Ex vivo экспансия гемопоэтических предшественников из пуповинной крови: роль клеточных и неклеточных факторов микроокружения

Аннотация

Полный текст

Мезенхимальные стромальные клетки (МСК) из жировой ткани являются хорошей альтернативой МСК из костного мозга, поскольку эффективно поддерживают экспансию ex vivo гемопоэтических стволовых и про-гениторных клеток (ГСК). Мононуклеары пуповинной крови содержат ГСК, однако их небольшое количество является серьезным ограничением для использования в клеточной терапии. Экспансия ГСК ex vivo позволяет амплифицировать гемопоэтические предшественники различной степени коммитирования. МСК из жировой ткани эффективно поддерживают ГСПК из пуповинной крови. По сравнению с 20% 02, при «физиологической» гипоксии (5% 02) обнаружено достоверно больше гемопоэтических КОЕ среди флотирующих ГСПК, а также КООБ среди МСК-ассоциированных ГСК. По крайней мере, часть этих эффектов может быть обусловлена изменением функциональной активности МСК, в которых при «физиологической» гипоксии более активно экспрессируются гены, отвечающие за адгезию клеток, продукцию и ремоделирование внеклеточного матрикса. МСК-ассоциированные ГСК включают субпопуляцию CD45+/CD90+ некоммитированных гемопоэтических предшественников, что делает их востребованным продуктом в клеточной терапии и регенеративной медицине. В МСК, ассоциированных с ГСК, повышена экспрессия генов, отвечающих за иммуносупрессивную активность (IDO, LIF, PTGS2). МСК в составе ассоциа-тов с ГСК эффективно ингибируют активацию и пролиферацию аллогенных стимулированных T-лимфоцитов. Транскрипция и секреция VEGF также увеличена, указывая на возможную стимуляцию роста сосудов. Таким образом, сочетание факторов, характерных для тканевой ниши ГСК - стромального слоя и тканевого содержания О2 обеспечивает выраженные стромальные эффекты с преимущественным поддержанием неком-митированных ГСК, обеспечивающих длительное поддержание кроветворения in vivo (LTC-IC). При этом МСК сохраняют свой собственный регенеративный потенциал, демонстрируя свойства «третьей ткани». Результаты исследования могут быть востребованы для создания эффективных и контролируемых методических подходов, обеспечивающих получение большого количества гемопоэтических стволовых и прогениторных клеток для трансплантации. Полученные результаты расширяют возможности использования МСК для нужд регенеративной медицины.