THE INFLUENCE OF MICROBIAL FACTOR FOR THE EMERGENCE OF THE COWS HIDDEN ENDOMETRIA


Cite item

Full Text

Abstract

The purpose of research is detection in the early stages of the cows hidden endometritis using microbial factor. Studies were carried out at JSC «Demetra» in Kamensky district of Rostov region in the period from 2012 to 2014, thre were conducted daily observations of cows with multiple unsuccessful inseminations. For animals bacteriological studies, mucus samples were taken during the estrous of the cervix by the method Mikhailova-Lucko. In addition, measured microbial count, species identification of bacteria carried out, determined their pathogenic properties. To determine the number of microbial cells per 1 mL of the uterine fluid, MPA dispensed into sterile petri. Then dried in the thermostat at temperature of 40 degrees, then pipetted into 0.06 ml from dilution of 1:70 and of 1: 4900 on the surface of the agar plates in two parallel petri and calculated the average values of microbial numbers. To study the resulting cultures, colonies were selected, which were different by cultural and morphological characteristics, were screened by a loop on the beveled surface the culture medium and examined their biochemical properties on mediums Hiss, milk, nitrate broth (NB), vitelline-salt agar (VSA). Prepared and stained smears by Gram method. Hemolytic properties of isolated cultures was studied by blood agar. To prepare blood agar in MPA was added 5% sheep red blood cells (2.5% slurrys), which were washed by physiological solution. Hydrogen sulfide was determined using the sample with the filter paper dampened lead acetate, indole-sample with nitrous acid, nitrite, and zinc sample with starch-iodine in an acidic environment. The pathogenicity of the isolated cultures of microorganisms was determined by bioassay by 3 white mice, weighing 14-16 g, which were infected intraperitoneal by suspension of agar cultures in physiological solution, which was extracted from exudate of the uterus at a dose of 500 million microbial cells (bacterial concentration was set by bacterial turbidity standard 10 M.E.). Culture was recognized the pathogenic when death of one or more of the mice was within two days after infection. Hidden in cows endometritis in JSC «Demetra» Kamensky district of Rostov region has microbial etiology. The total number of microorganisms in 1 mL of the uterine fluid of cow with the hidden endometritis exceeds those in healthy animals, respectively, 1.5 times. The species composition of microflora was represented by some strains of the genera Staphilococcus, Streptococcus, Escherichia, Proteus, Enterobacter, Bacillus, and Pseudomonas.

Full Text

Скрытый (субклинический) эндометрит представляет собой разновидность хронического катарального эндометрита, в отличие от последнего, не имеет ясных клинических признаков воспаления и носит очаговый характер. Оставаясь продолжительное время незамеченным, скрытый эндометрит вызывает значительные (подчас необратимые) структурные изменения в стенке матки. Следовательно, чем раньше начато лечение, тем больше вероятность восстановления способности животного к размножению. По данным многих ученых, его вызывают микроорганизмы с ослабленной патогенностью на фоне хорошо выраженных местных защитных реакций. Причем, внесение в полость матки микроорганизмов происходит в основном через сперму и инструменты при искусственном осеменении [1, 2, 3, 4, 5, 6]. Цель исследований - выявление на ранних сроках скрытого эндометрита у коров с помощью микробного фактора. Задачи исследований: определить количество микроорганизмов у больных скрытым эндометритом и клинически здоровых коров и изучить видовой состав микрофлоры. Материалы и методы исследований. Работу проводили в ОАО «Деметра» Каменского района Ростовской области в 2012-2014 г. Вели ежедневные наблюдения за коровами с многократными безрезультатными осеменениями. У животных с вероятными признаками скрытого эндометрита и клинически здоровых коров брали пробы слизи во время течки для бактериологического исследования из шейки матки по методу Михайлова-Лучко. Определяли микробное число, проводили видовую идентификацию бактерий, определяли их патогенные свойства. Для определения числа микробных клеток в 1 мл маточного экссудата, МПА разливали в стерильные чашки, затем подсушивали в термостате при температуре 400С. Стерильной пипеткой наносили 0,06 мл из разведения 1:70 и 1:4900 на поверхность агаровой пластинки в две параллельные чашки и вычисляли средние величины микробного числа. Для изучения выделенных культур отбирали колонии, разные по культуральным и морфологическим признакам, отсевали петлей на поверхность скошенной питательной среды и изучали их биохимические свойства на средах Гисса, молоке, нитратном бульоне (НБ), желточно-солевом агаре (ЖСА). Готовили и окрашивали мазки по методу Грама. Гемолитические свойства выделенных культур изучали на кровяном агаре. Для приготовления кровяного агара в МПА добавляли 5% отмытых физиологическим раствором эритроцитов баранов (2,5%-я взвесь). Сероводород определяли с помощью пробы с фильтровальной бумагой, смоченной ацетатом свинца, индол-пробой с азотистой кислотой, нитрит-пробой с цинк-йод-крахмалом в кислой среде. Патогенность выделенных культур микроорганизмов определяли биопробой на 3 белых мышах, массой 14-16 г, которых заражали внутрибрюшинно суспензией агаровых культур в физиологическом растворе, выделенных из экссудата матки, в дозе 500 млн. микробных клеток (концентрацию бактерий устанавливали по бактерийному стандарту мутности 10 М.Е.). Культуру признавали патогенной при гибели одной или более мышей в течение двух суток после заражения. Результаты исследований. Всего исследовано 36 проб маточного содержимого, в том числе от коров с вероятными признаками скрытого гнойно-катарального эндометрита - 18 и от коров без признаков скрытого эндометрита - 18. Результаты бактериологического исследования выделений шейки матки коров представлены в таблице 1. Таблица 1 Результаты бактериологического исследования выделений шейки матки коров Группа, клинический диагноз Число коров в группе Количество микробных клеток, млн. в 1 мл, M±m Выведено чистых культур Культуры Из них патогенные Скрытый эндометрит 18 4250 ± 2,53 19 Streptococcus, Staphilococcus, Escherichia, Proteus, Pseudomonas, Bacillus, Enterobacter 6 Здоровые коровы 18 2833 ± 0,12 14 Streptococcus, Staphilococcus, Escherichia, Proteus, Pseudomonas, Bacillus, Enterobacter - При скрытом эндометрите в 1 мл маточного содержимого обнаружили 4250±2,53 микроорганизмов, что больше, чем у животных без клинических признаков, в 1,5 раза. Изолировали 33 микроорганизма в чистые культуры и изучали с помощью основных биохимических тестов с целью определения их рода. Микрофлора, выделенная от больных и здоровых животных, не отличалась и была представлена родами: Staphilococcus, Proteus, Enterobacter, Streptococcus, Pseudomonas, Bacillus, Escherichia. Микроорганизмы в ассоциации с преобладанием Г (-) палочек выделяли чаще при эндометрите. Большинство выделенных культур были непатогенными (27 из 33). От трех коров с диагнозом «скрытый эндометрит» выделили патогенные бактерии рода Escherichia (биопроба положительная), от двух - шаровидный микроорганизм, отнесённый к Staph. aureus (лецитовилаза, реакция плазмокоогуляции, биопроба положительные), Эшерихии на среде Эндо образовывали бледно-розовые полупрозрачные, слегка выпуклые колонии с розовыми краями; на МПБ - равномерное помутнение, а на вторые сутки - небольшой осадок, реакции с метилротом и на индол положительная. В двух случаях выделили Ps. aerogenosa (характерный рост, запах, пигмент - пиоцанин, подвижная, неферментирующая глюкозу). Заключение. Скрытый эндометрит у коров, содержащихся в ОАО «Деметра» Каменского района Ростовской области, имеет микробную этиологию. Общее число микроорганизмов в 1 мл маточного содержимого коров, больных скрытым эндометритом, превышает таковые у здоровых животных соответственно в 1,5 раза. Видовой состав микрофлоры представлен некоторыми штаммами родов Staphilococcus, Streptococcus, Escherichia, Proteus, Enterobacter, Bacillus, Pseudomonas.
×

About the authors

L G Voitenko

FSBEI HVE Don SAU

Email: voitenkolyubov@mail.ru
dr. of vet. sciences, prof., head of the department «Obstetrics, surgery and physiology of domestic animals» 346421, Rostov region, Novocherkassk, Rostov highway, 0

T I Lapina

PSI «North-Caucasian zone research veterinary institute» RAAS

Email: diacen-rd2012@yandex.ru
dr. of biol. sciences, prof., head interlaboratory diagnostic center 346421, Rostov region, Novocherkassk, Rostov highway, 0

I A Golovan'

PSI «North-Caucasian zone research veterinary institute» RAAS

Email: diacen-rd2012@yandex.ru
director of the Taganrog district veterinary laboratory, competitor 346421, Rostov region, Novocherkassk, Rostov highway, 0

D I Shilin

FSBEI HVE Don SAU

Email: voitenkolyubov@mail.ru
post-graduate student of the department «Obstetrics, surgery and physiology of domestic animals» 346421, Rostov region, Novocherkassk, Rostov highway, 0

References

  1. Войтенко, Л. Г. Эффективность цефаметрина при послеродовом гнойно-катаральном эндометрите коров / Л. Г. Войтенко, В. Я. Никитин, Е. И. Нижельская // Ветеринария. - 2011. - №3. - С. 38-40.
  2. Войтенко, Л. Г. Сравнительная терапевтическая эффективность цефаметрина, метрикура и фуразолидоновых палочек при послеродовом гнойно-катаральном эндометрите коров / Л. Г. Войтенко, В. Я. Никитин // Ветеринарный врач. - 2011. - №1. - С. 20-22.
  3. Войтенко, О. С. Биологические особенности поросят при применении биопрепаратов // Вестник Мичуринского государственного аграрного университета. - 2014. - №1. - С. 55-57.
  4. Войтенко, О. С. Пробиотики и их влияние на энергию роста свиней и продукты переработки свиноводства // Вестник Мичуринского государственного аграрного университета. - 2013. - №4. - С. 46-48.
  5. Войтенко, Л. Г. Повышение эффективности лечения послеродового эндометрита применением биостимуляторов / Л. Г. Войтенко, В. Я. Никитин, О. Н. Полозюк // Зоотехния. - 2011. - №5. - С. 21-22.
  6. Лапина, Т. И. Причины и формы бесплодия помесных коров холмогорской породы с голштинами / Т. И. Лапина, Н. В. Белугин, Т. Е. Банкина [и др.] // Актуальные проблемы охраны здоровья животных : мат. ΙΙ Международной науч.-практ. конф. - Ставрополь, 2004. - С. 278-283.

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML

Copyright (c) 2015 Voitenko L.G., Lapina T.I., Golovan' I.A., Shilin D.I.

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies