Correction of age-associated changes in the skin in women by amino acid cluster

Full Text

Старение кожи представляет собой сложный процесс, в основе которого лежат регрессивные биомеханические и структурно-функциональные изменения на всех уровнях организации дермы [1-3]. Инволюционные изменения кожи являются частью общего биологического процесса старения, однако кожа подвергается ряду внешних воздействий, что способствует более раннему развитию в ней регрессивных процессов [4]. С физиологической точки зрения среди основных механизмов, обусловливающих возрастные изменения кожи, рассматривают снижение пролиферативной активности кератиноцитов [5] и нарушение пролиферативного гомеостаза меланоцитов Данные литературы [6, 7] подтверждают, что основные механизмы инволюционных изменений затрагивают более всего дермальный слой кожи: уменьшается количество фибробластов и их способность производить коллаген, уменьшается количество ковалентных связей между коллагеновыми волокнами, что приводит к нарушению дермо-эпидермального соединения [8]. Согласно теории свободнорадикального старения, в результате неферментативной реакции моносахаридов с аминогруппами белков образуются коллагеновые сшивки. Такой коллаген не разрушается коллагеназой, а накапливается в дермальном слое, участвуя в клинической картине инволюционных изменений [9, 10]. Также подвержены дегенеративным изменениям эластические волокна сетчатого слоя дермы, в частности, резко снижается количество гликозаминогли- канов. В связи с уменьшением числа сосудов в сосочковом слое дермы и ослаблением сосудистого тонуса существенно нарушается микроциркуляция [11]. Снижается тонус мимических мышц и эластичность кожи, формируются морщины, складки, появляется избыток кожи [12]. Клиническим признаком возрастных изменений кожи лица служит гравитационный птоз, морфологическими элементами которого являются формирование пальпебро- малярной складки, появление щечно-скуловой складки, углубление носогубной складки, формирование «морщин марионеток», нарушение контура нижнечелюстной линии [13-15]. Коррекция возрастных изменений лица - одна из основных задач, которую ежедневно решают косметологи и пластические хирурги [16, 17]. Основной задачей в процессе коррекции инволюционных изменений кожи является восстановление белкового каркаса дермы без истощения естественных ресурсов клеток [18], в связи с чем можно выделить несколько основных факторов, способствующих инволюционным изменениям кожи: • нарушение водного баланса, приводящее к обезвоживанию кожи с потерей ее тонуса и упругости; • угнетение метаболических процессов (синтез основных структурных белков кожи коллагена и эластина), ведущее к замедлению репаративных процессов в коже и образованию морщин и складок [19]; • свободно-радикальное повреждение клеточных мембран и ДНК клеток, приводящее к их гибели, нарушению микроциркуляции и разрушению коллагеновых волокон [20]. На сегодняшний день терапевтическая косметология может предложить довольно широкий спектр возможностей для коррекции инволюционных изменений кожи лица. Например, для коррекции гравитационного птоза широко применяют методы объемного моделирования с применением филлеров на основе стабилизированной гиалуроно- вой кислоты неживотного происхождения, а также очень популярные в настоящее время нитевые технологии «тред- лифтинг». Избыточное отложение подкожно-жировой клетчатки в области «второго подбородка» требует, напри- Степень Оценка врачом Оценка пациентом Ш Оптимальный Значительное косметический результат улучшение, полностью для данного пациента доволен результатом II Значительное улучшение, Улучшениие результата; возможно неполная доволен, но хочется коррекция немного улучшить I Улучшение есть, Незначительное необходима улучшение результата, дополнительная коррекция желательна дополнительная коррекция 0 Без изменений, состояние Не вижу эффекта, такое же, как до процедуры без изменений -1 Ухудшение по сравнению Состояние хуже, чем с исходным состоянием до проведения процедуры Таблица 1 Рис. 1. Пациентка И., 48 лет. Конфокальная лазерная сканирующая микроскопия до (а) и через 1 мес (б) после применения функционального аминокислотного кластера. Стрелками указаны пучки коллагеновых волокон сосочкового и сетчатого слоев. мер, применение мезотерапевтических липолитических препаратов. Для коррекции мимических морщин верхней трети лица, кисетных морщин над верхней губой давно применяют препараты ботулотоксина типа А. Стимулировать синтез коллагена можно различными аппаратными методами, химическим или лазерным пилин- гом, или инъекционным введением препаратов «биореви- тализантов» на основе гиалуроновой кислоты, пептидов или введением в кожу конечных продуктов гидролиза белка - аминокислот [21]. Активно действующим и физиологическим комплексом для стимуляции синтеза коллагена типов I и III и нормализации их метаболического баланса является функциональный кластер аминокислот, включающий глицин, пролин, лизин и лейцин. На основе кластера этих аминокислот также разработаны косметические препараты, питьевая биологически активная добавка, ранозаживляющие средства для дерматологии, ожоговой хирургии и стоматологии [22-24]. Цель исследования - изучение эффективности функционального аминокислотного кластера, включающего глицин 50%, пролин 37%, лизин 6%, лейцин 7% и раствор гиалуро- ната натрия 1%, у женщин разного возраста с инволюционно измененной кожей лица. Материалы и методы Под нашим наблюдением находились 72 женщины в возрасте от 35 до 55 лет с клиническими проявлениями инволюционно измененной кожи лица. Критериями отбора для участия в исследовании служило наличие инволюционных изменений кожи лица (сухая, обезвоженная кожа, мелкоморщинистый тип старения, снижение тургора тканей, эластоз, птоз). Всем пациенткам проводили курс терапии из 4 процедур с интервалом 7-10 дней. Препарат готовили ex tempore путем разведения порошкообразной смеси лиофилизированных аминокислот раствором стерильного гиалуроната натрия до получения прозрачного раствора без осадка и вводили внутрикожно папульно. Вязкий раствор гиалуроновой кислоты оказывает противовоспалительное действие, обеспечивает пролонгированное высвобождение аминокислот в окружающие ткани, способствует нормализации водного баланса дермы и эпидермиса. В ходе исследования были изучены закономерности структурных и функциональных изменений кожи пациенток двух возрастных групп (1-й группы - от 35 до 45 лет и 2-й группы - от 46 до 55 лет) до и после применения функционального аминокислотного кластера с применением неинвазивных методов исследования. Результаты исследования оценивали методом конфокальной лазерной сканирующей микроскопии (MAVIG Vivascope 1500, Германия-США), позволяющим визуально оценить архитектонику коллагеновых и эластиновых волокон, вплоть до уровня сетчатого слоя дермы. Методом конфокальной лазерной сканирующей микроскопии проводили исследование состояния дермальных покровов лица до и после применения аминокислотного кластера. Для оценки клинической эффективности лечения в ходе исследования применяли международную оценочную шкалу Global Aesthetic Improvement Scale (GAIS) [25], адаптированную для данного исследования. Рис. 2. Пациентка Т., 47 лет. Конфокальная лазерная сканирующая микроскопия до (а) и через 1 мес (б) после применения аминокислотного кластера. Стрелками указаны пучки коллагеновых волокон сосочкового и сетчатого слоев, таким образом можно проследить уменьшение количества участков с низкой степенью рефрактерности, свидетельствующих о дезорганизации дермы. Рис. 3. Пациентка Н., 39 лет. Конфокальная лазерная сканирующая микроскопия до (а) и через 1 мес (б) после применения аминокислотного кластера. Стрелками указаны пучки коллагеновых волокон сосочкового и сетчатого слоев, таким образом можно проследить изменения состояния волокон, улучшение организации волокнистого каркаса дермы. - фрагменты с высокой степенью отражения лазерного луча. При этом видимые участки темного цвета представляли собой пространство с низкой степенью рефракции и с минимальным содержанием коллагеновых и эластических волокон. Полученные данные позволили сделать предположение о степени выраженности инволюционных изменений в дерме. У пациенток 1-й группы наблюдалась характерная для инволюционных изменений в коже овальная форма поперечного сечения сосочков дермы (рис. 1). У пациенток 2-й группы в основном наблюдались хаотичное расположение дермальных волокон, дезорганизация и потеря ими пространственной ориентации в большей или меньшей степени выраженности в зависимости от возраста. В 1-й группе до процедуры данная картина была значительно менее выражена, признаки дезорганизации волокон встречались лишь у отдельных пациенток. Клинические критерии включали несколько вариантов оценочных параметров: полное исчезновение инволюционных изменений после проведения курса процедур, значительное улучшение, улучшение, без эффекта, ухудшение результата после проведения курса процедур. Значительным улучшение считалось существенное выравнивание рельефа кожи, лифтинг-эф- фект средней трети лица и век, уменьшение количества и глубины морщин и складок. Улучшением считали менее выраженное уменьшение количества и глубины морщин и складок, выравнивание тона кожи, значительным улучшением считали устранение дефекта более чем на 50%, просто улучшением - менее чем на 50%. Анкетирование пациентов проводили через 1 мес после курса процедур. Каждому пациенту было предложено оценить результаты лечения по вышеперечисленным критериям (шкала GAIS для пациента) (табл. 1). Результаты и обсуждение Рис. 4. Динамика изменений состояния кожного покрова до (а) и через 1 мес (б) после применения аминокислотного кластера. В дермальном слое у пациенток разной возрастной категории метод лазерной конфокальной микроскопии позволил выявить участки соединительной ткани различной степени контрастности, из них наиболее яркие Контрольная группа Основная группа Показатель 1-я возрастная группа (35-45 лет; n = 10) 2-я возрастная группа (46-55 лет; n = 10) 1-я возрастная группа (35-45 лет; n = 36) 2-я возрастная группа (46-55 лет; n = 36) Общая площадь гипоэхогенных участков дермы, мм2 до терапии 5,34 ± 0,03 6,1 ±0,05 5,30 ± 0,02 6,0 ± 0,03 через 1 мес 5,35 ± 0,028 6,08 ± 0,04 4,92 ±0,01 5,42 ± 0,04 Уменьшение площади гипоэхогенных участков дермы через 1 мес терапии, мм2 абс. -0,01 ± 0,013 ±0,02 ± 0,020 0,38 ±0,004 0,58 ± 0,007 % -0,19 ±0,32 7,18 9,72 Толщина дермы и эпидермиса, мм до терапии 1,49 ± 0,04 1,41 ±0,03 1,51 ±0,01 1,42 ±0,02 через 1 мес 1,48 ± 0,037 1,42 ±0,031 1,81 ± 0,02 1,75 ±0,04 Увеличение толщины дермы через 1 мес терапии, мм абс. -0,01 ± 0,017 -0,01 ±0,014 0,3 ± 0,004 0,33 ± 0,007 Таблица 2 Динамика морфометрических показателей при проведении УЗ-дермасканирования кожи в процессе применения аминокислотного кластера (М ± т) -0,67 0,71 19,8 23 % Примечание. М± т, гдеМ- математическое ожидание случайной величины; т - величина допуска для М. Таблица 3 Динамика изменения показателей рельефа кожи лица пациенток 1-й возрастной группы 35-45 лет после применения аминокислотного кластера (М±Т;п = 36; р < 0,05) Показатель До применения АЗТ Через 1 мес после применения АЗТ Изменение показателя до и после применения АЗТ абс. % Volume 56,13 ±1,86 48,63 ±2,10 7,50 ± 0,47 13,36 Sew 38,90 ±0,52 33,12 ±0,37 5,78 ± 0,11 14,86 Ser 2,30 ±0,50 2,06 ±0,31 0,24 ± 0,10 10,43 ных тонких волокон, формирующих сетчатую структуру. В сетчатом слое наблюдались изменения количественного состава волокон, уменьшение количества пространств с низкой степенью рефракции, уменьшение или исчезновение участков дезорганизации (рис. 2). Через 6 мес приведенные выше изменения в дерме сохранялись. При этом наблюдалось более четкое распределение волокон, а также их значительное утолщение, т. е. состояние дермального слоя продолжало претерпевать изменения в сторону образования более молодых коллагеновых структур (рис. 3). и Рис. 5. Пациентка В. Изменение структуры микрорельефа кожи периорбитальной области до (а) и через 1 мес (б) после проведенного курса процедур. При повторном исследовании после применения аминокислотного кластера через 1 мес у пациенток 2-й группы отмечались существенные изменения. В сосочковом слое дермы наблюдалось появление равномерно распределен- При помощи ультразвукового исследования (УЗИ) кожи лица изучали особенности эпидермиса и дермы до и после использования аминокислотного кластера. Сканирование проводили по двум точкам строго на идентичных участках лица у всех пациенток (височной и скуловой областях) в положении сидя на частоте 22 и 75 МГц. Полученные результаты обрабатывали и проводили сравнение данных в разных возрастных группах (табл. 2). Проведенные исследования позволили дать объективную оценку состояния инволюционно измененной кожи до начала курса процедур и через 1 мес после его окон- Рис. 6. Пациентка М., 55 лет. Трехмерное изображение поверхности кожи периорбитальной области до (а) и через 1 мес (б) после применения аминокислотного кластера. Рис. 7. Пациентка О., 42 года. Трехмерное изображение поверхности кожи периорбитальной области до (а) и через 1 мес (б) после применения аминокислотного кластера. Таблица 5 Динамика изменения клинических признаков старения кожи лица женщин 35-45 лет (n = 36) при проведении процедур с использованием функционального аминокислотного кластера Признак старения кожи лица Наличие признаков старения кожи лица до курса АЗТ после курса АЗТ изчезли значительно уменьшились незначительно уменьшились без перемен абс. % абс. % абс. % абс. % абс. % Сухость и стянутость кожи лица 31 86 19 61 6 19 6 19 0 0 Изменение рельефа, наличие морщин и складок 18 50 0 0 11 61 5 28 2 11 Тусклый цвет кожи лица 29 80 29 100 0 0 0 0 0 0 Изменения тонуса кожи лица 28 78 14 50 14 50 0 0 0 0 Изменение кожи периорбитальной области 36 100 17 47 9 25 8 22 2 6 чания. По результатам УЗ-дермасканировцния кожи до тачала курса процедур у всех падиенток обследованных групп таблюдались признаки инволюционных изменений кожи: - нарушение структуры эпидермиса, появление его неровности и утолщения за счет рогового слоя; - гиперэхогенные полосы, свидетельствующие о фокальном гиперкератозе рогового слоя; - нечеткие границы эпидермиса с дермой; - морщины разной глубины от 78 до 519 мкм; - неравномерное распределение эхосигналов в дерме: с увеличением возраста пациента общий показатель интенсивнoсти эхосигнала уменьшался, что свидетельствует об атрофическом характере изменений в коже, в частности об уменьшении плотности соединительнотканного каpкаcа дермы; на фоне общего уменьшения эхосигнала в нижней части дермы наблюдалось появление зоны с повышенной плотностью эхосигнала. Данная картина отражает инволюционные изменения волокнистого состава дермы: дезорганизацию, уплотнение и фрагментирование волокон коллагена и эластина, потерю каркасно-опорной функции в коже; - увеличeние площади гипоэхогенных (сниженной плотности) участков, особенно в субэпидeрмальной области, которые имeли межиндивидуальные вариации. Это свидетельствует о снижении плотности структуры и перераспределении тканевой жидкости в дерме, а также отражает нарушения структурной организации этой области и косвенно отражает преобладание дистрофических процессов в дерме. Таким образом, до начала курса процедур у всех пациенток основной группы на УЗ-дермасканировании были выявлены изменения эпидермиса и дермы, свидетельствующие об их возрастной дистрофии. Через 1 мес после окончания курса процедур были выявлены следующие изменения: • увеличение толщины эпидермиса, уменьшение его плотности; • увеличение толщины и плотности дермы; • уменьшение общей площади гипоэхогенных участков дермы в среднем на 8,45% (р < 0,05), отмечено, что у женщин из 2-й возрастной группы данные изменения были более выражены, чем у пациенток 35-45 лет. • при сравнении двух показателей толщины дермы до курса процедур и через 1 мес после окончания курса зафиксировано увеличение толщины дермы в среднем на 21,4%, что свидетельствует об увеличении компонентов межклеточного матрикса и о приросте коллагеновых волокон; • увеличение интенсивности эхосигнала в среднем на 13,2% (р < 0,05). Таким образом, сравнивая результаты до и после проведенного курса коррекции с использованием функцио- Таблица 4 Динамика изменения показателей рельефа кожи лица пациенток 2-й возрастной группы 46-55 лет после применения аминокислотного кластера (М ± Т; n = 36; p < 0,05) Показатель До применения АЗТ Через 1 мес после применения АЗТ Изменение показателя до и после применения АЗТ абс. % Volume 59,91 ± 1,84 50,31 ± 1,97 9,6 ± 0,45 16,02 Sew 45,8 ± 0,48 40,17 ± 0,29 5,63 ± 0,09 12,29 Ser 2,64 ± 0,52 2,41 ± 0,49 0,23 ± 0,12 8,71 нального аминокислотного кластера, отмечены значительные изменения структурной организации дермы. Данные изменения представляли собой увеличение содержания внеклеточного матрикса дермы, уменьшение признаков деформации волокнистого каркаса дермы. Оценка результатов УЗИ показала, что проведенный курс из 4 процедур с применением аминокислотного кластера у пациенток 45-55 лет с наличием видимых признаков старения кожи лица способен скорректировать ряд эхоструктурных признаков инволюционной дезорганизации дермы (рис. 4). При визиосканировании выявлены различия микрорельефа кожи у пациенток разных возрастных групп до и после применения аминокислотного кластера (рис. 5). По данным литературы [26], на состояние микрорельефа кожи влияют разные эндогенные факторы, важнейшими из которых являются водный баланс эпидермиса и состояние соединительнотканных волокон дермы. При этом состояние поверхностных слоев кожи определяет гладкость и шероховатость микрорельефа кожи, т. е. поверхностные параметры, а сохранность и ориентация коллагеновых и эластиновых волокон влияют на формирование более глубоких морщин и складок. При оценке микрорельефа кожи лица пациенток до и после применения аминокислотного кластера выявлены изменения объема неровностей микрорельефа (Volume, усл.ед.), шероховатости (Ser, усл.ед.), морщинистости (Sew, усл.ед.). В ходе исследования отмечены изменения параметров: • Volume с 56,13 ± 1,86 до 48,63 ± 2,10 усл. ед. в 1-й группе пациенток и с 59,91 ± 1,84 до 50,31 ± 1,97 усл. ед. у пациенток 2-й группы; • Sew с 38,9 ± 0,52 до 33,12 ± 0,37 усл. ед. у пациенток 1- й группы и с 45,8 ± 0,48 до 40,17 ± 0,29 усл. ед. у пациенток 2-й группы; • Ser с 2,3 ± 0,5 до 2,06 ± 0, 31 усл. ед. у пациенток 1-й группы и с 2,64 ± 0,52 до 2,41 ± 0,49 усл. ед. у пациенток 2- й группы (табл. 3). Таблица 6 Динамика изменения клинических признаков старения кожи лица женщин 46-55 лет (n = 36) при проведении процедур с использованием функционального аминокислотного кластера Признак старения кожи лица Наличие признаков старения кожи лица до курса АЗТ после курса АЗТ изчезли значительно уменьшились незначительно уменьшились без перемен абс. % абс. % абс. % абс. % абс. % Сухость и стянутость кожи лица 21 58 7 38 11 52 2 10 1 5 Изменение рельефа, наличие морщин и складок 36 100 0 0 9 25 18 50 9 25 Деформация контуров лица, потеря тонуса кожей 36 100 0 0 10 28 21 58 5 14 Тусклый цвет кожи лица, наличие гиперпигментации 7 19 1 14 2 29 4 57 0 0 Изменение кожи периоральной области 26 72 0 0 6 23 14 54 6 23 Изменение кожи периорбитальной области 36 100 4 11 14 39 18 50 0 0 Таким образом, в результате проведенного курса аминокислотной заместительной терапии (АЗТ) наблюдалось значительное снижение исходных параметров морщинистости, шероховатости и объема неровностей тканей лица пациенток. Подобная положительная динамика связана с увлажняющим и стимулирующим пролиферацию дер- мальных фибробластов эффектом после применения аминокиcлостного кластера. Кроме того, улучшение пространственно-геометрических показателей кожи пациенток после проведенного курса аминокислотной терапии связано прежде всего со стимуляцией синтеза коллагеновых волокон в дерме. Курс АЗТ способствовал заметному выравниванию кожного покрова за счет уменьшения глубины морщин и складок. Результаты визиосканирования кожи ряда пациенток до и после проведения курса процедур с применением аминокислотного кластера представлены на рис. 6, 7. Анализ анкетирования по шкале GAIS показал, что большинство пациенток были довольны результатом, полученным после проведения курса процедур. После проведения курса процедур 85% женщин оценивали результат терапии на 2-3 балла, что можно интерпретировать как «значительное улучшение результата» и «улучшение результата», на 1 балл - 15% пациенток, все в возрасте от 35 до 45 лет, т. е. «без эффекта». Оценка эффективности процедуры врачом практически всегда совпадала с мнением самих пациенток (табл. 4, 5). Опыт проведения аминокислотной заместительной терапии в терапевтической косметологии насчитывает более 6 лет [26, 27]. Благодаря научным исследованиям и анализу клинического опыта европейских и российских специалистов доказана способность аминокислотного кластера стимулировать регенерацию, неоколлагенез, оказывать противовоспалительное действие. Возможно сочетание инъекционного введения аминокислотного кластера и химических трихлоруксусных пилингов, что не только способствует повышению результативности, но и статистически значимо уменьшает выраженность и длительность постпилинговой эритемы [22, 23, 28, 29]. Комбинированный курс терапии способствует улучшению результатов фракционного фототермолиза [22]. Однако доступных данных о проведении клинико-инструментальных исследований по коррекции инволюционных изменений кожи в литературе мы не нашли. Проведенное клинико-инструментальное исследование подтверждает данную гипотезу и наглядно доказывает возможность активизации синтеза коллагена в коже и нормализации метаболического баланса в дерме с помощью инъекционного введения конечных продуктов гидролиза белка - функционального кластера аминокислот, а применение аминокислотного кластера в качестве коррекции инволюционных изменений кожи лица. При проведении УЗ-дермасканирования кожи, конфокальной лазерной микроскопии кожи и визиосканирования установлено, что у пациенток с инволюционными изменениями кожи лица интрадермальные инъекции функционального комплекса аминокислот способствуют улучшению структурной и морфофункциональной организации эпидермиса и дермы; способствуют увеличению толщины дермального слоя и выравниванию микрорельефа. Данное исследование также показало, что при инъекционном применении функционального комплекса аминокислот происходят активизация и усиление биомеханических процессов в коже, в частности выработка коллагена и нормализация метаболического баланса. При инъекционном применении комплекса аминокислот клинический эффект достигается у 100% пациенток, из них 75% пациенток отмечают «значительное улучшение» после курса терапии.

About the authors

S. A Smolyakova

I.M. Setchenov First Moscow State Medical University

Email: dr.smolyakova@gmail.com
Moscow, Russia

Olga Yu. Olisova

I.M. Setchenov First Moscow State Medical University

Email: olisovaolga@mail.ru
MD, PhD, DSc, prof. Moscow, Russia

References

Supplementary files