The role of endogenous pigmentation parameters in treatment and rehabilitation of patients with superficial spreading melanoma

Full Text

ОБОСНОВАНИЕ

Многочисленные публикации, посвящённые изучению кожных меланом, и данные обширных эпидемиологических исследований убедительно свидетельствуют о неослабевающем интересе к данной проблеме [1, 2]. Следует констатировать, что разработка новых методов и технологий ранней диагностики, лечения и реабилитации меланом кожи и других локаций была, есть и, вероятно, какое-то время ещё будет оставаться «топовой» темой для специалистов различных медицинских специальностей ― онкологов, дерматологов, хирургов, клинических патологов.

Меланома кожи относится к опухолям, в которых процесс инициации и развития новообразования за редким исключением сопряжён с реализацией эндогенных пигментаций в её морфологическом субстрате [3], а предикторы меланина тирозин, триптофан и фенилаланин имеют статистически значимые различия при смене фаз роста опухоли [4]. R.M. Slominski и соавт. [5] связывают содержание гранул меланина в пигментных меланомах с более низкой метастатической активностью неопластических клеток и, соответственно, лучшим прогнозом у таких пациентов. Отражением стадии опухолевого процесса является и формирование атипичного вертикального вектора миграции пигментов по мере прогрессирования меланомы в фазе вертикального роста, что коррелирует со стадированием по Кларку (Clark) [6]. Повышение содержания гемоглобиногенных пигментов в опухолевой ткани определяется несовершенным ангиогенезом и ангиоархитектоникой опухоли, а также вторичными изменениями, играющими немаловажную роль в опухолевой прогрессии [4].

Несмотря на впечатляющие достижения в части ранней и эффективной диагностики меланом в результате использования прецизионных методов иммуногистохимического и молекулярно-генетического исследования, таргетной и иммунотерапии этих опухолей [7], всё ещё остаются неудовлетворёнными потребности медицинского сообщества в части физической и медицинской реабилитации лиц, страдающих меланомами кожи и прочих локаций [8].

Цель исследования ― оценить значение показателей мультиплексного анализа компонентов эндогенных пигментаций морфологического субстрата поверхностных меланом кожи для оценки перспектив их использования в реализации комплекса реабилитационных мероприятий у пациентов с поверхностными меланомами кожи.

МЕТОДЫ

Дизайн исследования

Проведено сравнительное проспективное морфологическое (патогистологическое, иммуногистохимическое, ультраструктурное) и спектроскопическое исследование 128 образцов кожи пациентов с поверхностно распространяющимися меланомами кожи, удалёнными во время радикального хирургического иссечения и направленными в установленном порядке для проведения патогистологического исследования в соответствии с приказом Минздрава России № 179н от 24.03.2016¹.

В процессе патогистологического исследования все наблюдения были распределены на две группы. В первой группе (n=83) преобладала фаза радиального (горизонтального) роста опухоли по радиусам несовершенного круга с приобретением в ряде случаев признаков педжетоидной меланомы; во второй группе (n=45) ― фаза вертикального распространения новообразования с сохранением отдельных прерогатив (векторы несовершенного круга) фазы радиального роста. Контрольная группа (n=10) включала образцы кожи лиц (секционный материал) с отсутствием каких бы то ни было проявлений кожной патологии в анамнезе и на момент наступления летального исхода.

Критерии соответствия

Критерии включения: диагноз поверхностно распространяющейся меланомы кожи, подтверждённый патогистологически и иммуногистохимически; возраст старше 18 лет.

Критерии невключения: наличие регионарных и отдалённых метастазов; сопутствующие заболевания, осложнённые развитием сердечно-сосудистой, печёночной, почечной недостаточности и кахексией.

Условия проведения

Исследование проведено на базах кафедры патологической анатомии и судебной медицины Тюменского государственного медицинского университета, патологоанатомического бюро Тюменской области и патологоанатомического отделения Московского многопрофильного клинического центра «Коммунарка».

Продолжительность исследования

Исследование проведено в период с августа 2023 по ноябрь 2024 года.

Методы регистрации исходов

Образцы кожи фиксировали в течение 24–48 часов в 10% растворе нейтрального формалина на фосфатном буфере (pH 7,4). После фиксации гистологическую проводку биологических образцов выполняли по стандартной методике в автоматическом режиме с использованием гистологического процессора Pathos Delta (Milestone, Италия). Последующую заливку в парафин выполняли с помощью прибора Leica HistoCore (Leica, Германия). Для приготовления серийных срезов толщиной 3–4 мкм использовали ротационный микротом Thermo Fisher Scientific HM 325 (Thermo Fisher Scientific, США). Полученные срезы окрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по ван Гизону, Маллори; выявляли меланин серебрением по Фонтана–Массону. Для трансмиссионной электронной микроскопии использовали образцы кожи, полученные в течение 20–30 минут после операции радикального хирургического иссечения опухоли, содержащие её морфологический субстрат, а также участок кожи, граничащий с опухолью, и образец визуально неизменённой кожи объёмом 1,5–2,0 мм³. Образцы кожи фиксировали в 2,5% растворе глутарового альдегида на фосфатном буфере (pH 7,4), дофиксировали в 1% растворе тетраоксида осмия (OsO₄). Материал обезвоживали в спиртах восходящей концентрации (от 50° до 96°), контрастировали 1% уранилацетатом, заливали в смесь эпон-аралдит. Полутонкие срезы окрашивали метиленовым синим, а ультратонкие ― цитратом свинца. Визуализацию структуры тканей в ультратонких срезах проводили с использованием сканирующего электронного микроскопа Zeiss EVO LS10 (Zeiss, Германия) с установленным детектором для трансмиссионной микроскопии (STEM); спектроскопическое исследование биообъекта — с использованием спектрометра «ИнСпектр М», вариант исполнения М-532 (РУ от 18.06.2021 № РЗН 2015/2419, производитель ООО «РамМикс», Россия), состоящего из оптического микроскопа Olympus CX41 и блока спектрометра с длиной волны возбуждающего излучения 532 нм. Диаметр лазерного пятна в фокусе составлял 10 мкм, мощность лазерного излучения ― 10 мВт. Управление прибором, регистрацию и запись спектров производили с помощью специальной компьютерной программы «ИнСпектр», также разработанной сотрудниками ООО «РамМикс» (Россия). Программа осуществляла идентификацию химических веществ и регистрировала изменения их количественного и качественного состава в изучаемом биологическом объекте по спектрам, сочетающим сигнал рамановского рассеяния и флюоресценции. Выявленные в ходе исследования спектры биологических молекул относили к соответствующему классу веществ и отражали их как отдельные столбцы, или поля базы данных, а факт их детекции или отсутствия ― в виде бинарного признака («Да»/«Нет»). С помощью рамановской спектроскопии учитывали компоненты-аналиты, относящиеся к гемоглобиногенным (порфирин), липидогенным (каротиноиды) пигментам и прекурсорам представителя тирозин-триптофановых (протеиногенных) пигментов меланина (тирозин, триптофан, фенилаланин).

Статистический анализ

Для наполнения базы данных и последующей статистической обработки использовали специализированное программное обеспечение R-4.3.0 (The R Foundation, Вена, Австрия), RStudio Desktop (Version 2023.06.1, RStudio Inc., США). Использовали методы описательной статистики, при этом результаты исследования для качественных (категориальных) переменных представляли в виде процентных долей, для количественных ― в виде средних арифметических. Использовали критерий χ² Пирсона c поправкой на множественные сравнения, используемую для управления уровнем ложноположительных результатов (ошибок первого рода) в случае нескольких парных сравнений между группами, точный критерий Фишера. Оценку влияния факторных признаков на результативные производили методом логистической регрессии. Чувствительность и специфичность оценивали при помощи ROC-анализа. Для оценки качества модели рассчитывали показатель AUC (area under ROC curve ― площадь под ROC-кривой). Учитывая, что в исследовании присутствовали несколько независимых переменных, то их отбор выполняли при помощи пошаговой регрессии с использованием критерия информационной сложности Акаике (Akaike information criterion, AIC), идея которого заключается в том, чтобы найти модель, которая наилучшим образом подходит для исследуемых данных, используя минимальное количество параметров. Различия между группами считали статистически значимыми при р <0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Объекты (участники) исследования

Исследовано 128 образцов кожи пациентов в возрасте от 18 до 95 лет, из них 49 (38,3%) мужчин и 79 (61,7%) женщин, с поверхностно распространяющимися меланомами кожи, удалёнными во время радикального хирургического иссечения и направленными в установленном порядке для проведения патогистологического исследования.

Основные результаты исследования

В 83 наблюдениях, в которых в качестве доминирующей была определена фаза радиального (горизонтального) роста опухоли, отмечали наличие как минимум 4 из 6 признаков, определённых в качестве её критериев. Макроскопически опухоль, как правило, имела вид пятна-макулы размером от 2,1 до 20,0 мм, характеризовавшегося неравномерностью границ новообразования и распределением пигмента, цветовым разнообразием, отсутствием выраженной асимметрии и проявлениями реализовавшихся вторичных изменений (рис. 1, а). Как правило, подобные наблюдения в большинстве случаев имели довольно типичную патогистологическую картину поверхностно распространяющейся педжетоидной пигментной меланомы без изъязвления (см. рис. 1, b). На фоне преобладания паренхиматозных и мезенхимальных локаций меланина ультраструктурно были идентифицированы также скопления порфиринов и каротиноидов (см. рис. 1, c). В большинстве наблюдений, в которых была идентифицирована фаза вертикального роста, наблюдали превалирующий над образцами первой группы полиморфизм патогистологических признаков. Уровень инвазии новообразования по Clark превышал второй; число отдельных атипичных меланоцитов (см. рис. 1, d) и количество формируемых ими комплексов в дерме преобладали над интраэпидермальными; показатели митотической активности превышали таковые в группе с радиальной фазой роста опухоли; в большей части наблюдений идентифицировано от 4 и более митозов в 1 мм² площади опухоли.

 

Рис. 1. Поверхностно распространяющаяся меланома кожи голени: а ― неравномерность границ новообразования и распределения пигмента; цветовое разнообразие; отсутствие выраженной асимметрии и возвышения; многочисленные глобулы, локализованные на периферии опухолевого узла (реальный размер фото); b ― поверхностно распространяющаяся педжетоидная пигментная меланома кожи (окраска гематоксилином и эозином, ×200); c ― вакуолизация цитоплазмы каротиноцитов базального слоя эпидермиса, разволокнение и деструкция базальной мембраны эпидермиса; каротиноиды (1) и порфирины (2) в участках дермато-эпидермального соединения, коллагеновые волокна (3); d ― атипичные меланоциты (1) с выраженным полиморфизмом и гетерогенностью меланосом, расположенные в строме растущей опухоли (трансмиссионная электронная микроскопия, ×15 000).

Fig. 1. Superficial spreading melanoma of the lower leg. а, Uneven borders of the lesion and pigment distribution; color diversity; no significant asymmetry and elevation; multiple globules on the periphery of the tumor nodule (actual size photo). b, Superficial spreading pagetoid pigmented melanoma of the skin (H&E staining, ×200). c, Vacuolation of the cytoplasm of the basal layer of carotenocytes in the epidermis; fraying and destruction of the basement membrane of the epidermis; carotenoids (1) and porphyrins (2) at the dermal-epidermal junction; collagen fibers (3). d, Atypical melanocytes (1) with significant polymorphism and heterogeneity of melanosomes located in the stroma of a growing tumor (transmission electron microscopy, ×15,000).

 

Изменение качественного состояния новообразования, обусловленного его переходом из радиальной в вертикальную стадию роста, сопровождалось уменьшением инициальной флюоресценции, а также частоты выявления компонентов-аналитов эндогенных пигментаций в наблюдениях, входящих во вторую (стадия вертикального роста) группу (рис. 2). Так, по сравнению с первой группой (стадия радиального роста) частота выявления прекурсора меланина тирозина снизилась с 86,9% до 64%, триптофана ― с 91,3% до 64%, фенилаланина ― с 82,6% до 40%. Качественный состав пигментных компонентов-аналитов практически не отличался от обнаруженных на спектрах образцов опухоли, находящейся в фазе радиального роста, и представлял собой комплекс прекурсоров тирозин-триптофановых хромопротеидов и эндогенных пигментов других классов хромопротеидов, идентифицируемых на фоне реализации вторичных изменений, наблюдаемых в опухоли. Спектры исследуемых образцов характеризовались наличием рамановских пиков аналитов-прекурсоров пигментных тирозин-триптофановых хромопротеидов.

 

Рис. 2. Сравнительная спектроскопическая характеристика аналитов поверхностно распространяющейся меланомы кожи в фазы радиального и вертикального роста: а ― спектр образца кожи поверхностно распространяющейся меланомы (фаза радиального роста); высокие значения инициальной флуоресценции и распределение интенсивности молекулярных колебаний фенилаланина, тирозина, порфиринов и каротиноидов; b ― спектр образца кожи поверхностно распространяющейся меланомы (фаза вертикального роста); низкие значения инициальной флюоресценции и распределение интенсивности молекулярных колебаний фенилаланина, тирозина, триптофана и жирных кислот.

Fig. 2. Comparative spectroscopic characteristics of superficial spreading melanoma samples in the radial and vertical growth phases. а, Spectrum of a superficial spreading melanoma sample in the radial growth phase: high initial fluorescence and an intensity profile of molecular vibrations from phenylalanine, tyrosine, porphyrins, and carotenoids. b, Spectrum of a superficial spreading melanoma sample in the vertical growth phase: low initial fluorescence and an intensity profile of molecular vibrations from phenylalanine, tyrosine, tryptophan, and fatty acids.

 

Для проверки гипотезы о наличии статистической связи между несколькими переменными, которыми являлись фазы-стадии роста опухоли и компоненты-аналиты эндогенных пигментаций в её субстрате, была использована бинарная логистическая регрессия. Полученные результаты продемонстрировали статистическую значимость модели и каждого из предикторов, что указывало на высокую достоверность выявленных зависимостей. В частности, согласно данным, представленным в табл. 1, значимые предикторы включали тирозин (p=0,01554), триптофан (p=0,00769) и фенилаланин (p=0,01753).

 

Таблица 1. Результаты расчёта коэффициентов, включённых в модель бинарной логистической регрессии

Table 1. Calculated coefficients for the binary logistic regression model

Коэффициенты	Оценка	Стандартная ошибка	p
Intercept (свободный член)	1,3934	0,5923	0,01865*
Тирозин	-1,1103	0,4589	0,01554*
Триптофан	-1,2208	0,4580	0,00769*
Фенилаланин	-1,0596	0,4461	0,01753*

Примечание. * ― статистически значимые предикторы фазы роста меланомы.

Note: *, statistically significant predictors of the melanoma growth phase.

 

ОБСУЖДЕНИЕ

Меланома кожи, являясь одним из самых агрессивных злокачественных новообразований, требует комплексного подхода к диагностике, терапии, реабилитации и последующему наблюдению пациента: понимание этих взаимосвязей имеет критическое значение для оптимизации лечения. Реабилитационные мероприятия направлены на поддержание трудоспособности, физического и эмоционального состояния пациента как в период лечения, так и период ремиссии [9]. Комплекс реабилитационных мероприятий должен осуществляться с участием мультидисциплинарной команды специалистов, что позволяет повысить качество жизни пациентов [9]. Наиболее эффективными являются ранние реабилитационные мероприятия, начатые с момента постановки диагноза [10].

Реабилитация пациентов в каждом конкретном случае определяется объёмом вмешательств, которые проводятся на той или иной стадии заболевания и могут ограничиваться как радикальным иссечением первичной опухоли на ранних стадиях, так и включать комплексное лечение с использованием химио- и лучевой терапии в дополнение к хирургическому вмешательству. В данном случае критически важным является определение стадии и прогноза заболевания, что определяется биологическим потенциалом опухолевых клеток и опухолевого микроокружения.

Одной из важных характеристик меланомы является содержание в её ткани эндогенных пигментов, количественная характеристика которых в опухоли может быть предиктором агрессивного инвазивного роста и метастазирования. Самым прогностически значимым пигментом является непосредственно меланин или его прекурсоры (тирозин, триптофан, фенилаланин), накапливающиеся в опухолевых клетках и прилежащих кератиноцитах в фазу радиального роста и резко уменьшающиеся в фазу вертикального роста [4]. В этой связи необходимо уделить должное внимание диагностике амеланотических и гипомеланотических опухолей, так как их злокачественный потенциал оказывается выше, чем у пигментных образований, и зачастую такие опухоли диагностируются на более поздней стадии и обычно бывают ассоциированы с более низкой выживаемостью пациентов, что сопряжено с необходимостью использования большего комплекса лечебно-восстановительных мероприятий [11]. Поздняя диагностика амеланотических меланом связана ещё и с тем, что они не имеют чётких дерматоскопических признаков, на которых были бы основаны алгоритмы диагностики их пигментных антиподов [11].

Накопление порфиринов и гемосидерина ассоциировано с вертикальной фазой роста меланомы и обусловлено несовершенным ангиогенезом и гистоархитектоникой опухоли. Исследование гемоглобиновых пигментов, включая порфирины и гемосидерин, способствует более детальному пониманию ангиогенеза, который во многом обусловливает прогрессирование и метастазирование первичной опухоли, а также является основой для разработки таргетных препаратов, блокирующих кровоснабжение опухолевой ткани [4, 12]. Способность к формированию сосудистых каналов опухолевыми клетками кожной меланомы независимо от опухолевого ангиогенеза и участия эндотелиальных клеток получила название «васкулогенной мимикрии». Такая особенность опухолевых клеток встречается у клеток высокоагрессивных меланом в фазе вертикального роста и в метастатических опухолевых узлах кожных меланом [12]. Возможная связь «васкулогенной мимикрии» с накоплением гемоглобиновых пигментов в ткани меланомы способствует пониманию молекулярных механизмов данного явления и может в перспективе использоваться для разработки контрольных точек терапии высокоагрессивных первичных опухолей и метастатических узлов кожной меланомы [12].

Накопление гемоглобиновых пигментов является также своеобразным показателем реализующихся вторичных изменений опухоли, например некроза или изъязвления, которые являются предиктором худшего прогноза заболевания [3, 13, 14]. Эндогенными пигментами, обладающими также определённым прогностическим потенциалом, реализующимся по мере развития опухолевого процесса, являются предшественники липидогенных пигментов (липофусцин и цероид), концентрация которых в цитоплазме кератиноцитов и макрофагах снижается по мере инвазии неопластических клеток в подлежащую дерму и подкожно-жировую клетчатку [4]. Таким образом, детализация стадирования и биологического потенциала меланомы посредством определения содержания эндогенных пигментов в клетках опухоли и клетках микроокружения способствует индивидуализации хирургического и консервативного лечения в качестве дополнительного метода помимо определения таких характеристик, как уровень митотической активности и наличие характерных мутаций (BRAF, NRAS, KIT) [15–17]. Эндогенные пигменты в дальнейшем могут использоваться также как маркеры особенностей метаболома опухолевых клеток на одной и той же патоморфологической стадии меланомы, что позволит индивидуализировать подходы к терапии и реализацию различных реабилитационных модулей.

Реабилитационные мероприятия играют важную роль в комплексном лечении меланомы, способствуя улучшению качества жизни, психологического и физического состояния пациентов, их многолетней выживаемости. Всё это обусловливает необходимость дальнейшего изучения эндогенных пигментов в стадировании и определении злокачественного потенциала опухоли для использования их в клинической практике, оптимизации реабилитационных программ и интеграции в клинические протоколы профилактики, диагностики и лечения меланомы на всех стадиях заболевания.

Ограничения исследования

Ограничения, связанные с выборкой исследования. Несмотря на значительный размер выборки (n=128), не всегда были идентифицированы представители группы гемоглобиногенных пигментов (гемосидерин, порфирины), что повлияло на статистическую мощность исследования. Накопление обоих представителей данной группы пигментов, как правило, сопряжено с реализацией вторичных изменений в опухоли в виде некроза, кровоизлияний и воспаления.

Ограничения, связанные с методами измерения и оценки аналитов, использованными в исследовании. Рамановская спектроскопия является доступным и разрешённым в установленном порядке методом исследования, не требующим сложной пробоподготовки. Вместе с тем осуществление конъюнкции алгоритмов получения и интерпретации данных мультиплексного анализа морфологического субстрата опухоли с помощью данного прибора требует определённого опыта и знаний.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Использование комплексного патоморфологического и спектроскопического исследования и мультиплексный анализ полученных результатов позволили идентифицировать в образцах поверхностной меланомы кожи одновременно значительное количество статистически подтверждённых компонентов эндогенных пигментаций. Прекурсоры меланина и липидогенных пигментов имеют диагностическое и предиктивное значение в оценке инвазивной компетентности меланом, модификации диагностической и реабилитационной парадигмы меланом кожи и прочих локаций.

ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ

Вклад авторов. А.В. Борисов ― научное обоснование, методология исследования, сбор материала, патогистологическое и иммуногистохимическое исследование, написание черновика рукописи, визуализация, проверка и редактирование рукописи; М.Б. Борисенко ― обзор публикаций по теме статьи, научное обоснование, методология исследования, написание черновика рукописи, проверка и редактирование рукописи; И.А. Чернов ― дизайн и методология исследования, обеспечение материалов для исследования, проверка и редактирование рукописи; А.М. Авдалян ― осуществление контроля за проведением патогистологического и иммуногистохимического исследования, проверка и редактирование рукописи; А.В. Ронзин ― дизайн и методология исследования, обеспечение материалов для исследования, осуществление оперативного вмешательства, проверка и редактирование рукописи; А.И. Ничипоров ― обеспечение и осуществление контроля за проведением спектроскопического исследования биологических объектов, визуализация, статистическая обработка данных, написание черновика рукописи; Е.В. Лугинина ― анализ данных, проверка и редактирование рукописи; Ю.А. Кириллов ― методология исследования, научное обоснование, проверка и редактирование рукописи, руководство проектом. Все авторы одобрили рукопись (версию для публикации), а также согласились нести ответственность за все аспекты работы, гарантируя надлежащее рассмотрение и решение вопросов, связанных с точностью и добросовестностью любой её части.

Этическая экспертиза. Протокол исследования рассмотрен и одобрен комитетами по этике при ГБУЗ «Московский многопрофильный клинический центр «Коммунарка» Департамента здравоохранения г. Москвы (выписка из протокола № 6 от 08.08.2023) и ФГБОУ ВО «Тюменский государственный медицинский университет» Минздрава России (выписка из протокола № 121 от 22.05.2024). Все участники исследования подписали форму информированного добровольного согласия до включения в исследование.

Источники финансирования. Отсутствуют.

Раскрытие интересов. Авторы заявляют об отсутствии отношений, деятельности и интересов за последние три года, связанных с третьими лицами (коммерческими и некоммерческими), интересы которых могут быть затронуты содержанием статьи.

Оригинальность. При проведении исследования и создании настоящей работы авторы не использовали ранее опубликованные сведения (текст, иллюстрации, данные).

Доступ к данным. Редакционная политика в отношении совместного использования данных к настоящей работе неприменима, данные могут быть опубликованы в открытом доступе.

Генеративный искусственный интеллект. При создании настоящей статьи технологии генеративного искусственного интеллекта не использовали.

Рассмотрение и рецензирование. Настоящая работа подана в журнал в инициативном порядке и рассмотрена по обычной процедуре. В рецензировании участвовали два внешних рецензента и научный редактор издания.

ADDITIONAL INFORMATION

Author contributions: A.V. Borisov, scientific justification, research methodology, collection of material, pathohistological and immunohistochemical research, writing a draft manuscript, visualization, verification and editing of the manuscript; M.B. Borisenko, review of publications on the topic of the article, scientific justification, research methodology, writing a draft manuscript, verification and editing of the manuscript; I.A. Chernov, design and research methodology, provision of materials for research, verification and editing of the manuscript; A.M. Avdalyan, control over the conduct of pathohistological and immunohistochemical research, verification and editing of the manuscript; A.V. Ronzin, design and methodology of research, provision of materials for research, implementation of surgical intervention, verification and editing of the manuscript; A.I. Nichiporov, provision and control over the conduct of spectroscopic examination of biological objects, visualization, statistical data processing, writing a draft of the manuscript; E.V. Luginina, data analysis, verification and editing of the manuscript; Yu.A. Kirillov, research methodology, scientific justification, review and editing of the manuscript, project management. Thereby, all authors provided approval of the version to be published and agree to be accountable for all aspects of the work in ensuring that questions related to the accuracy or integrity of any part of the work are appropriately investigated and resolved.

Ethics approval: The study protocol was reviewed and approved by the ethics Committees at the Moscow Multidisciplinary Clinical Center “Kommunarka” of the Moscow Department of Health (extract from Protocol No. 6 dated 2023 Aug 08) and the Tyumen State Medical University of the Ministry of Health of the Russian Federation (extract from Protocol No. 121 dated 2024 May 22). All study participants signed a voluntary informed consent form before inclusion in the study.

Funding sources: No funding.

Disclosure of interests: The authors have no relationships, activities or interests for the last three years related with for-profit or not-for-profit third parties whose interests may be affected by the content of the article.

Statement of originality: When conducting the research and creating this work, the authors did not use previously published information (text, illustrations, data).

Data availability statement: The editorial policy regarding data sharing is not applicable to this work, the data may be published in the public domain.

Generative AI: Generative AI technologies were not used for this article creation.

Provenance and peer-review: This article was submitted to the journal on an initiative basis and reviewed according to the usual procedure. Two external reviewers and the scientific editor of the publication participated in the review.

 

¹ Приказ Министерства здравоохранения Российской Федерации от 24 марта 2016 г. N 179н «О Правилах проведения патологоанатомических исследований». (Утратил силу с 1 сентября 2025 года на основании приказа Минздрава России от 14 апреля 2025 года № 207н). Режим доступа: https://docs.cntd.ru/document/420347243?marker Дата обращения: 15.11.2025.

About the authors

Alexey V. Borisov

Tyumen State Medical University

Email: doca.77@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-6161-7456

MD, Cand. Sci. (Medicine)

Russian Federation, Tyumen

Marina B. Borisenko

Russian Scientific Center of Surgery named after academician B.V. Petrovsky

Author for correspondence.
Email: marina-borisenko-2000@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-2684-2017
SPIN-code: 6188-1236
Russian Federation, Moscow

Igor A. Chernov

Tyumen State Medical University

Email: chern_igor@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-6475-5731
SPIN-code: 4674-8531

MD, Cand. Sci. (Medicine), Assistant Professor

Russian Federation, Tyumen

Ashot M. Avdalyan

Moscow Multidisciplinary Clinical Center «Kommunarka»

Email: ashot_avdalyan@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-2229-1713
SPIN-code: 9890-8817

MD, Dr. Sci. (Medicine), Professor

Russian Federation, Moscow

Andrey V. Ronzin

Moscow Multidisciplinary Clinical Center «Kommunarka»

Email: Ronzin1977@yandex.ru
ORCID iD: 0009-0005-5723-6983

MD, Cand. Sci. (Medicine)

Russian Federation, Moscow

Andrey I. Nichiporov

Moscow Multidisciplinary Clinical Center «Kommunarka»

Email: andrei.ni4iporov@yandex.ru
ORCID iD: 0009-0006-6895-5278
SPIN-code: 6774-0532
Russian Federation, Moscow

Elena V. Luginina

Federal Research and Clinical Center of Intensive Care Medicine and Rehabilitology

Email: lugininaev@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-5580-1935
SPIN-code: 9881-8100

MD, Cand. Sci. (Medicine)

Russian Federation, Moscow

Yuri A. Kirillov

Tyumen State Medical University; Russian Scientific Center of Surgery named after academician B.V. Petrovsky; Moscow Multidisciplinary Clinical Center «Kommunarka»

Email: youri_kirillov@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-3555-0902
SPIN-code: 6514-5577

MD, Dr. Sci. (Medicine), Professor

Russian Federation, Tyumen; Moscow; Moscow

References

Supplementary files