Sravnenie chuvstvitel'nosti neyral'nykh stvolovykh i (ili) progenitornykh kletok myshi k gammai neytronnomu izlucheniyu

Abstract

Full Text

Угнетение нейрогенеза, индуцируемое ионизирующим излучением, определяется потерей радиочувствительной популяции нейральных стволовых (НСК) и проге-ниторных клеток (НПК) в субгранулярной зоне зубчатой извилины гиппокампа, что приводит к снижению образования новых нейронов в мозге и, в результате, к снижению когнитивных функций. В работе использовали НСК/НПК, выделенные из головного мозга неонатальных мышей. Выделенные НСК/ НПК были охарактеризованы по маркерам НСК/НПК на разных пассажах культивирования. Доля нестин-поло-жительных клеток составляла 95-99,7%. Доля клеток, экспрессирующих одновременно CD133 и GFAP (НСК), соствила 25-38%, что коррелировало с долей клеток из общей популяции, способных к дифференцировке в нейроны и глию при удалении из ростовой среды факторов роста EGF и FGF. Клетки облучали на установке «ГУТ-200М» (у-излучение, 60Со) и в коллимированном пучке нейтронов и у-квантов ядерного реактора ИР-8 (смешанное у-нейтронное (yn) излучение. Обнаружено, что после воздействия у-излучения через 72 ч инкубации возрастало содержание CD133+/ GFAP+ клеток, которое сохранялось повышенным до 7 сут. инкубации после облучения. Обнаружено, что НСК/НПК более чувствительны к ул-излучению, чем к у-излучению. Чувствительность клеток оценивали по их выживаемости, клоногенной активности и эффективности репарации дву-нитевых разрывов ДНК (ДР). Динамика репарарации ДР различалась в клетках, облученных у-квантами и после у-нейтронного облучения. Так после у-облучения НСК/НПК в дозе 1 Гр максимум репарации ДР, оцениваемой по количеству фокусов флуоресценции фосфорилированного гистона H2AX (y-H2AX), был зарегистрирован через 1 ч после облучения. С увеличением времени инкубации количество фокусов y-H2AX снижалось и достигало контрольного уровня через 48 ч. После ул-облучения максимальный уровень репарации также наблюдался через 1 ч, однако репарация ДР происходила значительно медленнее. Снижение числа фокусов y-H2AX было зарегистрировано только через 6 ч после облучения и достигало контрольного уровня через 24 ч. По-видимому, это связано с тем, что нейтроны (как и заряженные частицы) индуцируют возникновение сложных повреждений ДНК кластерного типа, репарация которых затруднена. Кластерные повреждения либо остаются невосстановленными, либо репарация происходит с ошибками, что и в том, и в другом случае может приводить к гибели клеток по пути апоптоза или аутофагии.