Molekulyarnaya Meditsina (Molecular medicine)Molekulyarnaya Meditsina (Molecular medicine)Молекулярная медицина1728-29182499-9490Russkiy Vrach Publishing House34087310.29296/24999490-2023-02-06Original researchОригинальные исследованияResearch ArticleSelective screening for immune disorders in newborn and infant childrenСелективный скрининг иммунных нарушений у новорожденных и детей раннего возрастаhttps://orcid.org/0000-0001-6306-7104PopovaLarisa Yu.ПоповаЛариса Юрьевна
Russian Federation

Head of the Department of Children’s Diseases, Doctor of Medical Sciences, Professor

заведующая кафедрой детских болезней, доктор медицинских наук, профессор

docpopova@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-6687-892XAlemanovaGalina D.АлемановаГалина Дмитриевна
Russian Federation

Professor of the Department of Children’s Diseases, Doctor of Medical Sciences

профессор кафедры детских болезней, доктор медицинских наук

galina.alemanova@bk.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8923-8829ChainikovaIrina N.ЧайниковаИрина Николаевна
Russian Federation

Professor of the Department of Normal Physiology, Doctor of Medical Sciences

профессор кафедры нормальной физиологии, доктор медицинских наук

inchainicova@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0003-1878-4467KudlayDmitry A.КудлайДмитрий Анатольевич
Russian Federation

Professor of the Department of Pharmacology, Institute of Pharmacy, Leading researcher at the laboratory of personalized medicine and molecular immunology, corresponding member of the Russian Academy of Sciences, Doctor of Medical Sciences

профессор кафедры фармакологии, член-корреспондент РАН, доктор медицинских наук, ведущий научный сотрудник лаборатории персонализированной медицины и молекулярной иммунологии №71

d624254@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0003-4792-6989ZlodeevaElena A.ЗлодееваЕлена Алексеевна
Russian Federation

Associate Professor of the Department of Children’s Diseases, Candidate of Medical Sciences

доцент кафедры детских болезней, кандидат медицинских наук

e.a.zlodeeva@orgma.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0441-1734AlbakasovaAkmer A.АльбакасоваАкмер Аманжуловна
Russian Federation

Senior Lecturer of the Department of Children’s Diseases, Candidate of Medical Sciences

старший преподаватель кафедры детских болезней, кандидат медицинских наук

a.a.albakasova@orgma.ruFGBOU VO «Orenburg State Medical University» of the Ministry of Health of RussiaФГБОУ ВО ОрГМУ Минздрава РоссииFGBOU VO First Moscow State Medical University. THEM. Sechenov of the Ministry of Health of Russia (Sechenov University)ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)FGBOU GNTS Institute of Immunology” FMBA of RussiaФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА РоссииFGBOU VO «Orenburg State Medical University» of the Ministry of Health of RussiaФГБОУ ВО ОрГМУ Минздрава России, Российская Федерация2104202321239452104202321042023Copyright ©; 2023, Russkiy Vrach Publishing HouseCopyright ©; 2023, ИД "Русский врач"2023Russkiy Vrach Publishing HouseИД "Русский врач"https://journals.eco-vector.com/1728-2918/article/view/340873

Introduction. Primary immunodeficiency states (PIDs) are a heterogeneous group of innate immune disorders. A feature of the clinical manifestations of PID is that they are nonspecific for specific clinical forms. With untimely diagnosis and the absence of pathogenetic therapy for immunodeficiencies, an unfavorable outcome is likely. From these positions, a modern method for diagnosing PID using multiplex analysis of the amount of TREC and KREC in dry blood spots in newborns and young children is relevant.

The purpose of the study: a comparative analysis of the amount of TREC and KREC in dry blood spots in children at risk for primary immunodeficiency (PID) under the age of 2 years as markers of T- and B-cell immune defects.

Methods. Markers of T-cell (TREC) and B-cell (KREC) immunodeficiencies were identified in 112 children from the PID risk group under the age of 2 years. The number of copies of TREC and KREC was determined by real-time PCR. Phenotyping of lymphocytes was carried out by flow cytometry.

Results. In 98 children (87.5%) out of 112 examined, the levels of TREC and KREC did not differ from the reference values. In 14 (12.5%) of children, a decrease in the level of TREC compared with the norm (p<0.05) was detected, regardless of gestational age: 87 copies /105 cells [27–217] in 5 full-term children and 140 copies /105 cells (51–338) in 9 premature babies. The number of copies of TREC in the retest after 4 months reached the reference values in children with different gestational age. A decrease in the absolute and relative values of CD19+lym (B-cell) was found in two children of 2B group.

Conclusion. The obtained results allow us to consider the quantitative analysis of TREC and KREC as an effective method for screening for immune defects, especially T-cell deficiency, in children, regardless of gestational age.

<italic>Введение</italic>

Первичные иммунодефицитные состояния (ПИД) представляют собой гетерогенную группу врожденных нарушений иммунитета. Особенностью клинических проявлений ПИД является то, что они неспецифичны для конкретных нозологических форм. При несвоевременной диагностике и отсутствии патогенетической терапии иммунодефицитов вероятен неблагоприятный исход. С этих позиций, актуален современный метод диагностики ПИД с использованием мультиплексного анализа количества TREC и KREC в сухих пятнах крови у новорожденных и детей раннего возраста.

Цель исследования: сравнительный анализ количества TREC и KREC в сухих пятнах крови у детей из группы риска по ПИД в возрасте до 2 лет в качестве маркеров Т- и В-клеточных иммунных дефектов.

Методы. У 112 детей из группы риска по ПИД в возрасте до 2 лет определены маркеры Т-клеточных (TREС) и В-клеточных (KREC) иммунодефицитов. Число копий TREC и KREC определяли методом ПЦР в режиме реального времени. Фенотипирование лимфоцитов проводилось методом проточной цитометрии.

Результаты. У 98 (87,5%) детей из 112 обследованных уровни TREC и KREC не отличались от референсных значений. У 14 (12,5%) детей выявлено снижение уровня TREС по сравнению с нормой (p<0,05) независимо от срока гестации: 87×105 копий (27–217) у 5 доношенных детей и 140×105 копий (51–338) у 9 недоношенных. Количество копий TREC в ретесте спустя 4 мес достигло референсных значений у детей с разным сроком гестации. Установлено снижение абсолютных и относительных значений CD19+lym (B-cell) у 2 детей группы 2Б.

Заключение. Полученные результаты позволяют рассматривать количественное определение TREC и KREC в качестве эффективного метода скрининга иммунных дефектов, особенно Т-клеточной недостаточности, у детей независимо от срока гестации.

childrenimmunodeficiencyscreeningTRECKRECprematureдетииммунодефицитскринингTRECKRECнедоношенныеNotarangelo L.D., Bacchetta R., Casanova J.L., Su H.C. Human inborn errors of immunity: An expanding universe. Sci. Immunol. 2020; 5: eabb1662. DOI: 10.1126/sciimmunol.abb1662Blom M., Bredius R.G.M., van der Burg M. Future Perspectives of Newborn Screening for Inborn Errors of Immunity. International journal of neonatal screening. 2021; 7 (4): 74. DOI.org/10.3390/ijns7040074Kutlug S., Karadag Alpaslan, Hancioglu M., ElifOzyaziciOzkan G., CemileYesilirmak S., Bulut D., Aygun H., Ogur C., Yildiran G. & A. Multiplex PCR-Based Newborn Screening for Severe T and B-Cell Lymphopenia: The first Pilot Study in Turkey. SisliEtfalHastanesitipbulteni. 2021; 55 (4): 551–9. DOI.org/10.14744/SEMB.2020.09623Picard C., Al-Herz W., Bousfiha A., Casanova J.L., Chatila T., Conley M.E. et al. Primary immunodeficiency diseases: an update on the classification from the International Union of Immunological Societies Expert Committee for primary immunodeficiency. J. ClinImmunol. 2015; 35 (8): 696–726. DOI: 10.1007/s10875-015-0201-1.Щербина А.Ю. Маски первичных иммунодефицитных состояний: проблемы диагностики и терапии. Российский журнал детской гематологии и онкологии. 2016; 3 (1): 52–8. [Shcherbina A.Yu. Masks of primary immunodeficiency disorders: diagnostic and therapeutic problems. Russian J. of Children Hematology and Oncology. 2016; 3: 52–8 (in Russian)].Чернышова Е.В., Анастасевич Л.А., Щербина А.Ю., Ларин С.С. Современные возможности скрининга и диагностики первичных иммунодефицитных состояний в педиатрии. Педиатрия. 2016; 95 (5): 121–8. [Chernyshova E.V., Anastasevich L.A., Shcherbina A.Yu., Larin S.S. Modern possibilities of screening and diagnostics of primary immunodeficiency states in pediatrics. Pediatrics. 2016; 95 (5): 121–8 (in Russian)].Латышева Е.А. Первичные иммунодефициты: состояние проблемы на сегодняшний день. JMF-центры в России. Вопросы современной педиатрии. 2013; 12 (6): 73–5. [Latysheva E.A. Primary immunodeficiencies: the state of the problem today. JMF-centers in Russia. Questions of modern pediatrics. 2013; 12 (6): 73–5 (in Russian)].Ярцев М.Н., Яковлева К.П., Плахтиенко М.В. Первичная иммунная недостаточность по данным Регистра первичных иммунодефицитных состояний Института иммунологии ФМБА России. Педиатрия. Приложение к журналу Consilium Medicum. 2006; 8 (1): 4–9. [Yartsev M.N., Yakovleva K.P., Plakhtienko M.V. Primary immune deficiency according to the Register of Primary Immunodeficiency States of the Institute of Immunology of the Federal Medical and Biological Agency of Russia. Pediatrics. Attachement to the magazine Consilium Medicum. 2006; 8 (1): 4–9 (in Russian)].Кондратенко И.В. Первичные иммунодефициты. Медицинская иммунология. 2005; 7 (5–6): 467–76. [Kondratenko I.V. Primary immunodeficiencies. Medical Immunology. 2005; 7 (5–6): 467–76 (in Russian)].Корсунский И.А., Кудлай Д.А., Продеус А.П., Щербина А.Ю., Румянцев А.Г. Неонатальный скрининг на первичные иммунодефицитные состояния и Т-/В-клеточные лимфопении как основа формирования групп риска детей с врожденными патологиями. Педиатрия им. Г.Н. Сперанского. 2020; 99 (2): 8–15 DOI: 10.24110/0031-403X-2020-99-2-8-15 [Korsunsky I.A., Kudlay D.A., Prodeus A.P., Shcherbina A.Yu., Rumyantsev A.G. Neonatal screening for primary immunodeficiency and Т-/B-cell lymphopenia as the basis for the formation of risk groups for children with congenital pathologies. Pediatria n.a. G.N. Speransky. 2020; 99 (2): 8–15. DOI: 10.24110/0031-403X-2020-99-2-8-15 (in Russian)].Зайцева Е.В., Запарий В.В. Современное состояние вопроса диагностики и лечения первичных иммунодефицитов. Современные проблемы науки и образования. 2020; 5: 139. [Zaitseva E.V., Zapariy V.V. The current state of the issue of diagnosis and treatment of primary immunodeficiencies. Modern problems of science and education. 2020; 5: 139 (in Russian)].King J.R., Hammarström, L. Newborn Screening for Primary Immunodeficiency Diseases: History, Current and Future Practice. Journal of clinical immunology. 2018. 38 (1): 56–66. DOI.org/10.1007/s10875-017-0455-xCristina G.M., Anne T., Katja V., Markku J., David M.H., Jonas B.G., Marie B.H., Dea A., Galina F., Stephanie D., David G., Daniel S. Rongcong. Wu: Development of a Multiplex Real-Time PCR Assay for the Newborn Screening of SCID, SMA, and XLA. Int. J. Neonatal Screen. 2019; 5: 39. DOI.org/10.3390/ijns5040039Shinwari K., Bolkov M., Tuzankina I.A. & Chereshnev V.A. Newborn Screening through TREC, TREC/KREC System for Primary Immunodeficiency with limitation of TREC/KREC. Comprehensive Review. Anti-inflammatory & anti-allergy agents in medicinal chemistry. 2021; 20 (2): 132–49. DOI.org/10.2174/1871523019999200730171600Дерябина С.С., Тузанкина И.А., Шершнев В.Н. Определение нормативных значений TREC и KREC в сухих пятнах крови новорожденных разного срока гестации в Свердловской области. Медицинская иммунология. 2018; 20 (1): 85–98. DOI: 10.15789/1563-0625-2018-1-85-98. [Deryabina S.S., Tuzankina I.A., Shershnev V.N. Determination of reference values for TREC and KREC in dry blood spots of newborns from different gestation ages in Sverdlovsk Region. Meditsinskaya immunologiya. Medical Immunology Russia. 2018; 20 (1): 85–98. DOI.org/10.15789/1563-0625-2018-1-85-98 (in Russian)].Borte S., von Dobeln U., Fasth A. et al. Neonatal screening for severe primary immunodeficiency diseases using high-throughput triplex real-time PCR. Blood. 2012; 119 (11): 2552–5. DOI:10.1182/blood-2011-08-371021Nakagava N., Imai K., Kanegane H. et al. Quantification of k-deleting recombination excision circles in Guthrie cards for the identification of early B-cell maturation defects. J. Allergy ClinImmunol. 2011; 128 (1): 223–5. e2. DOI: 10.1016/j.jaci.2011.01.052.Дерябина С.С., Тузанкина И.А., Власова Е.В., Лаврина С.Г., Шершнев В.Н. Ретроспективная диагностика первичных иммунодефицитных состояний у детей в Свердловской области. Медицинская иммунология. 2016; 18 (6): 583–8. [Deryabina S.S., Tuzankina I.A., Vlasova E.V., Lavrina S.G., Shershnev V.N. Retrospective diagnosis of primary immunodeficiency states in children in the Sverdlovsk region. Medical Immunology. 2016; 18 (6): 583–8 (in Russian)].Тузанкина И.А., Дерябина С.С., Болков М.А., Басс Е.А., Власова Е.В., Крохалева Я.М., Шершнев В.Н. Первичные иммунодефициты в раннем возрасте. М., 2018; 176. [Tuzankina I.A., Deryabina S.S., Bolkov M.A., Bass E.A., Vlasova E.V., KrokhalevaYa.M., Shershnev V.N. Primary immunodeficiencies at an early age. Moscow, 2018; 176 (in Russian)].Kwan A., Abraham R.S., Currier R., Brower A., Andruszewski K., Abbott J.K. et al. Newborn screening for severe combined immunodeficiency in 11 screening programs in the United States. JAMA. 2014; 312 (7): 729–38. DOI: 10.1001/jama.2014.9132Chien Y.-H., Yu H.-H., Lee N.-C., Ho H.-C., Kao S.-M., Lu M.-Y. et al. Newborn screening for severe combined immunodeficiency in Taiwan. Int J. Neonatal Screen. 2017; 3 (3): 16. DOI: 10.3390/ijns3030016.Zetterström R., Barbaro M., Ohlsson A., Borte S., Jonsson S., Winiarski J. et al. Newborn screening for primary immune deficiencies with a TREC/KREC/ACTB triplex assay-a three-year pilot study in Sweden. Int J. Neonatal Screen. 2017; 3 (2): 11. DOI: 10.3390/ijns3020011.Нисиченко О.А., Минулин И.Р., Семенова В.В. Диагностика синдрома Ниймеген у пациента с рабдомиосаркомой на этапе реабилитации. Педиатрический вестник Южного Урала. 2021; 2: 144–50. [Nisichenko O.A., Minulin I.R., Semenova V.V. Diagnosis of Nijmegen syndrome in patients with rhabdomyosarcoma at the rehabilitation stage. Pediatricheskij vestnik YUzhnogo Urala. 2021; 2: 144–50 (in Russian)].Козлов В.А., Савченко А.А., Кудрявцев И.В., Козлов И.Г., Кудлай Д.А., Продеус А.П., Борисов А.Г. Клиническая иммунология. Красноярск, 2020; 386. [Kozlov V.A., Savchenko A.A., Kudryavcev I.V., Kozlov I.G., Kudlay D.A., Prodeus A.P., Borisov A.G. Clinical immunology. Krasnoyarsk, 2020; 386 (in Russian)].Корсунский И.А., Продеус А.П., Румянцев А.Г., Гордукова М.А., Корсунский А.А., Кудлай Д.А., Филипенко М.Л., Шустер А.М. Скрининг новорожденных на первичные иммунодефициты и группу риска иммунорегуляторных расстройств, требующих диспансерного наблюдения. Педиатрия. 2019; 98 (3): 49–54. [Korsunsky I.A., Prodeus A.P., Rumyantsev A.G., Gordukova M.A., Korsunsky A.A., Kudlay D.A., Filipenko M.L., Schuster A.M.. Screening of newborns for primary immunodeficiencies and risk groups for immunoregulatory disorders requiring follow-up. Pediatria. 2019; 98 (3): 49–54. https://doi.org/10.24110/0031-403X-2019-98-3-49-54 (in Russian)].Тузанкина И.А., Дерябина С.С., Власова Е.В., Болков М.А. Семейный случай синдрома Ди Джорджи (синдрома делеции 22q11.2). Медицинсккая иммунология. 2017; 19 (1): 95–100. [Tuzankina I.A., Deryabina S.S., Vlasova E.V., Bolkov M.A. Semeyniy sluchai sindroma Di Dzhordzhi (sindroma deletsil 22q11.2). Meditsinskaya Immunologiya. Medical Immunology. 2017; 19 (1): 95–100. DOI.org/:10.15789/1563-0625-2017-1-95-100 (in Russian)].