CLINICAL AND LABORATORY CHARACTERISTICS OF PATIENTS WITH HBEAG-NEGATIVE CHRONIC HEPATITIS B WITH DIFFERENT LEVELS OF VIRAL LOAD IN THE SERUM

Full Text

В настоящее время хронический вирусный гепатит В остаётся одной из основных проблем инфектологии. Высокий уровень инфицированности ВГВ (2 млрд человек в мире, из них более 400 млн в стадии хронического гепатита), тяжесть исходов (цирроз печени, ГЦК), недостаточная эффективность и высокая стоимость противовирусной терапии определяют медицинскую и социальную значимость этой инфекции [7, 8, 9]. Особое значение имеет группа пациентов HBeAg-негативным ХГВ, как самая многочисленная среди всех инфицированных ВГВ в России и наиболее сложная для этиотропного лечения [2]. Одной из причин неудачи противовирусной терапии у больных ХГВ является существующая исходно и усугубляемая или приобретаемая пациентом в процессе длительно существующего инфекционного процесса дисфункция системы цитокиновой регуляции, с формированием впоследствии структурно-морфологического дисбаланса всей системы иммунореактивности [1, 3, 4]. Изучение клинико-лабораторных особенностей, включая систему цитокинов, у больных в разных стадиях инфекционного процесса ХГВ: стадии иммунного контроля и иммунной толерантности - является актуальной задачей. Цель исследования: дать клинико-лабораторную, включая иммунологическую (IL-2, INF-α, INF-γ), характеристику больным HBeAg-негативным хроническим гепатитом В с разным уровнем вирусной нагрузки в сыворотке крови. Материалы и методы исследования Под наблюдением в Самарском областном гепатологическом центре Клиник СамГМУ находились больные ХГВ (n=336) в фазе репликации вируса (ДНК НBV+), с генотипом Д в 78% случаев. Диагноз хронического гепатита В был верифицирован на основании клинико-эпидемиологических, биохимических, серологических и молекулярно-биологических данных [5]. Определение вируса гепатита В (качественно и количественно) проводилось методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с помощью набора реагентов «РеалБест ДНК ВГВ» (ЗАО «Вектор Бест», г. Новосибирск). Содержание цитокинов в плазме определялось с помощью наборов реагентов ЗАО «Вектор-бест», основным компонентом которых являются моноклональные антитела к изучаемым интерлейкинам и интерферонам, сорбированные на поверхности лунок полистирольного планшета или набором реагентов ProCon для изучения состояния параметров IL-2, IFN-α, IFN-γ. Для статистической обработки использовались методы статистического анализа с применением пакета прикладных программ Statistica 8.0 для Windows [6]. Результаты Среди больных вирусным гепатитом, наблюдаемых в Самарском областном гепатологическом центре на базе клиники инфекционных болезней СамГМУ, была выделена группа пациентов (n=132) с НВeАg-негативным ХГВ, генотипа Д (100 %), с относительно недавним заражением (менее 10 лет). Это были больные в возрасте 22-54 лет, преимущественно женщины (56%). При их первичном обращении регистрировались следующие жалобы: все пациенты (100%) отмечали повышенную утомляемость (слабость, снижение трудоспособности), а также головную боль (87,3%), тяжесть (97,3%) и боли в правом подреберье (57,2%), снижение аппетита (97,3%), боли в эпигастрии (44,5%), тошноту (57,3%), метеоризм (70,9%), дискомфорт в животе (90,9%), кожный зуд (5,4%). При объективном обследовании пациентов выявлено: увеличение печени и изменение её плотности (81%), увеличение селезёнки (8,2%), наличие геморрагического синдрома (17,21%), внепечёночные знаки поражения печени (22%). При проведении количественного анализа ДНК HBV в сыворотке крови методом ПЦР вирусная нагрузка более 20.000 МЕ\мл была регистрирована в 75% случаев, в остальных - ниже 20.000 МЕ\мл (таблица 1). Эти пациенты составили две группы сравнения. В качестве группы контроля исследовалась кровь здоровых доноров n=50. Таблица 1 Характеристика групп больных НВеAg-негативным ХГВ по уровню вирусной нагрузки Группа Значение вирусной нагрузки Количество больных, n=132 Абс. % 1 Свыше 20.000 МЕ\мл 99 75 2 Менее 20.000МЕ\мл 35 25 В результате клинического обследования у больных НВеAg-негативным ХГВ в 1 группе (с более высокой вирусной нагрузкой) были выявлены следующие синдромы: у 93,9% - астеновегетативный синдром (повышенная утомляемость, раздражительность, расстройство сна, снижение работоспособности и общая слабость, недомогание, неустойчивость настроения, головная боль), у 91,9% - диспепсический синдром (снижение аппетита, неприятные ощущения в животе, тошнота, метеоризм, отрыжка, а у отдельных больных рвота). У 92,9% отмечалась тяжесть и/или боль в эпигастрии и/или в правом подреберье (синдром правого подреберья), имевшая преимущественно тупой, ноющий характер. Гепатомегалия регистрировалась у 72,2% пациентов данной группы, увеличение печени сопровождалось уплотнением её консистенции и умеренной болезненностью при пальпации. Астеновегетативный синдром и гепатомегалия у пациентов 2 группы сравнения наблюдались в 34,3% и 22,8% случаев соответственно, что значимо отличалось от результатов в 1 группе, p0,001 (рис. 1). Из данных гистограммы видно, что частота встречаемости ведущих синдромов максимально выражена в 1 группе больных. При исследовании биохимических показателей были получены следующие данные (таблица 2). Содержание АлАТ в сыворотке крови в 1-ой группе больных, имеющих более высокую вирусную нагрузку, составило 96,93±7,93 ед/л, что было выше показателей 2-ой группы больных (27,00±0,62 ед/л) и здоровых доноров (16,06±0,57), (p0,001). В свою очередь, при более низкой вирусной нагрузке этот показатель оставался в пределах референсных значений. Такая же тенденция была зафиксирована по значениям АСАТ, которые в группе пациентов с более высокой вирусной нагрузкой были выше и составили в среднем 70,23±5,40ед\л. Содержание щелочной фосфатазы и гамма-глутаминтранспептидазы у больных 1-ой группы было повышенным более значимо, чем во 2-й группе пациентов: щелочная фосфатаза (140,50±4,96 ед\л 122,84±2,93 ед\л, соответственно); гамма-глутаминтранспептидаза (69,78±3,98; 21,97±0,85 ед\л, соответственно). Эти показатели по сравнению с группой контроля были выше в обеих группах. Содержание IL-2 в сыворотке крови в 1-ой группе больных, имеющих более высокую вирусную нагрузку, составило 6,86±1,17 пг\мл и было значительно ниже показателей 2-ой группы больных (19,77±0,29 пг\мл) и здоровых доноров (19,85±0,23 пг\мл), (p0,001). В свою очередь, при более низкой вирусной нагрузке этот показатель оставался в пределах референсных значений. При исследовании уровня INF-α наблюдалась такая же тенденция. У больных с высоким уровнем вирусной нагрузки показатель INF-α был значительно снижен. При изучении показателей уровня INF-γ было зафиксировано снижение его значений в 1-ой группе (36,50±5,10 пг\мл) и незначительный подъём (100,42±2,21 пг\мл) - во 2-ой группе пациентов, p0,001. Таким образом, выявленные изменения содержания в сыворотке крови INF-γ у больных НВе-Аg-негативным ХГВ в группах сравнения отличались от зафиксированных тенденций уровня ИЛ-2, INF-α. Кроме того, была обнаружена связь между изменениями уровня ИЛ-2, INF-α и степенью биохимической активности процесса. Так, у больных во 2-ой группе пациентов, у которых регистрировались нормальные значения цитолитической активности (АлТ-27,00±0,62 Ед\мл), уровень ИЛ-2 составил 19,77±0,29 пг\мл, INF-α - 40,10±0,64 пг\мл, они не отличались от здоровых доноров. У пациентов 1-ой группы при высоких значениях АлАТ (96,93±7,93Ед\мл) - ИЛ-2 и INF-α были снижены до 6,86±1,17 и 26,99±1,17 соответственно, р0,001. Выводы Больные НВе-Аg-гегативным ХГВ с более высокой вирусной нагрузкой характеризуются более выраженными клиническими проявлениями (астеновегетативный и гепатомегалия, р0,001). При изучении уровня биохимических показателей в группе с наиболее высокой вирусной нагрузкой наблюдалось значимое повышение уровня общего билирубина, АлАТ, АСАТ, ГГТП, в сопоставлении как с группой сравнения, так и с группой контроля. Изменения отдельных показателей цитокинового статуса (IL-2, INF-α, INF-γ) при первичном обследовании больных имели различия в зависимости от уровня вирусной нагрузки в сыворотке крови. При более высоком уровне вируса наблюдалось значимое снижение значений ИЛ-2, INF-α, INF-γ. Низкий уровень цитокинов ИЛ-2, INF-α, INF-γ у больных HBeAg-негативным ХГВ с высокой вирусной нагрузкой можно объяснить следствием негативного влияния на иммунную систему длительной персистенции НВV.

About the authors

E A ZAYCEVA

Samara State Medical University

Email: ekasokova@mail.ru

References

Supplementary files