Development of quality standards and standardization of dental medicated film containing succinic acid and cethylpyridinium chloride

Full Text

В настоящее время активно ведется поиск эффективных методов лечения воспалительных процессов в тканях пародонта. Причиной развития воспалительных заболеваний пародонта является взаимодействие содержимого микробной биопленки и локального тканевого ответа на нее. В терапии данного заболевания необходимо применять лекарственные препараты, обладающие комплексным антибактериальным и антигипоксантным действием [6]. Также при лечении необходимо обеспечить максимально длительный контакт лекарственной формы с тканью пародонта. Эта проблема может быть решена путем применения в стоматологической практике пленок лекарственных, в которых действующие вещества равномерно распределены в слое биополимера.

Цель работы — обосновать и разработать требования к показателям качества пленки лекарственной, содержащей янтарную кислоту и цетилпиридиния хлорид (ЦПХ), а также провести ее стандартизацию по выбранным показателям качества.

Объектами исследования являлись разработанная авторами статьи на основе комплекса фармацевтико-технологических исследований стоматологическая пленка лекарственная (патент РФ на изобретение № 2617238 «Способ получения лекарственного средства с янтарной кислотой и цетилпиридиния хлоридом местного действия») [5].

Стандартизацию пленки лекарственной, содержащей янтарную кислоту и ЦПХ, проводили в соответствии с требованиям Государственной фармакопеи ХIV издания, согласно ОФС ОФС.1.4.10001.15 «Лекарственные формы», содержащей общие требования к изготовлению, показателям и методам оценки качества лекарственных препаратов и ОФС.1.4.1.0034.18 «Пленки», в которой приведены особенности технологии и перечень характерных испытаний для данной лекарственной формы [1].

Определены характерные испытания, по которым необходимо производить стандартизацию данной лекарственной формы, такие как описание, размеры, однородность массы, растворение, потеря в массе при высушивании, рН, однородность дозирования, микробиологическая чистота и др. [1–4]. Разработаны требования к показателям качества пленки лекарственной с янтарной кислотой и ЦПХ (табл. 1).

 

Таблица 1 / Table 1

Спецификация

Specifications

Показатель	Метод контроля	Норма
Описание	Визуальный	Однородные, эластичные, бесцветные, прозрачные пластины со слабым характерным запахом
Размер	Инструментальный	Прямоугольные пластины 1,0 × 2,0 ± 0,02 см, толщина 0,28 ± 0,02 см
Подлинность: – янтарная кислота – ЦПХ	1. «Спектрометрия в инфракрасной области» ОФС 1.2.1.1.0002.15, ГФ ХIV изд. 2. «Тонкослойная хроматография» ОФС 1.2.1.2.0003.15, ГФ ХIV изд. 3. «ВЭЖХ», ОФС 1.2.1.2.0003.15, ГФ ХIV изд.	Совпадение полос поглощения рисунку спектра, принятого в качестве стандартного: – на хроматограмме пятно красного цвета на уровне РСО янтарной кислоты; – на хроматограмме пятно оранжевого цвета на уровне РСО ЦПХ. Совпадение времен удерживания янтарной кислоты и ЦПХ на хроматограммах образцов из лекарственных пленок со временем удерживания РСО янтарной кислоты и ЦПХ соответственно
Однородность массы	ОФС.1.4.2.0009.15 «Однородность массы дозированных лекарственных форм», ГФ ХIV изд.	Допустимое отклонение по массе не более ±7,5 %
Растворение	ОФС.1.4.2.0014.15 «Растворение для твердых лекарственных форм», ГФ ХIV изд.	Для каждой испытуемой единицы не менее 75 ± 5 % от заявленного содержания янтарной кислоты и ЦПХ
Потеря в массе при высушивании	ОФС.1.2.1.0010.15 «Потеря в массе при высушивании», ГФ ХIV изд., способ 1	Не более 6 %
рН	Потенциометрический ОФС.1.2.1.0004.15 «Ионометрия», метод 3, ГФ ХIV изд.	6,8–7,2
Однородность дозирования	ОФС.1.4.2.0008.18 «Однородность дозирования», ГФ ХIV изд., способ 1	Первый показатель приемлемости (%) ≤15 %
Количественное определение	ОФС.1.2.1.2.0005.15 «Высокоэффективная жидкостная хроматография», ГФ ХIV изд.	– Содержание янтарной кислоты не менее 90 % и не более 110 % от заявленного количества (от 2,25 мг до 2,75 мг); – содержание ЦПХ не менее 85 % и не более 115 % от заявленного количества (от 0,85 мг до 1,15 мг)
Микробиологи-ческая чистота	ОФС 1.2.4.0002.18 «Микробиологическая чистота», ГФ ХIV изд., категория 2	Общее число аэробных микроорганизмов не более 102 КОЕ в 1 г препарата, общее число дрожжевых и плесневых грибов не более 101 КОЕ в 1 г препарата, отсутствие Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus в 1 г препарата
Упаковка	– По 10 штук в безъячейковый блистер (бумага с ламинатным покрытием); – по 3 блистера в пачке вместе с инструкцией по применению помещают в картонную коробку (в соответствии с требованиями ОФС 1.1.0025.18 «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств», ГФ ХIV изд.)
Маркировка	В соответствии с требованиями ОФС 1.1.0025.18 «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств», ГФ ХIV изд.
Хранение	В сухом защищенном от света месте при температуре не выше +15 °С
Срок годности	2 года
Состав на 1 пленку лекарственную: Янтарной кислоты — 0,0025 г; цетилпиридиния хлорида (1-гексадецил-пиридиний хлорида моногидрата) — 0,001 г; желатина — 0,04 г; глицерина — 0,04 г; раствор натрия гидрокарбоната 1 % — 0,4 г; воды очищенной — 0,4 г

 

Для определения подлинности пленок лекарственных снимали инфракрасный (ИК) спектр в автоматическом режиме в области 4000–500 см^–1. Для этого около 20 мг пленки лекарственной растирали с субстанцией калия бромида. Полосы поглощения в спектре испытуемого образца должны совпадать по положению и интенсивности полосам поглощения в спектре стандартного образца пленки лекарственной, представленного на рис. 1.

 

Рис. 1. ИК-спектр лекарственной пленки с янтарной кислотой и цетилпиридиния хлоридом

Fig. 1. IR spectrum of a medicated film with succinic acid and cetylpyridinium chloride

 

На представленном спектре полосы с частотами около 2920 и 2851 см^–1 соответствуют валентным колебаниям связи С—Н метиленовой и метильной групп, полосы с частотами около 1471, 1387 и 720 см^–1 соответствуют деформационным колебаниям связи С—Н, что указывает на наличие насыщенных атомов углерода, и это характерно для ИК-спектра субстанции ЦПХ и янтарной кислоты. Также в спектре имеются полосы с частотами около 3040, 1487, 1220 см^–1, характерные для валентных колебаний связи С—Н пиридинового цикла субстанции ЦПХ. В ИК-спектре имеется интенсивная полоса 1700 см^–1 и полосы с частотами около 1420, 2650 и 2540, которые указывают на наличие карбонильной группы в молекуле янтарной кислоты.

Для оценки качества пленок лекарственных в условиях испытаний «Подлинность», «Однородность дозирования» и «Количественное определение» был использован метод ВЭЖХ.

Подлинность янтарной кислоты и ЦПХ оценивали по времени удерживания на хроматограмме извлечения пленки лекарственной (рис. 2). Время удерживания янтарной кислоты и ЦПХ составляет соответственно 7,08 ± 0,11 и 2,5 ± 0,05 мин и соответствует времени удерживания стандартного образца янтарной кислоты и ЦПХ.

Количественную оценку содержания янтарной кислоты и ЦПХ в пленке лекарственной проводили методом ВЭЖХ с использованием стандартных образцов соответствующих действующих веществ, содержащихся в пленке. Статистическую обработку полученных результатов проводили в соответствии с требованиями ОФС 1.1.0013.15 «Статистическая обработка результатов химического эксперимента», выборка составляла 6 единиц пленок лекарственных. Результаты оценки количественного содержания янтарной кислоты и ЦПХ в лекарственной форме приведены в табл. 2.

 

Рис. 2. Хроматограмма раствора пленки лекарственной, содержащей янтарную кислоту и цетилпиридиния хлорид

Fig. 2. Chromatogram of the solution of the medicated film containing succinic acid and cetylpyridinium chloride

 

Таблица 2 / Table 2

Метрологические характеристики методики количественного определения содержания янтарной кислоты и ЦПХ

Metrological characteristics of the method of quantitative determination of succinic acid and Cetylpyridinium chloride

Вещество	μ, мг	f	x, мг	S2	S	Sσ, %	P, %	T (P, f)	∆x	x ± ∆x	E, %
Янтарная кислота	2,5	5	2,48	0,00176	0,042	0,69	95	2,57	0,04	2,48 ± 0,04	1,61
Цетилпиридиния хлорид	1,000	5	1,01	0,0004	0,02	0,82	95	2,57	0,02	1,01 ± 0,02	1,98

 

Относительное стандартное отклонение и относительная погрешность среднего результата количественного определения янтарной кислоты и ЦПХ не превышает 2 %, что соответствует валидационным критериям [5, 6]. Содержание янтарной кислоты в пленках лекарственных составляет 2,48 ± 0,04 мг (норма — от 2,25 до 2,75 мг), ЦПХ — 1,00 ± 0,02 мг (норма — от 0,85 до 1,15 мг) в пересчете на среднюю массу пленки, что также соответствует требованиям к данному показателю качества пленки лекарственной.

Валидационную оценку методики проводили согласно требованиям ОФС.1.1.0012.15 «Валидация аналитических методик» по параметрам: специфичность, линейность, аналитическая область, правильность и прецизионность [2]. Было установлено, что методика линейна в диапазоне концентраций от 0,02 до 0,06 мг/мл для ЦПХ, для янтарной кислоты — от 0,05 до 0,15 мг/мл, коэффициент корреляции приближается к 1.

Однородность дозирования янтарной кислоты и ЦПХ по единичным пленкам проводили в соответствии с требованиями ОФС.1.4.2.0008.18 «Однородность дозирования», способ 1. В каждой из 10 отобранных единиц пленок определяли содержание янтарной кислоты и ЦПХ методом ВЭЖХ. Содержание действующих веществ выражали в процентах от номинального значения, определяли соответственно найденной величине X эталонное значение дозы (М) и рассчитывали значения первого (АV, %) показателя приемлемости результатов испытания на «Однородность дозирования». Результаты определения однородности дозирования приведены в табл. 3.

 

Таблица 3 / Table 3

Оценка однородности дозирования янтарной кислоты и цетилпиридиния хлорида в пленках

Evaluation of the uniformity of dosage of succinic acid and CPC in mediated films

Масса ПЛ, г	Найдено янтарной кислоты, Хi, %	Метрологические параметры	Найдено цетилпиридиния хлорида, Хi, %	Метрологические параметры
Хср = 0,0794 ± 0,007	Хср = 99,2 ± 0,41 %	S = 0,55 при 98,5 % ≤ Xср ≤ 101,5 % М = Xcр K = 2,4 (n = 10) AV = ±1,3 %	Хср = 106,8 ± 0,37 %	S = 0,67 при X > 101,5 % М = 101,5 % K = 2,4 (n = 10) AV = ±6,9 %

 

Первый показатель приемлемости (AV, %) для янтарной кислоты равен ±1,3 %, для ЦПХ ±6,9 %, что удовлетворяет требованиям ОФС «Однородность дозирования» (не более ±15 %), и это свидетельствует о надлежащей однородности дозирования действующих веществ в анализируемой лекарственной форме.

Обоснован перечень показателей качества, а также методов их определения и критерии приемлемости показателей качества стоматологической пленки лекарственной, содержащей янтарную кислоту и ЦПХ, установлены сроки годности данной лекарственной формы. Проведена стандартизация модельных образцов пленок лекарственных с янтарной кислотой и ЦПХ.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

About the authors

Nataliya N. Nozhkina

South-Ural State Medical University

Author for correspondence.
Email: nozhkina.natalya@mail.ru

Senior Lecturer, Department of Pharmacy and Chemistry, Pharmaceutical Faculty

Russian Federation, Chelyabinsk

Elena V. Simonyan

South-Ural State Medical University

Email: elenasimonian@yandex.ru

Candidate of Pharmaceutical Sciences, Associate Professor, Head of the Department of Pharmacy and Chemistry, Pharmaceutical Faculty

Russian Federation, Chelyabinsk

Anton I. Sinitsky

South-Ural State Medical University

Email: sinitskiyai@yandex.ru

Doctor of Medical Sciences, Associate Professor, Head of the Department of Biochemistry named after R.I. Lifshits

Russian Federation, Chelyabinsk

References

Supplementary files