OSOBENNOSTI REPERTUARA T-KLETOChNYKh RETsEPTOROV PRI PSORIAZE

Abstract

Full Text

Псориаз является хроническим воспалительным заболеваниям кожи, при котором отмечается аномальная пролиферация кератиноцитов, гиперплазия сосудов, инфильтрация дермы и эпидермиса воспалительными клетками. Патогенез заболевания до конца не изучен, существует лишь ряд гипотез о его происхождении. Исследования последних лет показали, что важная роль в развитии псориаза принадлежит лимфоцитам. Псориаз относят к многофакторным заболеваниям. Его распространенность составляет от 1 до 4% в популяции. В наши дни отмечается тенденция к росту заболеваемости среди лиц трудоспособного возраста и увеличению числа тяжелых и инвалидизирующих форм, таких как псориатический артрит, псориатическая эритродермия, пустулезный псориаз. В патогенезе псориаза до сих пор остается много нерешенных вопросов. Его долгое время считали заболеванием, в основе которого лежит патология и неправильное функционирование кератиноцитов. В его развитии большую роль уделяют генетическим, средовым, иммунным и целому ряду других факторов. Актуальной задачей современной медицины является определение роли молекулярных механизмов в патогенезе псориаза, определение механизмов запуска и развития заболевания. Это даст возможность обнаружить новые терапевтические мишени для лечения заболевания и в будущем разработать способы воздействия на них. При псориазе определяется массивная инфильтрация кожи различными клетками иммунной системы. При этом провоцирующий фактор или иная причина, которая приводит к данной инфильтрации, до сих пор не установлена. Возможно, что в коже имеются антиген или антигены, на которые и происходит ошибочная реакция клеток иммунной системы. Такими субстанциями могут оказаться антигены микроорганизмов, однако до сих пор они не обнаружены. В иммунном ответе при псориазе принимают участие клетки, которые относятся к врожденному иммунитету (дендритные клетки, натуральные киллеры, Т-клетки, нейтрофилы, макрофаги), а также клетки иммунной системы, относящиеся к приобретенной иммунной системе, в частности Т-хелперы 1 (Th1) и Т-хелперы 17 (Th17). Т-лимфоциты имеют важное значение для приобретенного иммунного ответа, в частности обеспечивают распознавание и уничтожение субстанций, которые имеют чужеродные антигены. Т-лимфоциты развиваются из предшественников в тимусе (вилочковая железа), где у них формируются уникальные рецепторы для распознавания антигенов. Эти рецепторы принимают важную роль при запуске иммунного ответа. В будущем изучение данных репертуаров откроет возможность проводить мониторинг течения целого ряда заболеваний. С учетом того, что счет возможного количества вариабельных участков Т-клеточных рецепторов идет на десятки миллионов, их изучение и анализ представляется достаточно сложной задачей, требующей применения современных технологий. Изначально для анализа многообразия рецепторов применялся метод проточной цитометрии, этот метод был популярен последние три десятилетия. Он позволяет проводить оценку экспрессии поверхностных и внутриклеточных маркеров Т-лимфоцитов, при этом метод имеет ряд ограничений. Количество анализируемых параметров при таком подходе ограничено, что делает их анализ затруднительным. Для повышения производительности стали применять другие методы анализа, в частности методы анализа мРНК транскриптов. Таким методом является высокопроизводительное секвенирование репертуара Т-клеточных рецепторов, в настоящее время наиболее активно использующийся для этого анализа. Он дает возможность получать данные об огромном количестве различных субпопуляциий Т-клеток и позволяет изучать представленность того или иного репертуара Т-клеточных рецепторов в нормальных условиях и при развитии патологического процесса. Метод высокопроизводительного секвенирования Т-клеточных рецепторов дает возможность установить именно те клонотипы, которые вовлечены в иммунный ответ [7]. Иммунная система человека может вырабатывать разнообразные последовательности гипервариабельных участков Т-клеточных рецепторов, причем их количество теоретически может во много раз превышать то число рецепторов, которое может экспрессироваться. Для анализа того, какие именно последовательности содержатся в клеточном репертуаре, был разработан другой метод, основанный на секвенировании одиночной молекулы ДНК с последующим вычислением и проведением оценки репертуаров Т-клеточных рецепторов в конкретных выборках [8]. В настоящее время в клинике кожных и венерических болезней им. В.А. Рахманова Первого МГМУ им. И.М. Сеченова совместно с Институтом общей генетики им. Н.И. Вавилова РАН проводятся исследования, целью которых является изучение комбинаций Т-клеточных рецепторов при псориазе. В нашем исследовании было проведено сравнение Т-клеточных репертуаров в образцах пораженной и непораженной кожи у больных псориазом с помощью методов массивного секвенирования. При этом выявлен ряд уникальных последовательностей, которые теоретически могут приблизить нас к пониманию природы антигенов, на которые реагируют клетки иммунной системы при псориазе.