VLIYaNIE UROKINDZY NA MEZENKhIMAL'NYE STROMAL'NYE KLETKI ChELOVEKA

Abstract

Full Text

Мезенхимальные стволовые клетки (МСК) принимают активное участие в регенерации, особенно активируясь при травме и воспалении. Восстановление тканевой функции сопровождается ангиогенезом, активацией / миграцией клеток-предшественников и реорганизацией внеклеточного матрикса. Эти эффекты связаны с двумя основными фибринолитическими факторами: активатором плазминогена урокиназного типа (uPA, урокиназой) и рецептором урокиназы (uPAR). Было показано, что uPAR экспрессируется на поверхности МСК и, кроме того, протеолитическая активность урокиназы может регулировать поведение МСК во время регенерации. Цель этой работы состояла в том, чтобы исследовать влияние на МСК, с помощью разработанных в нашей лаборатории рекомбинантных uPA и ее фрагментов: протеолитически неактивной uPA (с мутацией His204Gln (uPA-H / Q)), uPA, не имеющей «ростового» домена (AGFD), крингл домена (KD) и аминотерминальный фрагмент (ATF). Мы изучали миграцию мезенхимальных стромальных клеток, выделенных из жировой ткани человека, а также пролиферацию и секрецию матриксных металлопротеиназ, при воздействии uPA. Мы обнаружили, что uPA и ее рекомбинантные формы не влияют на пролиферацию МСК, с помощью MTT теста. МСК незначительно мигрировали в ответ на полноразмерную uPA, остальные рекомбинантные формы uPA не оказывали влияния, что полностью соответствует данным, полученным для эндотелиальных клеток пупочной вены человека. Полноразмерная урокиназа и крингл домен усиливают спонтанную миграцию МСК. Хемотаксис, индуцированный тромбоцитарным фактором роста (PDGF), ослаблялся при добавлении протеолитически неактивной uPA, KD и блокирующих антител к рецептору урокиназы. Урокиназа и все ее рекомбинантные формы индуцировали секрецию матриксной металлопротеиназы-9 в МСК, этот эффект отсутствовал в PDGF. Эти данные свидетельствуют о том, что система uPA участвует в регуляции миграции и секреции MMP9 с помощью МСК. Модуляция активности урокиназы может рассматриваться как возможный инструмент для индукции регенеративного потенциала МСК.