MICROORGANISMS COMPLICATING CATS PANLEUCOPENIA IN SAMARA REGION

Abstract


The purpose of research is scientific justification for increasing the resistance of orga-nism cats and prevention of viral and bacterial infections. Based on the purpose of the study, were as follows - Isolation and identification of cats living at home, accompanying and complicating the course of pan-leucopenia opportunistic pathogenic bacteria and micro-fungi; study of sea-fologicheskih, tinctorial, cultural, serological, biochemical properties of the isolated microorganisms. The study included a cat and cats sick panleukopenia. Cats and cats showed a reduction in the total number of leukocytes in the blood that is-is a key indicator of panleukopenia. At a rate of 5.5-18.5х10 9/ l, in the IP-to-follow animal white blood cell count was within 2.34-2.56х10 9/ l. The analysis of the microflora isolated from the teeth, gums, with the oral mucosa and of vomitus, revealed the presence of transient bacteria Staphylococcus aureus, Clostridium sporogenes and Clostridium difficile, Campylobacter coli and Leptospira biflexa. The study of the microorganisms isolated from the feces of cats and cats, all animals identified representatives automikroflory oral cavity and intestines. Concentration of bacteria Enterococcus faecalis, Lactobacillus delbrueckii and Bifidobacterium bifidum decreased in comparison with the norm. At the same time increased the concentration of opportunistic Escherichia, Proteus, Helicobacter pylori, and enteropathogenic Salmonella, Yersinia and Campylobacter. Our results allow us to conclude that the development of acute feline panleukopenia in cats leads to a sharp decrease in the concentration of representatives of the normal flora of the gastrointestinal tract and the replacement of its pathogen-governmental and opportunistic microbes.

Full Text

В России, в частности в Самарской области, у кошек часто диагностируют панлейкопению. Вирусную инфекцию чаще выявляют летом и осенью у кошек в возрасте до года. При этом, у кошек болезнь может протекать субклинически и плохо диагностироваться. Возбудителем панлейкопении является односпиральный ДНК-содержащий Parvovirus семейства Parvoviridae. Вирус жизнеспособен длительное время, поскольку устойчив к действию химических и физических факторов внешней среды. В окружающей среде источником возбудителя панлейкопении являются больные животные, выделяющие вирус со слюной, фекалиями, мочой и рвотными массами. Наряду с этим, у кошек наблюдают длительное скрытое вирусоносительство. Одним из основных симптомов панлейкопении у кошек является рвота и диарея, и как следствие развитие общей интоксикации и энтерита [1]. Вирусная инфекция в период становления клеточных и гуморальных звеньев неспецифической резистентности и иммунной системы создаёт благоприятные условия для активизации патогенных и условно-патогенных бактерий и микрогрибов. Развитие сопутствующих оппортунистических инфекций существенно осложняет панлейкопению. Условно-патогенные микробы, представители резидентной и транзиторной микрофлоры макроорганизма, оказывают болезнетворное воздействие на организм при увеличении их численности на фоне нарушения симбионтных отношений в результате снижения резистентности организма животных [2, 3]. В это время транзиторные патогенные микробы активно проникают во внутреннюю среду макроорганизма и занимают освободившееся место в её микробиоценозе. Среди них, как правило, преобладают факультативные внутриклеточные и облигатные внеклеточные микробы-паразиты [4, 6, 7]. В связи с этим были проведены исследования условно-патогенных и патогенных микроорганизмов, существенно осложняющих течение панлейкопении у кошек в Самарской области. Цель исследований - научное обоснование повышения резистентности организма кошек и профилактики вирусных и бактериальных инфекций. Исходя из цели исследования, были поставлены следующие задачи - выделение и идентификация у кошек, живущих в домашних условиях, сопутствующих и осложняющих течение панлейкопении условно-патогенных и патогенных бактерий, микрогрибов; изучение морфологических, тинкториальных, культуральных, серологических, биохимических свойств выделенных микроорганизмов. Материалы и методы исследований. Объектом исследования были кошки и коты породы сибирская кошка больные панлейкопенией, наблюдавшиеся в ветеринарных клиниках г. Самары в период с 2013 по 2014 гг. Диагноз на панлейкопению ставили на основе результатов иммунохроматографического теста. Кошки сибирской породы являются одной из самых популярных пород кошачьих среди горожан. Из наблюдавшихся пациентов для исследования отобрали 5 котов и 5 кошек в возрасте от 6 до 12 месяцев. Все животные содержались в домашних условиях, имели сбалансированный рацион при кормлении специализированными кормами. Отбор и работа с биоматериалом. Для отбора биоматериала и доставки его на исследование использовали коммерческие тампоны с транспортными микробиологическими коллекторами. Биоматериал от исследуемых животных отбирали до начала комплекса терапевтических мероприятий. Биоматериал отбирали с зубов и полости рта, из рвотных масс, со слизистой задней стенки глотки с тонзиллитной и околофаренгиальной областей. Для исследования микрофлоры желудочно-кишечного тракта отбирали фекалии. Биоматериал использовали для подготовки баксуспензии. Инокулят биоматериала высевали в чашки Петри и пробирки с питательными средами. Посевы культивировали в соответствующих условиях до 48-72 ч. Лептоспиры культивировали в течение 30 дней с пересевами. Исследование гематологических и иммунобиологических показателей у кошек и котов проводили общепринятыми методами. Кровь у кошек отбирали из латеральной подкожной вены предплечья и голени. Определяли содержание в крови эритроцитов, лейкоцитов, лейкограмму, тромбоцитов, фагоцитарную активность нейтрофилов, фагоцитарное число и индекс выявляли в ходе подсчёта количества Escherichia coli 0-20, поглощённых микрофагами, лизоцимную активность сыворотки крови - по отношению к лизирующему Micrococcus lysodeicticus, бактерицидную активность - к Escherichia coli 0-20 [8, 9, 10]. Колонии стафилококков выделяли на желточно-солевом агаре (ЖСА) и глюкозо-кровяном агаре, стрептококков - на глюкозо-кровяном агаре и тестировали в средах с добавлением желчи, микрококки - на кровяном МПА. Клостридии выделяли в среде Китта-Тароцци и на глюкозо-кровяном агаре Цейсслера, тестировали в мясо-пептонной желатине, бифидобактерии - на 3% мясо-печёночном пептоном агаре с добавлением лактозы и на глюкозо-кровяном агаре, лактобациллы - на молочно-печёночном агаре с дрожжевым экстрактом (МПДА) и на глюкозо-кровяном агаре. Кампилобактерии выделяли на среде ВИЭВ, в сафранино-железо-новобиоциновой среде (СЖН) и на глюкозо-кровяном агаре, лептоспиры - в среде Ферворта-Вольфа. Лептотрихии и превотеллы выделяли на глюкозо-кровяном агаре в анаэробных условиях, а бордетеллы - на бордетеллоагаре. Дрожжеподобные микрогрибы выделяли на среде Сабуро и глюкозо-картофельном агаре, а также в солодовом сусле. Эшерихии выделяли на средах Эндо и глюкозо-кровяном агаре, сальмонеллы - на висмут-сульфитном агаре, иерсинии - на дифференциально-диагностическом СБТС-агаре и селективном CIN-агаре, протеи - в среде агар П-1 с полимиксином и солями желчных кислот и на скошенном МПА, энтерококки - на средах Диф-5 и кровяном агаре. Хеликобактерии выделяли на полужидком мясо-печёночном-пептонном агаре. С созданием анаэробных условий культивировали бактероиды на глюкозо-кровяном агаре с добавлением гемина (витамин К) [5]. Количество выросших колоний микроорганизмов (КОЕ) подсчитывали общепринятым методом на приборе ПСБ, в бульонах - в камере Горяева из расчёта на 1 мл среды. Полученные чистые культуры микроорганизмов идентифицировали по культуральным, морфологическим и тинкториальным, биохимическим и серологическим свойствам. Биохимические свойства микроорганизмов изучали в ходе специфических тестов: постановка пёстрого ряда в средах Гисса, в пластинах ПБДЭ (пластина для биохимической дифференциации энтеробактерий), в ходе роста на специализированных средах и посредством других тестов. Тест на наличие органов движения у микроорганизмов проводили в препаратах «раздавленная» и «висячая» капля. Морфологию лептоспир изучали в данных препаратах в ходе световой бактериоскопии при затемнённом поле зрения. Лептоспиры тестировали в серологическом исследовании в ходе постановки реакции микроагглютинации в планшетах с групповыми агглютинирующими сыворотками серогрупп Grippotyphosa, Hebdomadis, Canicola, Pomona, Tarassowi и Icterohaemorrhagiae. Серовар выделенных сальмонелл определяли в реакции агглютинации с диагностическими серогрупповыми сыворотками [5]. Чувствительность выделенных чистых культур микробов к антибиотикам определяли в специфических тестах на средах АГВ (Андреева, Гивинталь, Гриднева, Ведьмина) и Мюллера-Хинтона. Результаты исследований обрабатывали статистически в компьютерной программе Excel. Результаты исследований. Острое течение панлейкопении у исследованных животных сопровождалось угнетением, отказом от корма и воды, повышением температуры тела, рвотой, диареей, болезненностью в области живота. У кошек и котов выявлено снижение общего количества лейкоцитов в крови, что является основным показателем развития панлейкопении (табл. 1). При норме 5,5-18,5х109/л, у исследованных животных количество лейкоцитов было в пределах 2,34-2,56х109/л. Соответственно наблюдалось снижение количества палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов, что обусловлено развитием продуктивной вирусной инфекции. Это привело к снижению иммунобиологической реактивности организма животных, в частности, к снижению фагоцитарной активности нейтрофилов и показателей фагоцитарного числа, лизоцимной и бактерицидной активности сыворотки крови. На этом фоне повышение количества лимфоцитов является ответной реакцией со стороны иммунной системы на развитие вирусной инфекции в организме исследованных животных. Содержание в крови животных эритроцитов зафиксировано в пределах физиологически обусловленных границ - 5,38-7,24х1012/л, при норме 5-10х1012/л. Таблица 1 Показатели гемоиммунограммы исследованных животных Показатели Группы животных кошки коты Эритроциты, 1012/л 5,38±0,25 7,24±0,36 Лейкоциты, 109/л 2,34±0,09 2,56±0,12 Палочкоядерные нейтрофилы, 109/л 0,12±0,04 0,18±0,07 Сегментоядерные нейтрофилы, 109/л 0,59±0,14 0,49±0,08 Лимфоциты, 109/л 1,45±0,26 1,71±0,34 Фагоцитарная активность нейтрофилов, % 42,38±2,16 46,52±1,84 Фагоцитарное число 2,44±0,62 2,68±0,88 Лизоцимная активность, % 40,56±2,96 42,38±3,82 Бактерицидная активность, % 55,37±2,65 52,63±2,18 В ходе анализа микрофлоры, выделенной с зубов, дёсен, со слизистой ротовой полости и из рвотных масс, у 4 кошек и 3 котов выявлены транзиторные бактерии Staphylococcus aureus, Clostridium sporogenes и Clostridium difficile, а у 2 кошек и 3 котов найдены Campylobacter coli и Leptospira biflexa. Среди резидентных бактерий у всех исследованных животных были выделены Streptococcus salivarius, Streptococcus canis, Micrococcus luteus, Prevotella oralis, Leptotrichia buccalis, Bifidobacterium bifidum, Lactobacillus delbrueckii, из микрогрибов у 2 котов и 3 кошек найдены представители рода Candida (табл. 2). Таблица 2 Свойства чистых культур микроорганизмов, выделенных из рвотных масс, с зубов, дёсен, со слизистой ротовой полости котов и кошек Свойства идентифицированных чистых культур микробов КОЕ/Культуральные Морфологические. Тинкториальные (по Граму ±) Streptococcus canis КОЕ 3,43х104±0,32 На глюкозо-кровяном агаре колонии в диаметре до 2-3 мм, круглые с гладкой поверхностью и ровной периферией, зона β-гемолиза Кокки в коротких цепочках и парами. Равномерная (+) Streptococcus salivarius КОЕ 4,26х105±0,48 На глюкозо-кровяном агаре колонии круглые с гладкой поверхностью и небольшим количеством слизи, периферия ровная, гемолиза нет Кокки в цепочках. Равномерная (+) Staphylococcus aureus КОЕ 4,66х104±0,52 На ЖСА колонии круглые с радужным венчиком, белые, выпуклые, поверхность гладкая, периферия ровная, в диаметре до 5 мм; на глюкозо-кровяном агаре даёт зону гемолиза Кокки в форме скопления клеток, напоминающих кисть винограда. Равномерная (+) Micrococcus luteus КОЕ 5,12х104±0,15 На кровяном МПА колонии мелкие 2-3 мм в диаметре, выпуклые, тёмно-жёлтые и красные, поверхность гладкая Кокки, расположены парами, небольшими скоплениями неправильной формы. Равномерная (+) Clostridium sporogenes КОЕ 2,56х103±0,26 C. difficile КОЕ 2,88х103±0,12 Гемолиза нет. На глюкозо-кровяном агаре Цейсслера колонии серого цвета, выпуклые с шероховатой поверхностью, периферия ризоидная, диаметр 7 мм, зона β-гемолиза. В бульоне растёт с помутнением среды и образованием хлопьевидного осадка и незначительного газообразования Палочки прямоугольной формы, средней длины с закруглёнными полюсами и субтерминальными спорами, в коротких цепочках или парные, подвижны. Равномерная (+) Campylobacter coli КОЕ 2,74х103±0,22 На среде ВИЭВ колонии круглые, выпуклые с гладкой поверхностью, диаметром 1-3 мм. На кровяном агаре гемолиза нет. В СЖН цвет среды без изменений Спиральноизогнутые палочки, в форме крыла летящей чайки, подвижны. Равномерная (-) Leptospira biflexa КОЕ 3,28х103±0,16 В бульоне Ферворта-Вольфа растёт образуя слабое помутнение, при встряхивании даёт муаровые волны Тонкие, извитые нити с утолщением на полюсах Bifidobacterium bifidum КОЕ 5,25х102±0,14 Колонии плотные, чечевицеобразной формы, с гладкой и шероховатой поверхностью Палочки с утолщением на полюсе, одиночные, в форме: полисада и буквы V. Неравномерная (+) Lactobacillus delbrueckii КОЕ 5,26х102±0,36 На кровяном агаре колонии крупные, плоские, сероватые, периферия ровная, поверхность гладкая, зона α-гемолиза. На МПДА мягкие, вязкие, круглые, плоские колонии Длинные палочки, одиночные и парные, в коротких цепочках, полюса округлые. Равномерная (+) Leptotrichia buccalis КОЕ 4,68х104±0,32 На глюкозо-кровяном агаре колонии круглые, каплевидные, тёмно-красного цвета, поверхность гладкая Прямые и слегка изогнутые палочки, объединённые в нити, одиночные и в виде скоплений из 1-3 клёток. Равномерная (-) Prevotella oralis КОЕ 4,28х104±0,56 На глюкозо-кровяном агаре колонии мелкие, 2-4 мм в диаметре, круглые, выпуклые, с гладкой поверхностью Полиморфные широкие, короткие палочки, с округлыми полюсами, одиночные и парные. Равномерная (-) Candida albicans КОЕ 3,16х102±0,46 Колонии выпуклые, белые с кремоватым оттенком, сметанообразной консистенции, периферия ровная, поверхность гладкая. В бульоне - помутнение, рыхлый осадок на дне пробирки Круглые, дрожжеподобные клетки. Окрашиваются равномерно метиленовым синим В результате исследования микрофлоры верхних дыхательных путей у 3 кошек и 4 котов были выделены транзиторные бактерии рода Bordetella bronchiseptica, а у 8 животных выявлены резидентные бактерии рода Streptococcus pneumoniae (табл. 3). Таблица 3 Свойства чистых культур микроорганизмов, выделенных с задней стенки глотки котов и кошек Свойства идентифицированных чистых культур микробов КОЕ/Культуральные Морфологические. Тинкториальные (по Граму ±) Streptococcus pneumoniae КОЕ 3,42х103±0,29 На глюкозо-кровяном агаре колонии круглые, маленькие, полупрозрачные, периферия ровная, зеленоватая зона α-гемолиза Кокки ланцетовидной формы, расположены парами и короткими цепочками по 5-7 клеток. Равномерная (+) Bordetella bronchiseptica КОЕ 4,36х102±0,34 На бордетеллоагаре колонии круглые до 2 мм в диаметре, выпуклые, имеют характерный блеск, периферия ровная Мелкие кокковидные палочки с округлыми полюсами, расположены одиночно, парами, подвижны. Неравномерная (-), интенсивность окраски на полюсах выше В результате биохимического исследования и теста на подвижность выделенных чистых культур микроорганизмов установлено, что культура Staphylococcus aureus растёт на солевом МПА, продуцирует каталазу, даёт положительный результат в тестах: Фогеса-Проскауэра, на восстановление нитратов, щелочную фосфатазу, гиалуронидазу, коагулазу и гемолитическую активность. Положительная реакция выявлена при ферментации углеводов в аэробных условиях: сахароза, маннит, манноза, трегалоза, лактоза, галактоза, фруктоза, а в тестах на ксилозу, арабинозу и раффинозу - отрицательные результаты. Тест на ферментацию глюкозы в анаэробных условиях с образованием молочной кислоты положителен, а тесты на эскулин, крахмал и индол отрицательны. Streptococcus canis чувствительны к желчи, не ферментировали L и D-арабинозу, дульцит, инулин, маннит, D-раффинозу, сорбит, рамнозу, тесты на гиппурат, тирозин, крахмал и в реакции Фогеса-Проскауэра были отрицательными. Тесты на ферментацию глюкозы, лактозы, трегалозы с образованием молочной кислоты были положительными. Streptococcus salivarius ферментировали с образованием кислоты глюкозу, сахарозу, мальтозу, раффинозу, инулин, салицин, трегалозу и лактозу, не ферментировали глицерин, маннит, сорбит, ксилозу. Выявлен гидролиз эскулина и мочевины. Clostridium sporogenes разжижают желатин, выделяют сероводород и аммиак, пептонизируют молоко, не ферментировали глюкозу, сахарозу, маннит, глицерин, салицин, мальтозу, галактозу. Тест с липазой и на гидролиз эскулина был положительным, бактерии были подвижны. Clostridium difficile разжижают желатин, в тесте с липазой дают положительный результат, слабо ферментируют с образованием кислоты целлобиозу, фруктозу, маннит, маннозу, подвижны. Campylobacter coli росли в средах с 1% глицина, 1% желчи, при 42оС, не ферментировали сахара, продуцировали сероводород, имели оксидазную и каталазную активность, восстанавливали нитраты, подвижны. Лептоспиры, выделенные от двух кошек и трёх котов, не прореагировали в реакции микроагглютинации в планшетах с групповыми агглютинирующими лептоспирозными сыворотками серогрупп Grippotyphosa, Hebdomadis, Canicola, Pomona, Tarassowi и Icterohaemorrhagiae, лептоспиры росли при 13оС, тест на продукцию липазы был положительным, подвижны. На основании этих результатов выделенные культуры лептоспир были отнесены к сапрофитам Leptospira biflexa. Bifidobacterium bifidum ферментировали глюкозу, лактозу, сахарозу, целлобиозу, не ферментировали арабинозу, ксилозу, рибозу, глюконат, мелецитозу, маннит, салицин, крахмал и трегалозу. Lactobacillus delbrueckii ферментировали арабинозу, ксилозу, глюкозу, фруктозу, мальтозу, дали отрицательный результат в тестах на каталазу, цитохромоксидазу, желатин, казеин, индол и сероводород. Micrococcus luteus не ферментировали глюкозу, маннозу, лактозу, отсутствовал гидролиз эскулина, тест на восстановление нитратов до нитритов был отрицательным, а на оксидазу и гидролиз желатины положительным. Leptotrichia buccalis ферментировали глюкозу до кислоты без газа, тесты на сероводород, аммиак, каталазу, желатину и восстановление нитратов были отрицательными. Prevotella oralis разжижали желатину, ферментировали эскулин, крахмал, глюкозу, лактозу и сахарозу, не ферментировали рамнозу. Candida albicans ферментировали с образованием кислоты и газа глюкозу, мальтозу, с образованием кислоты - сахарозу, не ферментировали лактозу. Чистые культуры микробов, выделенные с задней стенки глотки котов и кощек: Streptococcus pneumoniae ферментировали глюкозу, лактозу, раффинозу, трегалозу с образованием молочной кислоты, дали положительные результаты на чувствительность к оптохину и желчи; Bordetella bronchiseptica дали положительный результат в тестах на уреазу, оксидазу, каталазу, восстановление нитратов до нитритов, не ферментировали сахарозу, лактозу, сорбит, маннит, подвижны. Резидентные микроорганизмы занимают определённую экологическую нишу в микробиоценозе животных. В ротовой полости и рвотных массах котов и кошек выделены условно-патогенные бактерии Streptococcus canis, заселяющие кожный покров, слизистую верхних дыхательных путей и гениталии, как правило, собак, но с большей доли вероятности и кошек. Streptococcus salivarius заселяют из воздуха слизистую ротовой полости животных и человека. Micrococcus luteus заселяют из воздуха кожный покров и слизистую ротовой полости. Сапрофитные бактерии Bifidobacterium bifidum и Lactobacillus delbrueckii являются нормофлорой кишечника у животных и человека, а проникая с кормом в организм животного присутствуют также и в ротовой полости. Условно-патогенные бактерии Leptotrichia buccalis заселяют поверхность зубной эмали и дёсен, а Prevotella oralis - полость рта, толстый кишечник и мочеполовой тракт. Дрожжеподобные условно-патогенные микрогрибы Candida albicans присутствуют на протяжении всей жизни на кожном покрове и слизистых оболочках животных и человека, а при снижении потенциала естественной резистентности и иммунной системы макроорганизмы вызывают поверхностные, хронические и системные кандидозы. Сапрофитные транзиторные лептоспиры Leptospira biflexa, попадая в ротовую полость животных из окружающей среды с водой, частицами влажной почвы или мочой лептоспироносителей, присутствуют определённое время в микробиоценозе ротовой полости животных. Коты и кошки, у которых были выделены бактерии Leptospira biflexa, содержались совместно с другими домашними животными и получали регулярный моцион на свежем воздухе во время прогулок с хозяевами. Патогенные транзиторные бактерии Staphylococcus aureus, попадая из воздуха на слизистую ротовой полости, присутствуют там в ограниченной концентрации. Бактерии Clostridium sporogenes и C. difficile попадают в ротовую полость животных с частицами пыли, почвы и не редко с кормом. Campylobacter coli привносится в организм животных также с кормом и водой (алиментарно), поэтому и были выделены со слизистой ротовой полости и из рвотных масс исследованных кошек и котов. Среди транзиторных микробов, выделенных со слизистой задней стенки глотки у исследованных котов и кошек, идентифицированы условно-патогенные бактерии Streptococcus pneumoniae и патогенные микробы Bordetella bronchiseptica. Они занимают свою экологическую нишу в верхних дыхательных путях организма животных. Патогенные бактерии Bordetella bronchiseptica выделены ранее от бродячих собак и кошек, домашних хорьков (фретка) в условиях Самарской области. В России в последнее время разработаны методы диагностики бордетеллиоза у животных. Микробы, выделенные из фекалий исследованных животных, были идентифицированы по специфическим свойствам (табл. 4). Таблица 4 Свойства культур микробов, выделенных из фекалий кошек и котов КОЕ/культуральные Морфологические. Тинкториальные (по Граму±) Escherichia coli КОЕ 5,18х105±0,26 Колонии тёмно-красные, круглые с ровной периферией, выпуклые с гладкой поверхностью, размер 1-2 мм, на глюкозо-кровяном агаре гемолиза нет Палочки прямые, короткие, в поперечнике толстые, с округлыми полюсами, одиночные и парные. Равномерная (-) Salmonella enteritidis КОЕ 4,78х105±0,65 Колонии чёрные, круглые, выпуклые, периферия ровная, поверхность гладкая, размер 2-3 мм Палочки прямые, длинные, тонкие, с округлыми полюсами, одиночные. Равномерная (-) Yersinia enterocolitica КОЕ 1,63х104±0,37 Среда СБТС: колонии росинчатые, голубовато-синие, круглые, выпуклые с гладкой поверхностью, периферия ровная. Среда CIN-агар: равномерное помутнение Палочки овоидные, короткие, в поперечнике толстые, одиночные. Равномерная (-) Proteus vulgaris КОЕ 3,74х104±0,42 В П-1 растут с равномерным помутнением среды и образованием осадка, на косяке МПА - эффект роения Палочки прямые, короткие, с закруглёнными полюсами, одиночные и парные. Равномерная (-) Enterococcus faecalis КОЕ 4,12х102±0,35 Среда Диф-5: колонии росинчатые, серые, круглые, выпуклые, периферия ровная, поверхность гладкая. Кровяной агар: гемолиза нет Кокки овоидной формы, парные, редко небольшими цепочками. Равномерная (+) Campylobacter coli КОЕ 3,48х103±0,38 Слабое помутнение среды, без изменения её цвета Палочки тонкие, слегка извитые, располагаются попарно в виде «летящей чайки». Равномерная (-) Bacteroides fragilis КОЕ 5,48х105±0,46 Колонии мелкие, серовато-белые, полупрозрачные, гладкие, периферия ровная, гемолиз отсутствует Палочки короткие, толстые, полюса округлые, одиночные или в небольших группах. Равномерная (-) Lactobacillus delbrueckii КОЕ 3,35х103±0,42 Колонии крупные, плоские, серые с ровной периферией, поверхность гладкая, зона α-гемолиза Палочки длинные, одиночные и парные, в коротких цепочках, полюса округлые. Равномерная (+) Bifidobacterium bifidum КОЕ 3,27х103±0,43 Колонии средние, плотные, чечевицеобразные гладкие и шероховатые Палочки короткие и длинные с утолщением на полюсе, располагаются одиночно, в форме полисада и V-образно. Неравномерная (+) Helicobacter pylori КОЕ 4,73х104±0,63 Колонии в виде серовато-голубого диска около поверхности среды Палочки мелкие, тонкие, слегка спиральной формы, располагаются скоплением, напоминающим «летящую ласточку». Равномерная (-) Культуры микробов, выделенные из фекалий исследованных котов и кошек, в ходе биохимического тестирования, теста на подвижность и серологического исследования были окончательно идентифицированы на уровне вида, а у сальмонелл и на уровне серовара. Бактерии Escherichia coli ферментировали с образованием кислоты и незначительного газообразования глюкозу, ферментировали также β-галактозидазу, сахарозу, лактозу, маннит, сорбит, арабинозу, мальтозу, продуцировали лизиндекарбоксилазу, индол, подвижны. Samonella enterica подвид enterica серовар enteritidis ферментировали глюкозу и маннит с образованием кислоты и газа, выявлена утилизация цитрата, продукция лизиндекарбоксилазы, орнитиндекарбоксилазы, сероводород, подвижны. В реакции агглютинации прореагировали положительно с O-групповой сывороткой (1,9,12) и H-групповой сывороткой (g, m фазы 1). Yersinia enterocolitica ферментировали сахарозу, целлобиозу, сорбит, частично эскулин, продуцировали орнитиндекарбоксилазу, расщепляли мочевину, в реакции Фогеса-Проскауэра при 25оС давали положительный результат, в ходе культивирования при 25оС были подвижны. Proteus vulgaris ферментировали глюкозу, мальтозу, продуцировали индол и сероводород, были подвижны. Enterococcus faecalis ферментировали с образованием кислоты рамнозу, сахарозу, глицерин, сорбит, маннит, гидролизировали гиппурат, росли при 45оС, на средах содержащих 6,5% NaCl, 0,04% теллурита, молоко с 0,1% метиленового синего. Campylobacter coli не ферментировали сахара, проявляли каталазную и оксидазную активность, восстанавливали нитраты, продуцировали сероводород, росли в средах с 1% желчи, бриллиантового зелёного в разведении 1:100000, росли в диапазоне 30,5-43оС, были подвижны. Bacteroides fragilis ферментировали с образованием кислоты глюкозу, лактозу, сахарозу, продуцировали сероводород, тест на гидролиз эскулина был положительным, росли в средах с 20% желчи. Lactobacillus delbrueckii ферментировали с образованием молочной кислоты арабинозу, ксилозу, глюкозу, фруктозу, мальтозу. Тесты на каталазу, цитохромоксидазу, желатин, казеин, индол и сероводород были отрицательными. Bifidobacterium bifidum ферментировали с образованием кислоты лактозу и целлобиозу, а арабинозу, ксилозу, рибозу, глюконат, мелецитозу, маннит, салицин, крахмал и трегалозу не ферментировали. Helicobacter pylori продуцировали уреазу, алкогольдегидрогеназу, липазу, оксидазу, каталазу, не ферментировали сахара, были подвижны. В результате изучения микроорганизмов, выделенных из фекалий кошек и котов, у всех животных идентифицированы представители аутомикрофлоры ротовой полости и кишечника. Концентрация бактерий Enterococcus faecalis, Lactobacillus delbrueckii и Bifidobacterium bifidum снизилась по сравнению с нормой (табл. 4). В норме в 1 г фекалий энтерококки, лактобациллы и бифидобактерии составляют х106-1010. При этом возросла концентрация: условно-патогенных эшерихий, способных вызывать гнойно-воспалительные процессы различной локализации, и более вероятно патогенных диареегенных эшерихий; условно-патогенных протей представителей факультативной флоры толстого кишечника; условно-патогенных бактероидов, колонизирующих слизистую полости рта, верхних дыхательных путей и кишечника; условно-патогенных хеликобактерий являющихся этиологическим фактором более половины всех гастритов. Возросла также концентрация энтеропатогенных сальмонелл, иерсиний и кампилобактерий (вызывающих до 5-14% от всех диарейных патологий). Заключение. Развитие острой панлейкопении у кошек вызывает резкое снижение концентрации представителей нормофлоры желудочно-кишечного тракта и замещение её патогенными и условно-патогенными микробами. В результате этого у кошек усиливается дисфункция желудочно-кишечного тракта и существенно отягощается течение панлейкопении. При этом различий в видовом разнообразии микробов у котов и кошек не было выявлено. Контроль состояния микробиоценоза кошек при панлейкопении позволит скорректировать комплекс терапевтических мероприятий, что существенно облегчит течение вирусной инфекции и снизит летальность у животных.

About the authors

V V Ermakov

FSBEI HVE SSAA

Email: Vladimir_21_2010@mail.ru
446442, Samara region, settlement Ust’-Kinelsky, Uchebnay, 2 str
cand. of biol sciences, associate prof. of the department «Epizootology, pathology and pharmacology»

References

  1. Воробьёв, А. А. Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии / А. А. Воробьёв, А. С. Быков, М. Н. Бойченко [и др.]. - М. : Медицинское информационное агентство, 2004. - С. 33-181.
  2. Ермаков, В. В. Патогенные и условно-патогенные микробы в микробиоценозе хорьков (фретка) в условиях Самарской области // Известия Самарской ГСХА. - 2014. - №1. - С. 29-35.
  3. Ермаков, В. В. Резидентная и транзиторная микрофлора бродячих кошек и собак в условиях Самарской области // Известия Самарской ГСХА. - 2013. - №1. - С. 15-19.
  4. Кауфман, К. А. Атлас грибковых заболеваний / К. А. Кауфман [и др.]. - М. : ГЭОТАР-Медиа, 2010. - С. 96-132.
  5. Лабинская, А. С. Общая и санитарная микробиология с техникой микробиологических исследований / А. С. Лабинская, Л. П. Блинкова, А. С. Ещина [и др.]. - М. : Медицина, 2007. - С. 57-575.
  6. Покровский, В. И. Стрептококки и стрептококкозы / В. И. Покровский, Н. И. Брико, Л. А. Ряпис. - М. : ГЭОТАР-Медиа, 2006. - С. 125-530.
  7. Сверкалова, Д. Г. Разработка биопрепарата и бактериологической тест-системы для типирования Bordetella bronchiseptica : автореф. … канд. биол. наук : 03.01.06, 06.02.02 / Сверкалова Дарья Геннадиевна. - Ульяновск, 2011. - С. 1-24.
  8. Общий клинический анализ крови у кошек [Электронный ресурс]. - URL: http://www.biovetlab.ru/obschij klinicheskij analiz_krovi_u_koshek/ (дата обращения: 15.11.14).
  9. Отбор и подготовка образцов крови к анализу [Электронный ресурс]. - URL: http://myzooplanet.ru/laboratornaya-diagnostika-klinicheskaya (дата обращения: 07.12.14).
  10. Анализ крови кошек при инфекционных болезнях [Электронный ресурс]. - URL: http://otvetkak.ru/tips/domashnie-zhivotnye (дата обращения 11.12.14).

Statistics

Views

Abstract - 35

PDF (Russian) - 11

Cited-By


Article Metrics

Metrics Loading ...

PlumX

Dimensions

Refbacks

  • There are currently no refbacks.

Copyright (c) 2015 Ermakov V.V.

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies