактерии собирали методом смыва также с кожи лица и идентифицировали методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (ПЦР-РВ) [Глоба А.Г. и соавт., 2012]. Активность АМП определяли в водорастворимой фракции кожного секрета, используя тест-культуру Candida albicans [патент Арзуманян В.Г. и соавт., 2016]. Активность АМП выражали как процент дрожжевых клеток, убитых в процессе инкубации с анализируемым субстратом. Концентрации sIgA оценивали методом иммуноферментного анализа (ИФА) с помощью тест-системы «Вектор-Бест» (Россия). Результаты. Разделив всех обследованных на две категории: группу больных акне и группу контроля, а полученные данные по активности АМП на несколько интервалов значений - от 0 до 10%, 10,1-20% и т.д., можно получить зависимость между значениями активности АМП, укладывающимися в данный интервал, и соответствующим данному интервалу числом пациентов. Эта зависимость близка к кривой нормального распределения Гаусса для обеих групп, причем в группе больных акне наибольшее число пациентов соответствует интервалу активности 20,1-30%, а в группе контроля - 40,1-50%. Медианы значений активности равны: в группе больных акне 30,7%; в контрольной группе 40,5% (p ≤ 0,01). Кроме того, обнаружена обратная корреляция высокой силы между степенью тяжести течения акне и активностью АМП (r = -0,826) (см. таблицу). В защите эпителиальных тканей от микроорганизмов также принимают участие иммуноглобулины, особенно секреторные антитела класса А, которые в определенной концентрации (10-100 мг/л) могут обладать самостоятельной антимикробной активностью [Kavishwar A., 2006]. Концентрации sIgA в кожном секрете (смыве) оказались довольно низкими, однако, различались у больных акне (медиана 1,71 мкг/л) и в группе контроля (медиана 0,78 мкг/л); p ≤ 0,01. Кроме того, установлена прямая корреляция невысокой силы между rконцентрацией sIgA и тяжестью течения акне (см. таблицу), что вполне закономерно. При таких низких концентрациях на поверхности кожи эти иммуноглобулины не могут играть такой значительной роли в защите от микроорганизмов, как АМП. Cреди 5 видов стафилококков наиболее часто встречающимся в обеих группах является S. aureus у больных акне (56,3%) и в группе контроля (42,9%). Обсемененность стафилококками (в том числе и St. aureus) варьировала от 102 до 104 КОЕ/дм2 в обеих группах, причем медиана этого показателя в группе больных акне составила 2 × 103 КОЕ/дм2, а в контрольной группе 1,4 × 103 КОЕ/дм2. Однако различия нельзя считать значимыми, поскольку критерий Манна- Уитни p > 0,05. Частота встречаемости St. aureus значительно коррелировала с тяжестью течения акне (r = 0,931) и находилась в обратной корреляции с медианами активности АМП (r = -0,863). Выявлено, что у всех обследованных встречались все три вида пропионовых бактерий - P. acnes (медиана обсемененности 9,7 × 104 КОЕ/см2), P. granulosum (3,5 × 103 КОЕ/см2), P. avidum (1,7 × 104 КОЕ/см2). Немного превалирующим видом в обеих группах явился P. acnes, однако величины обсемененности одинаковыми видами между группами практически не различалась (p > 0,05). Таким образом, снижение защитных свойств водорастворимой фракции кожного секрета из-за более низкой совокупной активности АМП способствует возникновению акне вульгарис. Обнаруженные концентрации секреторных иммуноглобулинов не могут обеспечить значимой защиты кожи, хотя и статистически значимо повышены при акне. Пропионовые бактерии практически не различаются по видовому составу и по обсемененности в связи с акне, поэтому, очевидно, не играют ключевой роли при данном заболевании. Золотистый стафилококк, вероятнее всего, является причиннозначимым микроорганизмом при акне вульгарис, так как значимо чаще обнаруживается при акне, а его частота встречаемости коррелирует с тяжестью течения акне.