ISPOL'ZOVANIE KLETOChNYKh TEKhNOLOGIY V KhIRUGIChESKOM LEChENII TAZOVOGO PROLAPSA

Full Text

Генитальный пролапс является одной из наиболее актуальных проблем современной медицины. Нередко заболевание проявляется в репродуктивном возрасте и носит прогрессирующий характер. Частота пролапса гениталий согласно данным мировой статистики варьирует в широких пределах от 2-3% в развитых странах до 85% женского населения в странах Востока. По данным Краснопольского В.И., Адамян Л.В., Кулакова В.И. опущение и выпадение внутренних половых органов наблюдается у 15-30% женщин, а у женщин старше 50 лет частота пролапса возрастает до 40%. В настоящее время наиболее эффективным методом лечения пролапса гениталий является хирургическое вмешательство. Пластика промежности с использованием собственных тканей сопровождается высокой частотой рецидивов (от 30%), что объясняется многими авторами изначальной потерей прочности соединительно-мышечного каркаса, а подобные операции восстанавливают его только на 50%. В связи с этим большое распространение получили операции с использованием нерассасывающихся синтетических материалов. Использование сетчатых протезов при пластике промежности сопровождается более низким процентом рецидивов (5-40%). Поэтому возрос интерес к усовершенствованию имплантационных материалов путем создания новой клеточно-инженерной конструкции для восстановления фасциальных дефектов тазового дна. Материал и методы. В качестве матриксов использовалась сетка PROLENE MESH PMM3 (ETHICON), состоящая из нерассасывающихся волокон, изготовленных из изотактического кристаллического стереоизомера полипропилена, синтетического линейного полиолефина (С3Н6)п толщиной около 0,5 мм. В качестве клеточного материала использовали мезенхимальные стволовые клетки (МСК), полученные из костного мозга (КМ) у 6 лабораторных животных (крыс), адгезированные на пластике клетки веретеновидной формы, выстраивающиеся в направленные колонии. Мезенхимальные стволовые клетки костного мозга каждой лабораторной крысы третьего пассажа были нанесены на образцы сеток PROLENE MESH PMM3 (ETHICON). Из сетки в стерильных условиях вырезаны 12 фрагментов квадратной формы 10 х 10 мм. На каждый фрагмент сетки добавили по 250 мкл клеточной суспезии (400 тыс. клеток). Инкубировали при температуре 37°С во влажной среде, содержащей 5% СО2 в течение 60 мин. Затем в каждую лунку добавляли по 2 мл культуральной среды, продолжая инкубацию в тех же условиях. На 14-е сутки отмечалось закрытие ячеек сетки и образование монослоя из МСК КМ. Далее полученная клеточно-инженерная конструкция использовалась для имплантации лабораторным животным. Операция по имплантации хирургических сеток и клеточно-инженерных конструкций, полученных путем адгезии аутологичных мезенхимальных стволовых клеток на полипропиленовой сетке, проведена группе из 6 лабораторных животных. Контрольные сетки и тканеинженерная конструкция установлены в образованные «карманы» подапоневротического пространства на брюшной стенке у каждой из 6 крыс. Заживление послеоперационного шва наступало в среднем в течение 10-15 сут. Животные выводились из эксперимента через 2 мес (2 крысы) и 4,5 мес (4 крысы), образцы сеток отправлялись на гистологическое исследование. Образцы сеток вырезали, парафиновые срезы толщиной 5 мкм окрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по Ван-Гизону, изучали под микроскопом Olympus BX51, фотографировали с помощью видеокамеры фирмы «Спецтехника» (Москва) и программы Launch CAM VIEW. Proceedings of the Fourth V.F. Snegirev Readings “Women’s health and factors determining it” Результаты и выводы 1. На 3-и сутки отмечалась адгезия МСК на нитях сетки (преимущественно по углам), а через 14 сут - рост колоний (часть ячеек закрывались клетками). Мелкие ячейки практически полностью были закрыты клетками. 2. Через 1,5 мес произведен забор и морфологическое исследование тканей, окружавших имплантированные сетки у двух животных, у одного из которых была смоделирована запланированная экструзия. Тканеинженерная конструкция оказалась более надежной: пропиленовая сетка в отличие от опытного образца была проращена соединительной тканью, макрофаги и гигантские клетки немногочисленны, что свидетельствует о менее выраженной воспалительной реакции. 3. У остальных 4 лабораторных животных забор материала производился через 4,5 мес после установки имплантов. При вскрытии у одного животного имплантированный опытный материал не был обнаружен (вероятно, удален самим животным); у другого операция осложнилась экструзией сетки контрольного образца и выраженным воспалительным процессом. 4. При наличии экструзии сетки и расхождения швов имелась не только лимфо-макрофагальная, но и нейтрофильная инфильтрация соединительной ткани, что связано с инфицированием. В одном из случаев в контрольной группе инфицирование отсутствовало, и воспалительная инфильтрация образующейся соединительной ткани была минимальной. Однако соединительная ткань отличалась большей выраженностью отека и меньшей зрелостью по сравнению с аналогичной группой через 2 мес. 5. В двух случаях, когда хирургических осложнений не было, соединительная ткань вокруг сетки отличалась зрелостью и минимальной воспалительной реакцией (в отличие от контрольной сетки у того же животного). 6. Таким образом, полученные предварительные данные дают основания считать необходимым дальнейшее продолжение данной работы на большем количестве лабораторных животных для получения статистически достоверных результатов.

About the authors

Ya. Yu Sulina

A. I Ishchenko

A. V Lyundup

L. S Aleksandrov

A. A Ishchenko

A. I Muravlev

References

Supplementary files