CLINICAL AND LABORATORY CHARACTERISTICS OF PATIENTS WITH HBEAG-NEGATIVE CHRONIC HEPATITIS B WITH DIFFERENT LEVELS OF VIRAL LOAD IN THE SERUM

Abstract


Our study demonstrates the relationship between of viral load with clinical, biochemical and immunological (IL-2, INF-α, INF-γ) tests in patients with HBeAg-negative НBV, n=132 analyzed the relationship. It was found that 75% of patients with HBeAg-negative НBV had viral load more than 20,000 IU\ml (n=99), in other cases, the amount of virus in the blood serum was below 20.000 IU\ml (n=35). These patients comprised two comparison groups, in the control group the blood of healthy donors was studied, n=50. The study revealed that patients with a higher viral load such as clinical syndromes asthenovegetative and hepatomegaly, and changes in biochemical parameters (increased levels of total bilirubin, Alt, AST, GGT) were significantly more common (p<0.001) compared to both the comparison group and the control group. Cytokine status indicators (IL-2, INF-α, INF-γ) in initial examination of patients had significant differences depending on the initial level of viral load in the serum. When the amount of virus was over 20,000 IU\ml there was observed decrease in the concentration of cytokines, in HBV DNA below 20.000 IU\ml their level was close to reference values. The low level of cytokines IL-2, INF-α, INF-γ in patients with HBeAg-negative НBV and high viral load can be explained by the consequence of the negative impact on the immune system due to long-term persistence of immunological body reaction in HBV.

Full Text

В настоящее время хронический вирусный гепатит В остаётся одной из основных проблем инфектологии. Высокий уровень инфицированности ВГВ (2 млрд человек в мире, из них более 400 млн в стадии хронического гепатита), тяжесть исходов (цирроз печени, ГЦК), недостаточная эффективность и высокая стоимость противовирусной терапии определяют медицинскую и социальную значимость этой инфекции [7, 8, 9]. Особое значение имеет группа пациентов HBeAg-негативным ХГВ, как самая многочисленная среди всех инфицированных ВГВ в России и наиболее сложная для этиотропного лечения [2]. Одной из причин неудачи противовирусной терапии у больных ХГВ является существующая исходно и усугубляемая или приобретаемая пациентом в процессе длительно существующего инфекционного процесса дисфункция системы цитокиновой регуляции, с формированием впоследствии структурно-морфологического дисбаланса всей системы иммунореактивности [1, 3, 4]. Изучение клинико-лабораторных особенностей, включая систему цитокинов, у больных в разных стадиях инфекционного процесса ХГВ: стадии иммунного контроля и иммунной толерантности - является актуальной задачей. Цель исследования: дать клинико-лабораторную, включая иммунологическую (IL-2, INF-α, INF-γ), характеристику больным HBeAg-негативным хроническим гепатитом В с разным уровнем вирусной нагрузки в сыворотке крови. Материалы и методы исследования Под наблюдением в Самарском областном гепатологическом центре Клиник СамГМУ находились больные ХГВ (n=336) в фазе репликации вируса (ДНК НBV+), с генотипом Д в 78% случаев. Диагноз хронического гепатита В был верифицирован на основании клинико-эпидемиологических, биохимических, серологических и молекулярно-биологических данных [5]. Определение вируса гепатита В (качественно и количественно) проводилось методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с помощью набора реагентов «РеалБест ДНК ВГВ» (ЗАО «Вектор Бест», г. Новосибирск). Содержание цитокинов в плазме определялось с помощью наборов реагентов ЗАО «Вектор-бест», основным компонентом которых являются моноклональные антитела к изучаемым интерлейкинам и интерферонам, сорбированные на поверхности лунок полистирольного планшета или набором реагентов ProCon для изучения состояния параметров IL-2, IFN-α, IFN-γ. Для статистической обработки использовались методы статистического анализа с применением пакета прикладных программ Statistica 8.0 для Windows [6]. Результаты Среди больных вирусным гепатитом, наблюдаемых в Самарском областном гепатологическом центре на базе клиники инфекционных болезней СамГМУ, была выделена группа пациентов (n=132) с НВeАg-негативным ХГВ, генотипа Д (100 %), с относительно недавним заражением (менее 10 лет). Это были больные в возрасте 22-54 лет, преимущественно женщины (56%). При их первичном обращении регистрировались следующие жалобы: все пациенты (100%) отмечали повышенную утомляемость (слабость, снижение трудоспособности), а также головную боль (87,3%), тяжесть (97,3%) и боли в правом подреберье (57,2%), снижение аппетита (97,3%), боли в эпигастрии (44,5%), тошноту (57,3%), метеоризм (70,9%), дискомфорт в животе (90,9%), кожный зуд (5,4%). При объективном обследовании пациентов выявлено: увеличение печени и изменение её плотности (81%), увеличение селезёнки (8,2%), наличие геморрагического синдрома (17,21%), внепечёночные знаки поражения печени (22%). При проведении количественного анализа ДНК HBV в сыворотке крови методом ПЦР вирусная нагрузка более 20.000 МЕ\мл была регистрирована в 75% случаев, в остальных - ниже 20.000 МЕ\мл (таблица 1). Эти пациенты составили две группы сравнения. В качестве группы контроля исследовалась кровь здоровых доноров n=50. Таблица 1 Характеристика групп больных НВеAg-негативным ХГВ по уровню вирусной нагрузки Группа Значение вирусной нагрузки Количество больных, n=132 Абс. % 1 Свыше 20.000 МЕ\мл 99 75 2 Менее 20.000МЕ\мл 35 25 В результате клинического обследования у больных НВеAg-негативным ХГВ в 1 группе (с более высокой вирусной нагрузкой) были выявлены следующие синдромы: у 93,9% - астеновегетативный синдром (повышенная утомляемость, раздражительность, расстройство сна, снижение работоспособности и общая слабость, недомогание, неустойчивость настроения, головная боль), у 91,9% - диспепсический синдром (снижение аппетита, неприятные ощущения в животе, тошнота, метеоризм, отрыжка, а у отдельных больных рвота). У 92,9% отмечалась тяжесть и/или боль в эпигастрии и/или в правом подреберье (синдром правого подреберья), имевшая преимущественно тупой, ноющий характер. Гепатомегалия регистрировалась у 72,2% пациентов данной группы, увеличение печени сопровождалось уплотнением её консистенции и умеренной болезненностью при пальпации. Астеновегетативный синдром и гепатомегалия у пациентов 2 группы сравнения наблюдались в 34,3% и 22,8% случаев соответственно, что значимо отличалось от результатов в 1 группе, p0,001 (рис. 1). Из данных гистограммы видно, что частота встречаемости ведущих синдромов максимально выражена в 1 группе больных. При исследовании биохимических показателей были получены следующие данные (таблица 2). Содержание АлАТ в сыворотке крови в 1-ой группе больных, имеющих более высокую вирусную нагрузку, составило 96,93±7,93 ед/л, что было выше показателей 2-ой группы больных (27,00±0,62 ед/л) и здоровых доноров (16,06±0,57), (p0,001). В свою очередь, при более низкой вирусной нагрузке этот показатель оставался в пределах референсных значений. Такая же тенденция была зафиксирована по значениям АСАТ, которые в группе пациентов с более высокой вирусной нагрузкой были выше и составили в среднем 70,23±5,40ед\л. Содержание щелочной фосфатазы и гамма-глутаминтранспептидазы у больных 1-ой группы было повышенным более значимо, чем во 2-й группе пациентов: щелочная фосфатаза (140,50±4,96 ед\л 122,84±2,93 ед\л, соответственно); гамма-глутаминтранспептидаза (69,78±3,98; 21,97±0,85 ед\л, соответственно). Эти показатели по сравнению с группой контроля были выше в обеих группах. Содержание IL-2 в сыворотке крови в 1-ой группе больных, имеющих более высокую вирусную нагрузку, составило 6,86±1,17 пг\мл и было значительно ниже показателей 2-ой группы больных (19,77±0,29 пг\мл) и здоровых доноров (19,85±0,23 пг\мл), (p0,001). В свою очередь, при более низкой вирусной нагрузке этот показатель оставался в пределах референсных значений. При исследовании уровня INF-α наблюдалась такая же тенденция. У больных с высоким уровнем вирусной нагрузки показатель INF-α был значительно снижен. При изучении показателей уровня INF-γ было зафиксировано снижение его значений в 1-ой группе (36,50±5,10 пг\мл) и незначительный подъём (100,42±2,21 пг\мл) - во 2-ой группе пациентов, p0,001. Таким образом, выявленные изменения содержания в сыворотке крови INF-γ у больных НВе-Аg-негативным ХГВ в группах сравнения отличались от зафиксированных тенденций уровня ИЛ-2, INF-α. Кроме того, была обнаружена связь между изменениями уровня ИЛ-2, INF-α и степенью биохимической активности процесса. Так, у больных во 2-ой группе пациентов, у которых регистрировались нормальные значения цитолитической активности (АлТ-27,00±0,62 Ед\мл), уровень ИЛ-2 составил 19,77±0,29 пг\мл, INF-α - 40,10±0,64 пг\мл, они не отличались от здоровых доноров. У пациентов 1-ой группы при высоких значениях АлАТ (96,93±7,93Ед\мл) - ИЛ-2 и INF-α были снижены до 6,86±1,17 и 26,99±1,17 соответственно, р0,001. Выводы Больные НВе-Аg-гегативным ХГВ с более высокой вирусной нагрузкой характеризуются более выраженными клиническими проявлениями (астеновегетативный и гепатомегалия, р0,001). При изучении уровня биохимических показателей в группе с наиболее высокой вирусной нагрузкой наблюдалось значимое повышение уровня общего билирубина, АлАТ, АСАТ, ГГТП, в сопоставлении как с группой сравнения, так и с группой контроля. Изменения отдельных показателей цитокинового статуса (IL-2, INF-α, INF-γ) при первичном обследовании больных имели различия в зависимости от уровня вирусной нагрузки в сыворотке крови. При более высоком уровне вируса наблюдалось значимое снижение значений ИЛ-2, INF-α, INF-γ. Низкий уровень цитокинов ИЛ-2, INF-α, INF-γ у больных HBeAg-негативным ХГВ с высокой вирусной нагрузкой можно объяснить следствием негативного влияния на иммунную систему длительной персистенции НВV.

About the authors

E A ZAYCEVA

Samara State Medical University

Email: ekasokova@mail.ru

References

  1. Габдрахманов И.А. [и др.] Взаимосвязи вирусологических и морфологических показателей в фазах иммунного контроля и реактивации у больных хроническим гепатитом В // Журнал инфектологии. - Т.7. - № 4. - 2015. - С.37-41.
  2. Жданов К.В. Вирусные гепатиты - СПб.: ИКФ «Фолиант», 2011. - 26 с.
  3. Ивашкин В.Т. Иммунная система и повреждения печени при хронических гепатитах В и С // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2009. - № 6. - С. 4-10.
  4. Ивашкин В.Т. Механизмы иммунной толерантности и патологии печени // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2009. - № 2. - С. 8-13.
  5. Карандашова И.В., Чуланов В.П. Особенности лабораторной диагностики инфекций. Вирусные гепатиты. Гепатит В // Лабораторная диагностика инфекционных болезней. Справочник / Под ред. В.П. Покровского, М.Г. Твороговой, Г.А. Шипулина. - М.: БИНОМ, 2013. - С. 62-74.
  6. Юнкеров В.И. Математико-статистическая обработка данных медицинских исследований / В.И. Юнкеров, С.Г. Григорьев. - 2-е изд., доп. - СПб.: ВМедА, 2005 - 292 с.
  7. EASL clinical practice guidelines: Management of chronic hepatitis B virus infection. - J Hepatol. - 2012. - 57(1). - Р. 167-185.
  8. Stasi C. et al. The epidemiological changes of HCV and HBV infections in the era of new antiviral therapies and the antiHBV vaccine. - Journal of infection and public health. - 2015 Jul 4. Available from: http://www.sciencedirect. com/science.
  9. World Health Organization. Hepatitis B Fact sheet. - July 2012. Available at: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs204/ en/. Accessed November 1, 2012.

Statistics

Views

Abstract - 35

PDF (Russian) - 7

Cited-By


Article Metrics

Metrics Loading ...

PlumX

Dimensions

Refbacks

  • There are currently no refbacks.

Copyright (c) 2016 ZAYCEVA E.A.

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies