INDICATORS OF SALIVARY GLANDS FUNCTIONS AND SALIVA MICROELEMENTAL PORTRAIT OF PATIENTS WITH PARKINSON'S DISEASE: DIAGNOSTIC VALUE

Full Text

В последние десятилетия получены данные, доказывающие клинико-диагностический параллелизм изменений параметров метаболизма в ротовой жидкости при ряде заболеваний. При действии различных факторов окружающей среды, с которыми сталкивается человек в современных социально-экологических условиях, большинство функциональных сдвигов в ротовой жидкости носит выраженный адаптивно-компенсаторный характер [1]. В исследованиях, проведенных А.П. Авцыным и соавт. (1991), А.В. Скальным и соавт. (2003) [2, 3], показано, что определение концентрации микроэлементов имеет существенное диагностическое значение для выявления системных заболеваний даже на доклинической стадии. Микроэлементы (МЭ) - это группа химических элементов, которые содержатся в организме человека и животных в очень малых количествах и участвуют в важнейших биохимических процессах - окислительно-восстановительных реакциях, свободнорадикальном окислении, синтезе белка и др. [2]. Кинетика, распределение, депонирование ионов металлов подчиняются биохимической регуляции макроорганизма, происходит реципрокная регуляция уровня МЭ. По состоянию ионного баланса в биосубстратах можно составить представление о метаболических изменениях, протекающих с участием металлосодержащих соединений [4, 5]. Известно, что уровень макро- и микроэлементов во внутренних органах и средах определенным образом отражает гомеостатический статус организма, является весьма точным и чувствительным критерием, который может служить сигналом наступивших в нем патологических изменений [5, 6]. Особое место среди соматических болезней занимают нейродегенеративные заболевания, для которых характерна медленно прогрессирующая гибель определенных групп нервных клеток и одновременно - постепенно нарастающая атрофия соответствующих отделов головного и/или спинного мозга. Болезнь Паркинсона (БП) - наследственнодегенеративное хроническое прогрессирующее заболевание, в патогенезе которого ключевая роль принадлежит дегенерации нигростриарных дофаминергических нейронов и/или уменьшению содержания дофамина в стриопаллидарной системе [7]. Базисным препаратом, возмещающим дефицит дофамина, является предшественник дофамина, его левов-ращающийся изомер леводопа, способный проникать через гематоэнцефалический барьер [8]. БП характеризуется медленным течением и в ранних стадиях заболевания может не диагностироваться в течение ряда лет. Несмотря на то что базисные звенья диагностики - это обнаружение и идентификация специфических двигательных проявлений, ряд немоторных симптомов, нередко возникающих зачастую уже в ранних стадиях болезни, оказываются столь же характерными для заболевания [9, 10]. Сиалорея, по данным различных авторов [9-11], представляет собой наиболее частое немоторное проявление клинической манифестации БП, ее частота колеблется от 45 до 80%. Хотя ассоциация слюнотечения с болезнью БП известна со времен классической монографии Джеймса Паркинсона («Эссе о дрожательном параличе», Лондон, 1817), ведущие механизмы сиалореи изучены недостаточно. Результаты многочисленных клинических наблюдений свидетельствуют о том, что при БП наблюдается как увеличение сиалопродукции, так и снижение всасывания, а соотношение серозной и мукозной составляющих не изменяется [11]. Выраженность слюнотечения ассоциируется также с возрастом пациента, продолжительностью и стадией БП. Большинство исследователей не обнаруживают влияния до-фаминергической терапии на выраженность слюнотечения, хотя некоторые авторы считают леводопу препятствующим сиалорее фактором [8, 11]. Мы не нашли сообщений, касающихся определения уровня МЭ в ротовой жидкости пациентов с БП. Цель настоящего исследования - определение диагностического значения сиалометрии и микроэлементного портрета слюны у пациентов с БП. Материал и методы Материалом исследования явились образцы ротовой жидкости 81 пациента с БП (46 мужчин, 35 женщин) в возрасте от 54 до 80 лет, находившихся на диспансерном наблюдении в Республиканском клинико-диагностическом центре экстрапирамидной патологии и ботулинотерапии Минздрава Татарстана [12]. Пациенты были разделены на 2 исследуемые группы. В 1-ю группу вошли первичные пациенты с БП, не принимающие препараты леводопы (n = 35), во 2-ю - пациенты с БП, принимающие препараты леводопы (n = 46). Группу сравнения (3-ю) методом случайной выборки сформировали из 36 пациентов, сопоставимых по гендерновозрастному составу с пациентами исследуемых групп и обратившихся в стоматологическую поликлинику с целью санации полости рта [13]. У этих пациентов брали образцы ротовой жидкости. Для расчета скорости саливации (сиалометрия) была использована методика Л. Сазама (1971) в модификации Е.В. Боровского (1980). Слюну натощак собирали в градуированную пробирку в течение 5 мин. При выраженной гипосекреции время забора слюны увеличивали до 15 мин. Расчет проводили по формуле: СС = V/Tv, где V - объем слюны в пробирке; Tv - время забора в минутах (5-15 мин). Для определения характера ответа слюнной железы на различные химические вещества изучали нестимулированную секрецию и секрецию, стимулированную 5% раствором пищевой лимонной кислоты путем нанесения нескольких капель глазной пипеткой на дорсальную поверхность языка [14]. Для определения МЭ смешанную слюну собирали свободным током без стимуляции утром натощак в стерильные градуированные пробирки в количестве 5 мл [14]. Далее пробирки с биообразцами ротовой жидкости доставляли в лабораторию ГБУ Республиканский центр независимой экспертизы и мониторинга потребительского рынка Республики Татарстан для исследования методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой. Данный метод сочетает использование индуктивно связанной плазмы в качестве источника ионов с квадрупольным масс-спектрометром, выступа 36 клинические исследования ющим в роли масс-анализатора, и дискретно-динодным детектором, который применяется для регистрации отдельных ионов и их потоков [15]. Использовали масс-спектрометр с индуктивно связанной плазмой Agilent 7500 со следующими техническими характеристиками: скорость газового потока через колонку - 1-2 мл/мин, интервал температур 0-350°С, максимальный внутренний диаметр колонки - 0,25-0,53 см, чувствительность до 10-14 г. Данная методика утверждена Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации (29.06.2003 МУК 4.1.1483-03) [16]. Для статистической обработки использовали пакет программ SPSS 13.0. Для проверки нормальности распределений применяли использовался критерий Стьюдента, корреляционный анализ по Спирмену. Данные представлены в виде средней величины и ее стандартной ошибки (M±m). Различия считали достоверными при р < 0,05. Результаты и обсуждение Полученные результаты свидетельствуют о незначительном повышении фоновой нестимулированной секреции у пациентов с БП (1,6±0,5 мл/мин), в группе сравнения показатель составил 1,2±0,08 мл/мин. Нестимулированная слюна была пенистой, но прозрачной. Однако после стимуляции раствором лимонной кислоты у пациентов с БП скорость слюноотделения практически не возросла (1,7±0,03 мл/мин), хотя аналогичный показатель в контрольной группе достоверно повысился в 2,3 раза (2,2±0,04 мл/мин, р < 0,05). На данном этапе наблюдения стимулированная слюна также была пенистой. Это обусловлено, по нашему мнению, измене- Таблица 1. Концентрация микроэлементов ротовой жидкости у первичных пациентов с БП и в группе сравнения МЭ, мг/дм3 Концентрация МЭ в ротовой жидкости при БП (1-я группа) Концентрация МЭ в ротовой жидкости в группе сравнения (3-я группа) p Алюминий 0,19±0,08 0 0,197 Барий 1,46±0,44 0,04±0,02 0,021* Ванадий 0,004±0,001 0,005±0,001 0,609 Железо 1,135±0,091 1,192 ± 0,308 0,173 Кадмий 0,01±0,01 0 0,352 Кобальт 0 0 0,176 Марганец 0,03±0,01 0,02±0,01 0,179 Медь 0,005±0,002 0,003±0,002 0,289 Молибден 0,03±0,01 0,02±0 0,351 Натрий 160,43±18,19 174,13±33,83 0,258 Никель 0,06±0,01 0,04±0,01 0,112 Селен 0,025±0,003 0,028±0,001 0,546 Серебро 0,008±0,002 0,009±0,003 0,866 Свинец 0,05±0,02 0 0,028* Стронций 0,09±0,01 0,17±0,04 0,034* Сурьма 0,010±0,002 0,012 ±0,001 0,324 Хром 0,64±0,02 0,68±0,07 0,277 Цинк 6,08±1,2 3,81±0,82 0,021* Мышьяк 0,012±0,004 0,004±0,004 0,351 Кальций 108,24±7,98 82,4±11,55 0,034* Магний 9,3±0,62 7,43±0,73 0,041* Калий 1406,5±96,9 1184,2 ±109,3 0,353 Примечание. * - р < 0,05. нием поверхностно-активных свойств, а они в свою очередь - изменением соотношения серозной и мукозной составляющих в сторону преобладания мукозной. В ходе анализа концентраций МЭ ротовой жидкости у первичных пациентов с БП, не принимающих препараты ле-водопы, было установлено, что они отличаются от значений в группе сравнения. Достоверная разница установлена для бария, свинца, стронция, цинка, магния и кальция (табл. 1). У пациентов с БП в сравнении с пациентами группы сравнения в ротовой жидкости наблюдался избыток некоторых токсичных МЭ и уменьшение содержания эссенциальных МЭ. Исследование концентрации токсичных МЭ в ротовой жидкости у больных БП и в группе сравнения показало повышение токсичных металлов в 1-й группе: алюминия (0,19+0,08 мг/дм3, р > 0,05), кадмия (0,01+0,01 мг/дм3, р > 0,05), свинца (0,05+0,02 мг/дм3, р < 0,05), бария (1,46+0,44 мг/дм3,р < 0,05) в 36,5 раз, никеля (0,06+0,01 мг/дм3,р > 0,05) - в 1,5 раза, мышьяка (0,012+0,004 мг/дм3, р > 0,05) в 3 раза. Алюминий, кадмий и свинец не обнаружены ни в одном из контрольных образцов. Не выявлено каких-либо отклонений в содержании сурьмы и ванадия. При оценке содержания эссенциальных МЭ установлено, что в ротовой жидкости у больных БП определяется относительный недостаток железа (1,135+0,091 мг/дм3, р > 0,05), хрома (0,64+0,02 мг/дм3, р > 0,05) и селена (0,025+0,003 мг/дм3, р > 0,05) на 7-11% и достоверное увеличение содержания цинка (6,08+1,2 мг/дм3, р < 0,05) в 1,6 раза. Показатели содержания меди, молибдена и марганца в ротовой жидкости у пациентов с БП и пациентов из группы сравнения недостоверны, но сопоставимы. Кобальт не обнаружен ни в одном из представленных образцов опытной и контрольной групп. Установлено достоверное уменьшение количества стронция в ротовой жидкости у пациентов с БП, которое составило 0,09+0,01 мг/дм3, в группе сравнения в 1,9 раза больше - 0,17+0,04 мг/дм3 (р < 0,05). В данной ситуации предположительно имеет место избирательная проницаемость гемато-саливарного барьера [17] для стронция, механизм которой требует углубленных исследований. Прослеживается корреляционная связь с содержанием кальция: установлено достоверное увеличение его количества у пациентов с БП по сравнению с пациентами из 3-й группы (108,24+7,98 и 82,4+11,55 мг/дм3, р < 0,05). Известно, что стронций может замещать кальций в ацинарных клетках слюнных желез в механизме выделения в ротовую жидкость, но не может включаться в механизм накопления вместо кальция. Так, в исследованиях Л.Н. Мубара-ковой (2008) показана высокая диагностическая значимость определения уровня стронция в ротовой жидкости при одон-тогенных гнойно-воспалительных процессах [18]. Таблица 2. Сравнительная оценка концентрации МЭ ротовой жидкости у пациентов исследуемых и контрольной групп МЭ, мг/дм3 Больные БП (1-я группа) Больные БП, получающие леводопу (2-я группа) Группа сравнения (3-я группа) p Кальций 108,24+7,98 80,87±5,63 82,4+11,55 Л-2 < 0,05 p2-3 > 0,05 Л-3 < 0,05 Магний 9,3+0,62 7,97+0,57 7,43+0,73 Л-2 < 0,05 p2-3 > 0,05 Л-3 < 0,05 Цинк 6,08+1,2 4,83+0,94 3,81+0,82 Л-2 > 0,05 p2-3 > 0,05 Л-3 < 0,05 Медь 0,05+0,02 0,17+0,05 0,03+0,02 Л-2 < 0,05 p2-3 < 0,05 Л-3 > 0,05 37 РОССИЙСКИЙ СТОМАТОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ, №3, 2014 В результате анализа (табл. 2) выявлено статистически значимое различие в показателях между группой первичных больных (без леводопы) и группой больных, принимающих леводопу: по уровню кальция - 108,24+7,98 и 80,87±5,63 мг/дм3 (р = 0,034), магния - 9,3+0,62 и 7,97+0,57 мг/дм3 (р = 0,041), меди - 0,05+0,02 и 0,17+0,05 мг/дм3 (r = 0,021). Показатели различия в уровне цинка в ротовой жидкости между 1-й и 2-й группой недостоверны, однако, несмотря на то что результаты не попали в предел статистической достоверности, их можно рассматривать как критерии позитивной тенденции. При сопоставлении показателей контрольной группы (3-я) и больных, принимавших леводопу (2-я): уровень кальция 82,4+11,55 и 80,87+5,63 мг/дм3 (показатели практически не различаются), уровень магния 7,43+0,73 и 7,97+0,57 мг/дм3 (показатели практически не различаются), уровень цинка 3,81+0,82 и 4,83+0,94 мг/дм3 (показатели практически не различаются). Выявлено статистически значимое различие в содержании меди в ротовой жидкости между контрольной и 2-й группами - 0,03+0,02 и 0,17+0,05 мг/дм3 (r = 0,021). При сравнении концентрации МЭ в ротовой жидкости первичных пациентов, не принимавших леводопу (1-я), и пациентов контрольной группы прослеживается аналогичная корреляционная зависимость: статистически значимое различие в показателях по уровню кальция - 108,24+7,98 и 82,4+11,55 мг/дм3 (r = 0,034), магния - 9,3+0,62 и 7,43+0,73 мг/дм3 (r = 0,041) и цинка - 6,08+1,2 и 3,81+0,82 мг/дм3 (r = 0,021). Содержание меди в ротовой жидкости в 1-й и 3-й группах недостоверны, но сопоставимы (0,05+0,02 и 0,03+0,02 мг/дм3). Таким образом, при БП происходит не только увеличение выделения слюны, но и изменение микроэлементного состава ротовой жидкости. У больных БП по сравнению с контрольной группой в ротовой жидкости наблюдается избыток содержания токсичных МЭ: бария, свинца, алюминия, кадмия, никеля, мышьяка. Алюминий, кадмий и свинец не выявляются в контрольных образцах. Эссенциальные МЭ, наоборот, имеют тенденцию к снижению: у больных БП определяется относительный недостаток железа, хрома и селена. Не меняется содержание по сравнению с контрольной группой кобальта, сурьмы, ванадия, серебра. Нарушение водно-солевого барьера проявляется уменьшением содержания натрия и увеличением уровня калия в ротовой жидкости при БП. На основании результатов наших исследований можно утверждать, что особенности микроэлементного профиля ротовой жидкости есть следствие изменения проницаемости гематосаливарного барьера при БП. Введение леводопы больным БП приближает проницаемость гематосаливарного барьера к функциональному соответствию у здоровых лиц, чем и обусловлены достоверные (или недостоверные) различия в концентрации исследуемых элементов в этой группе пациентов. Заключение Сиалорея при БП связана с нейроденеративными процессами нигростриарной системы, продолговатого мозга, периферическими механизмами регулирования слюнотечения с вовлечением дофаминергических, норадренергических и холинергических механизмов. Продемонстрированное в нашем исследовании влияние леводопы на нормализацию содержания некоторых МЭ является доказательством этого, а определение микроэлементного профиля ротовой жидкости может быть своего рода скрининговым инструментом в отношении выявления ранних стадий БП.

About the authors

Guzel Renadovna Ruvinskaya

Kazan State Medical Academy

Email: guzelruv@mail.ru
420012, Kazan

References

Supplementary files