DEvELopMENT of TEOHNiQuEs FoR THE DETERMiNATioN oF MoisTuRE (Loss oN DRYING) oF MEDiOiNAL PLANT RAW MATERiALS oF MoRPHoLoGiOAL group “FRUiT” by infrared thermogravimetric method

Full Text

Введение Для контроля качества лекарственного растительного сырья (ЛРС) - источника эффективных и безопасных лекарственных препаратов - актуальным представляется решение двух основных задач: определения подлинности и качества [6, 7]. После подтверждения подлинности ЛРС определяют показатели качества в соответствии с разделом фармакопейной статьи (ФС) «Испытания» Государственной фармакопеи Российской Федерации (ГФ РФ). Одним из наиболее важных числовых показателей качества любого вида ЛРС является влажность. Именно с этого показателя требуется начинать современный фармакопейный анализ любого вида ЛРС [4, 5]. Определение влажности ЛРС и ЛРП со времен СССР [3] и до настоящего времени в РФ проводится традиционным методом высушивания в сушильном шкафу в соответствии с требованиями ОФС.1.5.3.0007.15 «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов» ГФ РФ XIII и XIV изданий [4, 5]. Однако это очень длительный (более 3 часов), трудоемкий и многостадийный процесс. Данная ОФС указывает на возможность применения инфракрасных (ИК) термографических влагомеров, что позволит значительно упростить анализ, снизить затраты и повысить точность. В литературе имеются сведения о преимуществах определения влажности ЛРС с использованием ИК-термографических влагомеров [1, 8, 9]. На сегодняшний день фармакопейные методики для определения числового показателя «влажность» инфракрасным термогравиметрическим методом (ИКТГМ) воздушно-сухого ЛРС не разработаны, однако в литературе описаны отдельные примеры такого определения [1, 8]. Цель нашей работы - разработка ИКТГМ-методик определения влажности ЛРС исследуемых видов - представителей морфологической группы «Плоды»: расторопши пятнистой, шиповника коричного и укропа пахучего. Результаты и их обсуждение В данном исследовании нами были использованы следующие приборы и оборудование: • автоматический анализатор влажности Sartorius MA-150 (Sartorius AG, ФРГ), нагрев до температуры 105 °C; • шкафы сушильные: ШС-80-01МК СПУ (ОАО «Смоленское СКТБ СПУ», Россия) и электрический круглый 2В-151 (Одесский экспериментальный завод лабораторной медицинской техники, СССР), нагрев до температуры 100-105 °C; • набор лабораторных сит (с диаметром отверстий 0,18; 0,25; 0,5; 1; 2; 3; 5; 7; 10 мм); • весы аналитические: ЛВ 210-А (ООО «Сартогосм», Россия) и OHAUS AR2140 (Ohaus Corp., США). В ходе исследования был проведен аналитический обзор нормативной документации (НД) на ЛРС и лекарственные растительные препараты (ЛРП), в том числе приведенной в действующих изданиях ГФ РФ [4, 5]. При исследовании ЛРС и ЛРП данная НД принималась во внимание. В процессе работы нами были использованы физические методы анализа: просеивание образцов, высушивание до постоянной массы в сушильном шкафу и ИК-влагомере. Использованные методики описаны в соответствующих ОФС и ФС ГФ РФ XIII и XIV издания (ОФС.1.5.3.0007.15 «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов»; ОФС.1.5.1.0007.15 «Плоды»; ФС.2.5.0035.15 «Расторопши пятнистой плоды»; ФС.2.5.0106.18. «Шиповника плоды»; ФС.2.5.0043.15 «Укропа пахучего плоды») [4, 5]. Кроме того, проведены сравнительные исследования определения влажности ЛРС фармакопейным методом высушивания до постоянной массы в сушильном шкафу и ИКТГМ-методом с использованием ИК-анализатора влажности. Статистическую обработку результатов исследования проводили согласно ОФС.1.1.0013.15 «Статистическая обработка результатов химического эксперимента» [4, 5]. Исследование проводилось на промышленных образцах воздушно-сухих плодов: расторопши пятнистой (ЗАО «Самаралек-травы», Россия, Самарская обл.), шиповника коричного (ООО «АЛСУ», Россия, Алтайский край) и укропа пахучего (ООО «Целебная поляна», Россия, Самарская обл.; АО «Красно-горсклексредства», Россия, Московская обл.), которые соответствовали требованиям отдельных ФС ГФ РФ XIII и XIV на каждый конкретный вид ЛРС [4, 5]. При разработке методик определения влажности нами изучались следующие параметры: различные навески и степени измельчения ЛРС, фиксировались температура и время анализа. Плоды анализировались в различных навесках и степенях измельчения с использованием ИК-анализатора влажности и сушильного шкафа. Особое внимание следует обратить на то, что в табл. 1-6 для ИКТГМ-метода представлены оптимальные навески пробы сырья, полностью покрывающей поверхность дна металлической кюветы, как и рекомендует инструкция к прибору [9], что значительно снижает вероятность ошибки. Однако для сушильного шкафа навески взяты в строгом соответствии с требованиями ГФ РФ XIII и XIV (по 1,0-2,0 г и по 3,0-5,0 г) [4, 5]. Нами установлены оптимальные параметры для определения влажности плодов рас-торопши ИКТГМ-методом: навеска около 10,0 г со степенью измельчения 3 мм (при этом цельные плоды отсутствуют и поверхность дна металлической кюветы покрывается полностью). При использовании ИК-анализатора время высушивания в среднем составляло около 30 минут, а в случае сушильного шкафа - более 4 часов. Влажность составила от 5,67 до 5,79 %, что сопоставимо с влажностью (от 5,38 до 5,54 %), определенной с использованием сушильного шкафа (табл. 1). Из приведенных данных сравнительной метрологической оценки методов исследования влажности плодов расторопши (табл. 2) видно, что наименьшая погрешность определения (менее 1 %) - в случае ИкТГМ-метода с оптимальными параметрами, а наибольшая (более 1,5 %) - в случае ИКТГМ-метода с навеской около 3,0 г, что объясняется неполным покрытием дна металлической кюветы. Ранее нами было проведено сравнительное исследование по определению влажности плодов растороп-ши цельных и измельченных, где показано, что результаты в цельных плодах явно занижены [2]. В случае измельчения плодов рас-торопши до порошка (частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями 1 мм) наблюдается подгорание верхнего слоя пробы и образование корки, что приводит к снижению воспроизводимости результатов. Для плодов шиповника необходимо внимательно подбирать способ и степень измельчения, а также соотношение фракций. Нами было установлено, что анализировать отдельно одну из фракций нерационально, так как результаты получаются недостоверными. Так, например, измельченные плоды, проходящие сквозь сито с диаметром отверстий 5 мм, но не проходящие сквозь сито с диаметром отверстий 3 мм, представлены в основном (более 95 %) плодиками - орешками, а фракция частиц, прошедших сквозь сито с диаметром отверстий 2 мм - частицами гипантия. Мы предлагаем следующий алгоритм: перед тем как приступить к определению показателя «влажность» с использованием автоматического ИК-анализатора, необходимо отвесить Таблица 1 / Table 1 Определение влажности плодов расторопши Moisture (loss on drying) determination of Silybum marianum (L.) Gaertn fruit № ^п/п Анализатор влажности (ИКТГМ-методика) Сушильный шкаф Навеска, A, г Влажность, W, % Навеска, A, г Влажность, W, % Навеска, A, г Влажность, W, % 1 10,093 5,67 3,053 5,25 3,023 5,38 2 10,095 5,68 3,058 5,32 3,027 5,44 3 10,094 5,69 3,051 5,38 3,025 5,46 4 10,093 5,71 3,056 5,41 3,020 5,47 5 10,091 5,76 3,052 5,44 3,024 5,53 6 10,098 5,76 3,057 5,46 3,026 5,53 7 10,099 5,79 3,056 5,53 3,022 5,54 Таблица 2 / Table 2 результаты сравнительной метрологической оценки методов исследования влажности плодов расторопши (n = 7; f = 6; P = 95 %; t (P, f) = 2,45) The results of a comparative investigation of the moisture (loss on drying) of Silybum marianum (L.) Gaertn fruit (n = 7; f = 6; P = 95%; t (P, f) = 2.45) ^^^^^^^1Метод (навеска) ^*, % e, %^- ИКТГМ (около 10,0 г) 5,72 0,0022 0,0177 0,0433 0,76 ИКТГМ (около 3,0 г) 5,40 0,0086 0,0350 0,0858 1,59 Сушильный шкаф (около 3,0 г) 5,48 0,0034 0,0222 0,0544 1,00 PHARMACY ФАРМАЦИЯ Таблица 3 / Table 3 Определение влажности плодов шиповника Moisture (loss on drying) determination of Rosa cinnamomea L. fruit № п/п Анализатор влажности (ИКТГМ-методика) Сушильный шкаф Размер частиц 10 мм 5 мм Навеска, A, г Влажность, W, % Навеска, A, г Влажность, W, % Навеска, A, г Влажность, W, % 1 18,153 6,13 17,557 5,70 3,581 6,99 2 19,144 6,15 17,546 5,74 3,661 7,12 3 18,756 6,37 19,446 5,77 3,461 7,30 4 19,881 6,43 19,011 5,79 3,267 7,46 5 19,078 6,46 17,545 5,88 3,624 7,49 6 19,082 6,52 20,243 6,15 4,375 7,56 7 19,073 6,60 19,880 6,24 3,827 7,77 результаты сравнительного исследования влажности плодов шиповника (n = 7; f = 6; P = 95 %; t(P, f) = 2,45) The results of a comparative investigation of the moisture (loss on drying) of Rosa cinnamomea L. fruit (n = 7; f = 6; P = 95%; t (P, f) = 2.45) Таблица 4 / Table 4 ^^^^^1Метод (размер частиц) ^*, % e, % ИКТГМ (10 мм) 6,38 0,0321 0,0677 0,1658 2,60 ИКТГМ (5 мм) 5,90 0,0455 0,0806 0,1975 3,35 Сушильный шкаф 7,38 0,0715 0,1011 0,2476 3,35 ■ на электронных весах цельные плоды шиповника, около 18,0-20,0 г, затем провести измельчение в ступке и просеивание сквозь сито с диаметром отверстий 10 мм. Не прошедшие сквозь сито частицы следует вновь измельчить и просеять. Результаты исследования параметра «измельченность» для плодов шиповника показали, что оптимальной является степень измельчения до частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 10 мм (табл. 3 и 4). Таким образом, навеску сырья около 19,0 г измельченных плодов, прошедших сквозь сито с диаметром отверстий 10 мм, равномерным слоем размещают на дне металлической кюветы и начинают определение. При использовании ИК-анализатора время высушивания в среднем составляло около 60 минут, а в случае сушильного шкафа - более 5 часов. При использовании ИК-анализатора влажность составила от 6,13 до 6,60 %, а при высушивании до постоянной массы в сушильном шкафу - от 6,99 до 7,77 % (табл. 3). Из приведенных данных сравнительной метрологической оценки методов исследования влажности плодов шиповника видно, что наименьшая погрешность определения (менее 3 %) отмечена в случае ИКТГМ-метода с оптимальными параметрами, а наибольшая (более 3 %) - в случае традиционного метода с навеской около 3,0 г (см. табл. 4). Для ЛРС и ЛРП «Укропа пахучего плоды», содержащего в качестве ведущей группы биологически активных веществ эфирное масло, для высушивания в сушильном шкафу была взята навеска около 1-2 г (точная навеска), так как в дальнейшем значение подставляется в формулу расчета количественного содержания эфирного масла. Интересно, что влажность ЛРС и ЛРП часто отождествляют только с содержанием воды, но на самом деле показатель «влажность» включает вещества, которые выделяются при нагревании до определенной температуры, уменьшая массу пробы сырья (препарата). Среди таких веществ компоненты эфирных масел, спирты и другие летучие органические вещества [9]. Современная ГФ РФ под понятием «влажность» подразумевает «потерю в массе при высушивании за счет удаления гигроскопической влаги и летучих веществ» [4: с. 413, 5: с. 2361]. ■■ Таблица 5 / Table 5 Определение влажности плодов укропа пахучего Moisture (loss on drying) determination of Anethum graveolens L. fruit Анализатор влажности (ИКТГМ-методика) Сушильный шкаф № п/п Навеска, Влажность, Навеска, Влажность, A, г W, % A, г W, % 1 12,088 6,63 1,7265 6,64 2 12,047 6,77 1,6317 6,81 3 12,131 6,79 1,6304 6,84 4 12,881 6,85 1,5672 6,92 5 12,064 6,95 1,5539 7,13 6 12,020 6,96 1,5020 7,14 7 12,085 7,02 1,4993 7,16 результаты сравнительного исследования влажности плодов укропа пахучего (n = 7; f = 6; P = 95 %; t (P, f) = 2,45) The results of a comparative investigation of the moisture (loss on drying) of Anethum graveolens L. fruit (n = 7; f = 6; P = 95%; t (P, f) = 2.45) Таблица 6 / Table 6 Метод (навеска) X, % s2 S DX e, % ИКТГМ (12-15 г) 6,85 0,0182 0,0510 0,1250 1,82 Сушильный шкаф (1-2 г) 6,95 0,0402 0,0758 0,1857 2,67 При просеивании сквозь сито с диаметром отверстий 2 мм плоды укропа пахучего проходили без измельчения. Нами было проведено сравнительное исследование по определению влажности плодов укропа пахучего цельных и измельченных, которое показало, что результаты в цельных плодах явно занижены: среднее значение влажности около 5 %. Измельчение плодов укропа пахучего проводилось до отсутствия цельных плодов и частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 2 мм, но не проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 1 мм. Степень измельчения до частиц размером менее 1 мм использовать нецелесообразно, так как отверстия сит закупориваются, создавая тем самым определенные трудности и увеличивая время на подготовку пробы. Как видно из данных в табл. 5, при высушивании в сушильном шкафу влажность плодов укропа пахучего составила от 6,64 до 7,16 %. Для ИК-анализатора в качестве оптимальной была выбрана навеска около 12,0 г, при которой показатель влажности составил от 6,63 до 7,02 %. Время высушивания в среднем составляло около 30 минут при использовании ИК-анализатора и более 3 часов - при использовании сушильного шкафа. Исходя из представленных в табл. 1, 3, 5 данных видно, что значения, полученные при анализе воздушно-сухого измельченного ЛРС фармакопейным методом, а также результаты, полученные с помощью ИК-анализатора влагосодержания, сопоставимы. Погрешность среднего значения во всех случаях составила менее 5 % (табл. 2, 4, 6). Полученные данные могут быть использованы для разработки методик определения влажности для других представителей морфологической группы «Плоды». Заключение Таким образом, в результате проведенных исследований нами были научно обоснованы основные параметры разрабатываемых методик определения влажности для трех видов ЛРС - представителей морфологической группы «Плоды» (расторопши, шиповника и укропа пахучего) и двух ЛРП (фасованное ЛРС «Шиповника плоды», «Укропа пахучего плоды») с использованием современного ИКТГМ-метода. В настоящее время нельзя полностью отказаться от использования традиционного фармакопейного метода определения влажности с использованием сушильного шкафа, так как для всех видов ЛРС данная методика является пока единственной разработанной и утвержденной в РФ. Главные PHARMACY ФАРМАЦИЯ ■■ преимущества использования автоматического ИК-анализатора влажности - экспресс-ность, меньшая энерго- и трудоемкость. Конфликт интересов отсутствует.

About the authors

D. A Zhdanov

Samara State Medical University

Email: zhdanov-dima@mail.ru
Postgraduate Student, Department of Pharmacognosy with Botany and the Basics of Phytotherapy, Samara State Medical University Samara, Russia

V. B Braslavsky

Samara State Medical University

Email: valeriibraslavskii963@mail.ru
Doctor of Pharmaceutical Sciences, Associate Professor, Associate Professor of the Department of Pharmacognosy with Botany and the Basics of Phytotherapy, Samara State Medical University Samara, Russia

References

Supplementary files