Dynamics of antimicrobial protein lactoferrin in oral fluid during pregnancy in women with dental caries

Full Text

Слюна человека содержит большое количество соединений, которые защищают ткани ротовой полости от различных микроорганизмов и продуктов их жизнедеятельности. Стабильное и постоянное по- Для корреспонденции: Ломова Анастасия Сергеевна, E-mail: lanart@inbox.ru Таблица 1. Показатели лактоферрина ротовой жидкости в клинической группе в динамике беременности ЛактоферПроцентили Группа рин, мкг/мл M±m s 25 медиана 75 Р 8-12 нед (I триместр) Клиническая (n = 35) 2,31±0,11 0,64 2,03 2,35 2,57 1гр-к < 0,001 Контрольная(n = 31) 1,81±0,05 0,27 1,66 1,76 2,07 1гр-д <0,001 Небеременные (n = 32) 1,06±0,08 0,43 0,81 0,99 1,26 к-д < 0,001 13-27 нед (II триместр) Клиническая (n = 35) 2,79±0,13* 0,77 2,49 2,87 2,99 1гр-к < 0,001 Контрольная(n = 31) 2,03±0,12* 0,68 1,54 2,11 2,36 1гр-д < 0,001 Доноры (n = 32) 1,06±0,08 0,43 0,81 0,99 1,26 к-д < 0,001 28-40 нед (III триместр) Клиническая группа (n = 35) 3,11±0,24*° 1,41 2,74 3,08 3,36 1гр-к < 0,001 Контрольная(n = 31) 2,61±0,17*° 0,95 1,94 2,46 3,05 1гр-д < 0,001 Доноры (n = 32) 1,06±0,08 0,43 0,81 0,99 1,26 к-д < 0,001 Примечание: М - средняя выборочная; m - ошибка средней выборочной; s - стандартное отклонение; р - доверительная вероятность; * - достоверные отличия по сравнению с I триместром; ° - достоверные отличия по сравнению со II триместром. Original article ступление слюны, которая осуществляет интеграцию мягких и твердых тканей в полости рта, обеспечивает не только поддержание гомеостаза ротовой полости и эффективное удаление эндо- и экзогенных микроорганизмов и их метаболитов, но и постоянное присутствие в различных защитных факторов [1]. Лактофер- рин представляет собой гликопротеин из семейства трансферринов и относится к эндогенным антимикробным пептидам, отвечающим за врожденный иммунитет [2]. Лактоферрин - важная составляющая системы неспецифической антимикробной защиты слизистых, обладает бактериостатическими свойствами благодаря связыванию грамположитель- ных и грамотрицательных бактерий [3]. Кроме того, лактоферрин отражает степень воспалительных реакций в организме пациента [4]. В основном лактоферрин как маркер воспалительных реакций используют в оториноларингологии [5]. Этот белок синтезируют лейкоциты, клетки эпителия слизистых, и поэтому его можно обнаружить в различных секретах, в том числе слюне, грудном молоке [6]. Известно, что концентрация лактоферрина в слюне и гингивальной жидкости значительно изменяется в ходе развития воспалительных процессов в ротовой полости [7, 8]. К числу актуальных вопросов, требующих дальнейшего изучения, относится проблема антимикробной защиты ротовой полости во время беременности и изменение активности врожденных иммунных факторов в течение гестацион- ного периода. Цель работы - определение патогенетического значения изменения антимикробной защиты полости рта в динамике беременности для развития и течения кариеса зубов. Материал и методы В клинической группе у 35 беременных женщин с кариесом зубов в возрасте от 18 до 35 лет последовательно во все три триметра беременности (I - 8-12 нед, II - 13-27 нед, III - 28-40 нед) изучали состояние антимикробного иммунитета ротовой полости по концентрации в ротовой жидкости лактоферрина, а затем определяли причинно-следственные связи между уровнем пептида и течением кариеса зубов. Изучали особенности течения кариеса зубов в клинической группе путем определения распространенности и интенсивности кариеса зубов по индексу КПУз (К - кариес; П - пломба; У - удаленный зуб) - приросту индекса КПУз в динамике наблюдения. Активность кариеса определяли согласно классификации Nikiforuk G. (1985). Контрольную группу составила 31 беременная женщина с физиологическим протеканием беременности и отсутствием стоматологической патологии. Кроме того, в работе учитывали результаты лабораторного исследования ротовой жидкости у 32 здоровых доноров женского пола без беременности от 18 до 30 лет. Количественное определение лактоферрина в ротовой жидкости проводили методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием набора реагентов «Лактоферрин-стрип» («ВекторБест»). Результат выражали в мкг/мл. Обрабатывали результаты на автоматическом ридере EL 808 фирмы BIO- TEK INSTRU-MENTS (США). Результаты статистически обрабатывали с помощью программы Statistica 10 (StatSoft, США). Результаты По результатам стоматологического осмотра всем пациенткам клинической группы поставлен диагноз «кариес зубов». Количественную оценку кариесогенного статуса проводили по индексу КПУ (кариес- пломба-удаленный зуб). У пациенток в I триместре беременности индекс КПУз составил 9,17±0,2, во II триместре имел близкую величину 9,57±0,4 и в III триместре возрастал до 12,93±0,7. Если в I триместре структуру индекса КПУ в основном составляло число зубов, пораженных кариесом (К = 5,66±0,4), то после лечения во II триместре в основном структуру КПУ составляли запломбированные зубы (П = 6,72±0,5). В III триместре индекс КПУ в основном возрастал за счет повышения вновь образованных кариозных полостей. В контрольной группе в течение беременности стоматологические заболевания у женщин отсутствовали, о чем свидетельствовали низкие значения индексов КПУ: I триместр - 1,7±0,3, II триместр - 1,7±0,3, III триместр - 1,8±0,2. Во все три триместра беременности у большинства пациенток клинической группы преобладала средняя интенсивность кариеса зубов (54,3; 57,1; 51,4% в I, II и III триместре соответственно). Число беременных женщин клинической группы с высокой интенсивно- Таблица 2. Концентрация лактоферрина в ротовой жидкости (M±m) у беременных пациенток клинической группы в зависимости от интенсивности кариеса зубов, мкг/мл Период беременности Интенсивность кариеса низкая средняя высокая 8-12 нед (I триместр) 1,55±0,14 1,82±0,17 2,62±0,28*° 13-27 нед (II триместр) 1,87±0,15 2,11±0,19 3,03±0,25*° 28-40 нед (III триместр) 2,55±0,12 3,13±0,44* 3,62±0,41* В общем в клинической 1,99±0,11 2,65±0,15* 3,44±0,39*° группе Примечание. * - достоверные отличия по сравнению с низкой интенсивностью кариеса приp < 0,05; ° - достоверные отличия по сравнению со средней интенсивностью кариеса. Таблица 3. Концентрация лактоферрина в ротовой жидкости (M±m) у беременных клинической группы в зависимости от степени активности кариеса зубов, мкг/мл Степень активности кариеса зубов Период очень низкая и низкая средняя высокая и очень высокая 8-12 нед (I триместр) 1,71±0,09 2,29±0,14* 2,53±019* 13-27 нед (II триместр) 2,77±0,25 2,89±0,14 3,01±0,21* 28-40 нед (III триместр) 2,21±0,15 3,16±0,19* 3,74±0,21*° В общем в клинической 2,39±0,17 2,85±0,15* 3,13±0,29* группе Примечание. * - достоверные отличия по сравнению с низкой активностью кариеса при p < 0,05; ° - достоверные отличия по сравнению со средней активностью кариеса. Оригинальная статья стью кариеса зубов возрастало от I к III триместру с 17,1 до 25,7%. Число пациенток с низкой интенсивностью кариеса зубов в течение беременности мало изменялось (28,6; 22,9; 22,9% в I, II, III триместре соответственно). Показатели лактоферрина ротовой жидкости в клинической группе в сравнительном аспекте с пациентками контрольной группы и здоровыми донорами в динамике беременности отражены в табл. 1. У беременных женщин с физиологически протекающей беременностью и отсутствием воспалительных стоматологических заболеваний в динамике беременности в ротовой жидкости был установлен поступательный рост концентрации лактоферрина как гуморального защитного фактора. Так, содержание лактоферрина ротовой жидкости у таких женщин по сравнению со здоровыми небеременными (1,06±0,08 мкг/мл) выше и последовательно повышается от I (2,31±0,11 мкг/мл) ко II (2,79±0,13 мкг/мл) и III (3,11±0,24 мкг/мл) триместру. Во все изучаемые периоды беременности концентрация лактоферрина в ротовой жидкости у пациенток с кариесом была статистически значимо выше аналогичного показателя как у женщин контрольной группы с физиологически протекающей беременностью и отсутствием стоматологических заболеваний, так и у здоровых небеременных женщин. У пациенток клинической группы по сравнению с контрольной группой в I триместре уровень лактоферрина ротовой жидкости был выше на 27,6; 37,4; 19,2% (p < 0,001) в I, II, III триместрах соответственно. В отличие от небеременных у женщин клинической группы концентрация лактофер- рина в ротовой жидкости была выше в 2,2; 2,6; 2,9 раза (p < 0,001) в I, II, III триместре беременности соответственно. Следовательно, уровень антимикробного пептида лактоферрина в слюне повышался при наличии кариеса зубов и продолжительности сроков гестацион- ного периода. На следующем этапе было изучено, как интенсивность стоматологического заболевания сказалась на концентрации лактоферрина в слюне у беременных женщин (табл. 2). Лактоферрин ротовой жидкости имел самый высокий уровень у беременных пациенток при высокой интенсивности кариеса зубов, планомерно повышаясь от I к III триместру гестационного периода. Уровни лактоферрина ротовой жидкости при высокой интенсивности кариеса зубов достоверно были выше содержания изучаемого показателя при низкой и средней интенсивности заболевания. Наиболее выраженный градиент прироста лакто- феррина слюны у беременных женщин с кариесом зубов происходил от II к III триместру: при низкой интенсивности кариеса зубов от 1,87±0,15 до 2,55±0,12 мкг/мл на 36,4% (p < 0,05), средней интенсивности - от 2,11±0,19 до 3,13±0,44 мкг/мл на 48,3% (p < 0,05), высокой интенсивности - от 3,03±0,25 до 3,62±0,41 мкг/мл на 19,5% (p < 0,05). Уровни лактоферрина в ротовой жидкости у беременных клинической группы в зависимости от степени активности кариеса зубов представлены в табл. 3. С повышением степени активности кариеса зубов концентрация лактоферрина в ротовой жидкости возрастала. Тренд повышения уровня защитного пептида в слюне по мере удлинения срока гестационного периода имел место при средней и высокой активности заболевания и отсутствовал при низкой активности заболевания. Наивысший уровень лактоферрина в слюне наблюдали у пациенток с высокой и очень высокой активность заболевания в III триместре беременности (3,74±0,21 мкг/мл). Факт возрастания уровня лактоферрина в ротовой жидкости у беременных женщин с кариесом зубов с повышением интенсивности и активности кариозного процесса позволил доказать, что изучаемый антимикробный пептид служит маркером активности этого стоматологического процесса. Повышение лактофер- рина в слюне в течение беременности у пациенток клинической группы позволило предположить, что этот белок выполняет защитные свойства, будучи одновременно и индикатором воспалительного процесса. Таким образом, определение уровня лактофер- рина в ротовой жидкости при беременности на фоне стоматологических заболеваний имеет высокую лабораторно-диагностическую значимость. Концентрация лактоферрина слюны у беременных женщин с кариесом зубов прямо отражает интенсивность их кариесогенного статуса и может служить прогностическим фактором в отношении оценки риска ухудшения патологии в динамике гестационного периода. Выводы 1. В динамике гестационного периода у беременных женщин с кариесом зубов антимикробная защита ротовой полости усиливается за счет усиления секреции лактоферрина и повышения его концентрации в ротовой жидкости. 2. У беременных женщин для оценки активности антимикробного потенциала ротовой жидкости рекомендуем использование неинвазивного иммунологического метода оценки врожденного иммунитета ротовой полости по лактоферрину. Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки. Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

About the authors

Anastasiya Sergeevna Lomova

Rostov State Medical University, Health Ministry of Russian Federation; Krasnodar State Medical University, Health Ministry of Russian Federation

Email: lanart@inbox.ru
344022, Rostov-on-Don, Russian Federation

V. A Prokhodnaya

Rostov State Medical University, Health Ministry of Russian Federation; Krasnodar State Medical University, Health Ministry of Russian Federation

344022, Rostov-on-Don, Russian Federation

I. M Bykov

Rostov State Medical University, Health Ministry of Russian Federation; Krasnodar State Medical University, Health Ministry of Russian Federation

344022, Rostov-on-Don, Russian Federation

References

Supplementary files