Zajdela hepatoma clonal sublines as a model of cell transition state

Abstract

Full Text

В зоне инвазивного роста клетки первичных опухолей осуществляют эпителиально-мезенхимальный переход (ЭMП) и приобретают миграторный фенотип фибробластоподобных клеток. Предполагается, что процесс ЭMП способствует генерации опухолевых стволовых клеток (ОСК), ответственных за метаста-зирование. В индукции ЭMП участвуют сигнальные пути, интегрированные в единую сеть под управлением ERK1/2 и координирующие активность транскрипционных факторов, в числе которых члены суперсемейства Snail. При активации Snail1 утрачивается полярность клеток, подавляется экспрессия гена E-кадгерина, изменяется организация актинового цитоскелета, клетки приобретают способность к индивидуальной миграции и экспрессируют мезенхимальные маркеры, среди которых N-кадгерин и матриксные металлопротеиназы (ММП). Асцитная гепатома Зайдела крысы образовалась в результате опухолевой прогрессии клеток первичной опухоли и представляет собой этап метастатического каскада. Ранее с помощью MALDI масс-спектрометрии мы идентифицировали в асцитных клетках гепатомы ряд опухолеассоциированных белков, в числе которых фос-форилированная ERK2/МАР-киназа, EpCAM - маркер ОСК и басигин - индуктор ММП. Клональные сублинии гепатомы Зайдела получены нами в результате экспансии клеток голо- и мероклонов. Клетки голоклональных сублиний индуцируют рост асцитной опухоли при внутрибрюшном введении беспородным крысам, имеют фибробластоподобную морфологию с высоким ядерно-цитоплазматическим отношением. Клетки мероклонов не туморогенны, гете-рогенны по морфологии клеток (островки и одиночные эпителиоподобные клетки, фибробластоподобные клетки) и организации актинового цитоскелета, по типам миграции, экспрессии N-кадгерина и локализации хеморецептора CXCR4. Гетерогенность клеток мероклонов может отражать их нахождение в метастабильных - ЭМ1, ЭМ2 и ЭМ3 - стадиях ЭMП. Мы показали, что клетки всех сублиний гепатомы Зайдела экспрессируют маркеры ЭMП (SNAIL1 с ядерной локализацией, активные формы ММP9) и маркеры ОСК (Ov6 и EpCAM, короткий домен EpICD которого выявляется в ядре). Однако ключевое свойство ОСК-способность индуцировать опухоль - приобрели клетки только голоклональных сублиний, вследствие достижения ими, как можно предположить, стабильной стадии ЭMП с мезенхимальным фенотипом. Культивируемые in vitro клональные сублинии асцитной гепатомы Зайдела являются перспективной моделью для изучения механизмов осуществления опухолевого ЭMП, образования ОСК и метастазирования.