METABOLISM AND CHEMILUMINESCENT ACTIVITY OF NEUTROPHILIC GRANULOCYTES IN PATIENTS WITH DIFFERENT SENSITIVITY TO ACETYLSALICYLIC ACID IN ACUTE CORONARY SYNDROME

Cover Page

Abstract


Objective: to study the features of the chemiluminescent state and the activity of NAD (P) -depen- dent dehydrogenases in neutrophilic granulocytes of blood in patients with different sensitivity to acetylsalicylic acid (ACA) in acute coronary syndrome (ACS).Materials and methods: The study included 53 patients with ACS. Evaluation of resistance or sensitivity to ASA was performed in vitro by incubating platelet-rich plasma with adenosine diphosphate and ASA to determine the level of aggregation. The state of respiratory explosion of neutrophils was investigated by the method of chemiluminescence. The activity of enzymes in neutrophils was studied by the bioluminescent method.Results of the study: In patients with ACS-resistant ACS, the rate of synthesis of primary and secondary active forms of oxygen was reduced, and the index of luminol-dependent activation of neutrophils was reduced. The intensity of substrate stimulation of glycolysis and oxidation of glucose by the pentose phosphate pathway is increased.Conclusion: With resistance to ASA in patients with ACS, there are abnormalities in the metabolism and functional activity of neutrophils, which is of interest in studying the intercellular relationships of thrombus formation.

Введение Неспецифическое воспаление при атероскле- розе - одна из причин разрыва покрышки ате- ромы, атеротромбоза коронарных артерий и острого коронарного синдрома (ОКС) [1]. Ней- трофильные гранулоциты являются ключевыми клетками воспаления. Они первыми мобилизу- ются в очаг некроза при инфаркте миокарда и служат основным источником свободных ради- калов, вызывающих окислительный стресс [2]. Имеются доказательства непосредственного участия нейтрофилов в повреждении миокарда при острой ишемии [3]. Воспринимая много- численные сигналы о дестабилизации внутрен- ней среды, нейтрофилы модулируют свои функ- ции, нацеленные на ее восстановление. Активи- рованные нейтрофилы сами становятся мощ- ными эффекторами пусковых и регуляторных механизмов каскадных реакций, обеспечиваю- щих развитие воспаления. Функциональная активность нейтрофилов во многом зависит от интенсивности респираторного взрыва и состояния внутриклеточного метабо- лизма [4, 5]. Однако особенности функционально- метаболических процессов в нейтрофилах при развитии резистентности к АСК у пациентов ОКС до сих пор остаются неизученными. Цель исследования: изучение особенностей хемилюминесцентного состояния и активно- сти НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в нейтро- фильных гранулоцитах крови у пациентов с раз- ной чувствительностью к АСК при ОКС. Материалы и методы В исследование включены 53 пациента (сред- ний возраст 61,1±1,1 лет, 25 мужчин и 28 жен- щин). Критериями включения в исследование являлись: ОКС у пациентов обоего пола, в воз- расте от 35 до 75 лет, в первые 24 часа поступле- ния в стационар от начала заболевания, не при- нимавших до госпитализации антиагреганты и антикоагулянты, и подписавших информи- рованное согласие. Диагноз ОКС, а в дальней- шем острого инфаркта миокарда с элевацией или депрессией сегмента ST и положительным тропонином T устанавливался в соответствии с критериями Европейского общества кардиоло- гов [6]. Критерии исключения: сопутствующий сахарный диабет, тяжелая сопутствующая пато- логия (почечная недостаточность, последствия инсульта), сердечная недостаточность III ста- дии, кардиогенный шок при поступлении в ста- ционар, отсутствие информированного согла- сия. Всем пациентам была проведена реперфузионная терапия в виде чрескожного коронарного вмешательства или тромболитической тера- пии. В дальнейшем пациенты получали тера- пию антитромбоцитарными препаратами (АСК, клопидогрел), β-адреноблокаторами, ингибито- рами ангиотензин-превращающего фермента, статинами. Контрольная группа сформирована из 50 относительно здоровых добровольцев без сердечно-сосудистых заболеваний (все испыту- емые были обследованы на наличие сердечно- сосудистых заболеваний), сопоставимых по полу и возрасту (средний возраст 56,9±1,4 года, 27 мужчин и 23 женщины). Все пациенты до начала лечения и реваску- ляризации были обследованы на резистентность к АСК и, соответственно, разделены на группы чувствительных (АЧ) и резистентных к АСК (АР). Оценка резистентности/чувствительно- сти к АСК осуществлялась in vitro путем после- довательного инкубирования обогащенной тром- боцитами плазмы с 5 мкМ аденозиндифосфата (АДФ) и 3,36 мМ АСК и определения уровня агрегации тромбоцитов после каждого инкубиро- вания. Сущность определения заключалась в том, что у больных до начала терапии АСК исследо- вали АДФ-индуцированную и АСК-зависимую агрегации тромбоцитов и по их разнице опре- деляли величину коэффициента ингибирова- ния агрегации (КИА), величина КИА<24% сви- детельствует о резистентности к АСК, при КИА ≥24% - о чувствительности к АСК [7]. Нейтрофилы выделяли из цельной гепарини- зированной крови центрифугированием в двой- ном градиенте плотности фиколл-урографина: ρ=1,077 г/см3 - для отделения лимфоцитов; ρ=1,119 г/см3 - для выделения нейтрофилов. Состояние респираторного взрыва нейтрофиль- ных гранулоцитов исследовали с помощью хеми- люминесцентного анализа [8]. В качестве инди- каторов хемилюминесценции использовали люминол и люцигенин. Оценка спонтанной и зимозан-индуцированной хемилюминесценции осуществлялась в течение 90 минут на 36-каналь- ном хемилюминесцентном анализаторе “CL3606” (Россия). Определяли следующие характери- стики: время выхода на максимум (Тmax), макси- мальное значение интенсивности (Imax), а также площадь под кривой (S) хемилюминесценции. Усиление хемилюминесценции, индуцирован- ной зимозаном, оценивали отношением площади индуцированной хемилюминесценции (Sинд.) к площади спонтанной (Sспонт.) и определяли как индекс активации (Sинд./Sспонт.). Исследование активности НАД(Ф)-зави- симых дегидрогеназ в нейтрофилах прово- дили с помощью биолюминесцентного метода [9]. Метаболизм клеток оценивали по актив- ности следующих ферментов: глюкозо-6-фос- фатдегидрогеназы (Г6ФДГ), глицерол-3-фос- фатдегидрогеназы (Г3ФДГ), малик-фермента (НАДФМДГ), НАД- и НАДН-зависимой реак- ции лактатдегидрогеназы (ЛДГ и НАДН-ЛДГ), НАД- и НАДН-зависимой реакции малатде- гидрогеназы (МДГ и НАДН-МДГ), НАДФ- и НАДФН-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАДФГДГ и НАДФН-ГДГ), НАД- и НАДНзависимой глутаматдегидрогеназы (НАДГДГ и НАДН-ГДГ), НАД- и НАДФ-зависимых изоцитратдегидрогеназ (НАДИЦДГ и НАД- ФИЦДГ, соответственно) и глутатионредук- тазы (ГР). Активность дегидрогеназ выражали в ферментативных единицах на 104 кле- ток, где 1 Е = 1 мкмоль/мин [10]. Исследова- ние проводили на ферментативном препарате NАD(Р): FMNоксидоредуктаза-люцифераза из Photobacterium leiognathi (получен в ФГБНУ «НИИ биофизики», Красноярск). Все исследования выполнены с информиро- ванного согласия испытуемых и в соответствии с Хельсинской декларацией Всемирной ассоци- ации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека» с поправками 2013 г. и «Правилами клинической практики в Российской Федера- ции», утвержденными Приказом Минздрава РФ от 19.06.2003 г. № 266. Описание выборки производили с помо- щью подсчета медианы (Ме) и интеркварталь- ного размаха в виде 25 и 75 процентилей (С25 и С75, соответственно). Достоверность различий между показателями независимых выборок оце- нивали по Mann-Whitney U test. Статистичес- кий анализ осуществляли в пакете прикладных программ Statistica 7.0 (StatSoft Inc., 2004). Результаты исследования При исследовании люцигенин-зависимой хемилюминесценции нейтрофильных грану- лоцитов обнаружено снижение площади под кривой спонтанной хемилюминесценции у АР пациентов относительно показателей, выяв- ленных у АЧ пациентов при ОКС (табл. 1). Также у АР пациентов снижена площадь под кривой зимозан-индуцированной люцигенин- зависимой хемилюминесценции как относи- тельно контрольного диапазона, так и значений, выявленных у АЧ пациентов. Особенностями люцигенин-зависимой хемилюминесценции у АЧ пациентов является сокращение времени Люцигенин-зависимая хемилюминесцентная активность нейтрофильных гранулоцитов у чувствительных и резистентных к АСК пациентов ОКС (Ме, С25 - С75) Таблица 1 Показатели Контроль n=50 1 Чувствительные к АСК пациенты n=34 2 Резистентные к АСК пациенты n=19 3 Ме С25 - С75 Ме С25 - С75 Ме С25 - С75 Спонтанная хемилюминесценция Tmax, сек. 2246,5 1538,0 - 3418,2 1902,5 1563,5 - 3248,0 2821,8 2113,0 - 4223,5 Imax, о.е. × 103 7,38 2,58 - 15,61 11,98 7,00 - 20,00 10,70 5,48 - 14,70 S, о.е.ґ 4,28 0,44 - 24,78 6,25 1,15 - 20,34 3,52 1,01 - 15,77 p2=0,045 Зимозан-индуцированная хемилюминесценция Tmax, сек. 1830,9 1489,0 - 2439,1 1535,5 1262,5 - 1755,5 3084,0 2887,0 - 3724,1 p1=0,005 p2=0,020 Imax, о.е. × 103 14,03 7,61 - 28,49 17,45 5,12 - 34,21 17,41 14,95- 20,31 S, о.е.ґ 10,77 7,14 - 43,31 7,11 2,70 - 15,68 4,37 0,81 - 12,58 p1=0,044 p2=0,037 Sинд./Sспонт. 1,80 1,17 - 3,19 1,16 0,84 - 2,41 1,35 1,41 - 4,02 Примечания: р1 - статистически значимые различия с контролем, р2 - статистически значимые различия между АЧ и АР пациентами. Люминол-зависимая хемилюминесцентная активность нейтрофильных гранулоцитов у чувствительных и резистентных к АСК пациентов ОКС (Ме, С25 - С75) Таблица 2 Показатели Контроль n=50 1 Чувствительные к АСК пациенты n=34 2 Резистентные к АСК пациенты n=19 3 Ме С25 - С75 Ме С25 - С75 Ме С25 - С75 Спонтанная хемилюминесценция Tmax, сек. 634,0 506,5 - 1332,5 1913,0 1092,0 - 2594,0 1957,0 1595,0 - 2137,0 р1=0,049 р1=0,014 Imax, о.е. × 103 45,21 12,60 - 61,59 31,73 17,85 - 56,16 52,04 35,39 - 68,58 S, о.е.ґ 3,21 1,43 - 8,51 5,23 3,28 - 70,70 5,46 4,02 - 14,98 Зимозан-индуцированная хемилюминесценция Tmax, сек. 664,0 580,0 - 1285,5 1091,0 987,0 - 1819,0 1559,0 1374,0 - 1692,0 р1=0,041 р1=0,041 Imax, о.е. × 103 64,69 23,01 - 118,70 81,12 31,53 - 118,15 61,95 30,43 - 109,96 S, о.е.ґ 6,74 1,23 - 23,50 8,52 5,71 - 170,80 5,52 4,42 - 34,61 Sинд./Sспонт. 2,17 1,61 - 3,63 2,19 1,45 - 2,78 1,36 1,19 - 1,84 р1,2=0,040 Примечания: р1 - статистически значимые различия с контролем, р2 - статистически значимые различия между АЧ и АР пациентами. р1=0,037 а) б) р1=0,048 р2=0,033 р1<0,001 р2=0,012 р1=0,028 р1=0,045 р2=0,037 р2=0,046 р1=0,002 р2=0,006 в) г) в) р1=0,008 р2=0,004 р1=0,017 р2=0,009 Рис. 1. Активность НАДФ-зависимых дегидрогеназ в нейтро- филах крови у чувствительных и резистентных к АСК пациентов ОКС. Рис. 2. Активность НАД-зависимых дегидрогеназ в нейтро- филах крови у чувствительных и резистентных к АСК пациентов ОКС. Примечание к рис. 1 и 2: р1 - статистически значимые различия с контролем,р2 - статистически значимые различия между АЧ и АР пациентами. выхода на максимум индуцированной хемилю- минесценции. Исследование люминол-зависимой хемилю- минесценции позволило обнаружить, что неза- висимо от чувствительности к АСК у пациентов ОКС увеличивается время выхода на максимум спонтанной и зимозан-индуцированной хеми- люминесценции относительно контрольных значений (табл. 2). Кроме того, у АР, по срав- нению с АЧ пациентами и контролем, снижен индекс активации люминол-зависимой хемилю- минесценции. При исследовании активности НАДФ- зависимых дегидрогеназ в нейтрофилах крови обнаружено, что у АЧ пациентов в 2,7 раза выше активность ГР по сравнению с контрольными значениями (рис. 1 а). В то же время, у АР паци- ентов в нейтрофилах крови активность Г6ФДГ и НАДФГДГ значительно выше, а активность НАДФМДГ ниже, чем у АЧ пациентов и кон- троля (рис. 1, б-в). Изучение активности НАД-зависимых деги- дрогеназ в нейтрофилах крови позволило уста- новить, что независимо от чувствительно- сти к АСК у пациентов ОКС повышена актив- ность Г3ФДГ (рис. 2 а). Только у АЧ пациен- тов повышена активность НАДН-ГДГ относи- тельно контроля (рис. 2 б). У АР пациентов с ОКС в нейтрофилах крови повышена актив- ность НАДГДГ по сравнению с АЧ пациентами и контрольными значениями. (рис. 2 в). Обсуждение полученных результатов Активность респираторного взрыва в нейтро- филах определяется уровнями синтеза первич- ных и вторичных АФК [11]. Состояние респи- раторного взрыва было исследовано с помо- щью двух хемилюминесцентных индикато- ров: люцигенина и люминола. Люцигенин окис- ляется и люминесцирует только под влия- нием супероксид-радикала, который опреде- ляется как первичная АФК и синтезируется в системе НАДФН-оксидазы [8]. Люцигенин не проходит через мембрану клеток и связывается с супероксид-радикалом только во внеклеточ- ном пространстве. Соответственно, исследова- ние люцигенин-зависимой хемилюминесценции нейтрофилов позволяет охарактеризовать состо- яние активности НАДФН-оксидазы и уровень выделения супероксид-радикала для реализации механизма внешнего киллинга у больных ОКС. Обнаружено, что активность НАДФН- оксидазы в нейтрофилах крови у больных ОКС зависит от их чувствительности к АСК. Так, у АЧ больных ОКС выявляются минимальные отли- чия кинетики люцигенин-зависимой хемилюми- несценции нейтрофилов, которые определяются только снижением времени выхода на максимум индуцированной хемилюминесценции. Дан- ный показатель характеризует скорость разви- тия респираторного взрыва от момента регуля- торного или антигенного воздействия на клетку до максимальной активации ферментов, синте- зирующих АФК. Следовательно, у АЧ больных ОКС состояние респираторного взрыва характе- ризуется повышением скорости активации син- теза первичных АФК при антигенной стимуля- ции функциональной активности нейтрофилов. У АР больных ОКС особенность синтеза пер- вичных АФК нейтрофилами характеризуется снижением площади под кривой спонтанной и индуцированной люцигенин-зависимой хеми- люминесценции. Подобное состояние хемилю- минесцентной активности клеток отражает сни- жение активности НАДФН-оксидазы в синтезе супероксид-радикала. В формировании пула вторичных АФК в ней- трофильных гранулоцитах принимают участие такие ферменты, как супероксиддисмутаза, ката- лаза, миелопероксидаза и др. Для оценки интен- сивностисинтезавторичных АФКнейтрофилами крови нами использовалась люминол-зависимая хемилюминесценция. Необходимо отметить, что люминол способен вступать в хемилюминес- центную реакцию, как с первичными, так и вто- ричными АФК [8]. Особенность респираторного взрыва в нейтрофилах у АЧ больных ОКС опре- деляется увеличением времени активации син- теза вторичных АФК. У АР пациентов особен- ность синтеза вторичных АФК в фагоцитиру- ющих клетках также определяется ускоренной активацией ферментов, но при снижении вели- чины индекса активации, который характеризует уровень активации респираторного взрыва при антигенной стимуляции нейтрофилов. Респираторный взрыв тесно связан с основ- ными метаболическими процессами в клет- ках. Так доказано, что активность НАДФН- оксидазы зависит от образования НАДФН в системе пентозофосфатного цикла [12, 13]. В связи с этим мы исследовали уровни активности НАД- и НАДФ-зависимых дегидрогеназ в ней- трофилах крови у больных ОКС в зависимости от их чувствительности к АСК. Установлено, что метаболизм нейтрофи- лов у АЧ больных ОКС характеризуется повы- шением активности ГР и НАДН-ГДГ. ГР явля- ется ферментом глутатион-зависимой антиок- сидантной системы клеток, активность которой может увеличиваться при повышении интен- сивности перекисных процессов [10]. При этом повышение интенсивности перекисных процес- сов может привести к стимуляции активности внтуриклеточных антиоксидантных ферментов (супероксиддисмутазы, каталазы и других), что может проявляться в увеличении времени раз- вития респираторного взрыва за счет синтеза вторичных АФК. НАДН-ГДГ - фермент, осу- ществляющий НАДН-зависимое перераспреде- ление интермедиатов с цикла трикарбоновых кислот на реакции аминокислотного обмена. В связи с тем, что у АЧ пациентов отсутствуют изменения активности ферментов лимонного цикла (НАДИЦДГ и МДГ) можно предполо- жить, что стимуляции аминокислотного обмена не приводит к ингибированию энергетических процессов в нейтрофилах крови. У АР больных ОКС особенности метабо- лизма нейтрофилов определяются выраженным повышением активности Г6ФДГ, НАДФГДГ и НАДГДГ, а также снижением активно- сти НАДФМДГ. Г6ФДГ - инициализирую- щий и ключевой фермент пентозофосфатного цикла, основными продуктами которого явля- ются рибозо-5-фосфат и НАДФН, используе- мые преимущественно в пластических процесса, но и, в том числе, для реализации ферментатив- ной активности НАДФН-оксидазы [10]. Между тем, активность самой НАДФН-оксидазы в нейтрофилах у лиц данной группы снижена. Можно предположить, что метаболические про- цессы в нейтрофилах даже при высокой актив- ности Г6ФДГ не могут обеспечить достаточную активность НАДФН-оксидазы. Тем более, что у АР пациентов значительно снижена активность НАДФМДГ - фермента цитоплазматического компартмента, в ходе ферментативной реакции которого также образуется НАДФН. НАДГДГ и НАДФГДГ - ферменты, преимущественно лока- лизующиеся в митохондриальном компартменте и осуществляющие отток субстратов с реакций аминокислотного обмена на цикл трикарбоно- вых кислот [10]. Активация данных ферментов связана с необходимостью субстратной стимуля- ции энергетических процессов клетки. Г3ФДГ - фермент, осуществляющий пере- нос продуктов липидного катаболизма на окислительно-восстановительные реакции гли- колиза [10]. Активность фермента повышается в нейтрофилах как у АЧ, так и у АР пациентов с ОКС. Можно предположить, что подобное изменение активности данного фермента опре- деляется необходимостью субстратной стиму- ляции гликолиза. Тем более, что в нейтрофи- лах АР пациентов более выраженное увеличе- ние активности Г3ФДГ совпадает с активацией Г6ФДГ, которая является основным конкурен- том гликолиза за субстрат. Необходимо отметить, что особенности состояния респираторного взрыва и метаболизма нейтрофилов крови у больных ОКС, зави- симые от чувствительности к АСК, могут опре- деляться как внутриклеточными процессами, так и регуляторными реакциями в иммунной системе и гемостазе. Доказано участие циклоок- сигеназы в реализации функциональной актив- ности нейтрофилов [4]. Ингибирование метабо- лизма арахидоновой кислоты приводит к выра- женному снижению фагоцитарной и перевари- вающей активности нейтрофильных гранулоци- тов [5]. Установлено значение тромбоцитарно- нейтрофильной ассоциации в патогенезе ОКС, которая реализуется через рецепторное взаимо- действие и с помощью гуморальных факторов [14]. Таким образом, у больных ОКС обнару- жены изменения кинетики и интенсивности респираторного взрыва и активности НАД(Ф)- зависимых дегидрогеназ в нейтрофилах крови, зависимые от чувствительности к АСК. У АЧ пациентов выявляются минимальные измене- ния кинетики респираторного взрыва, кото- рые определяются ускоренной активацией син- теза первичных АФК в клетках при антиген- ной индукции, а также замедлением синтеза вто- ричных АФК. Метаболизм нейтрофилов харак- теризуется увеличением активности фермен- тов, продукты которых стимулируют энергети- ческие процессы, а также повышением интен- сивности внутриклеточных перекисных процес- сов. У АР больных ОКС состояние респиратор- ного взрыва определяется понижением скорости синтеза первичных АФК, замедлением синтеза вторичных АФК и снижением индекса актива- ции нейтрофилов по люминол-зависимой хеми- люминесцентной реакции. Изменения активно- сти ферментов в нейтрофилах АР больных также более выражены, чем при наличии чувствитель- ности к АСК и характеризуются активацией пен- тозфосфатного цикла и повышением интенсив- ности субстратной стимуляции гликолиза, но при повышении уровня оттока интермедиатов с реакций цикла трикарбоновых кислот. При рези- стентности к АСК отмечается понижение функ- циональной активности нейтрофилов, что пред- ставляет интерес при изучении межклеточных взаимоотношений формирования тромба. Воз- можной причиной понижения функциональной активности нейтрофилов являются энергетиче- ские потери клетки, обусловленные повышением интенсивности субстратной стимуляции глико- лиза и активацией окисления глюкозы по пенто- зофосфатному пути.

I Yu Grinshtein

Email: grinst@yandex.ru

A A Savchenko

Yu I Grinshtein

Email: grinstein.yi@mail.ru

I I Gvozdev

Email: leshman-mult@mail.ru

  1. Falk E. Pathogenesis of atherosclerosis. J Am Coll Cardiol 2006; 47: 7-12.
  2. Borekci A., Gur M., Turkoglu C. Oxidative Stress and Spontaneous Reperfusion of infarct-Related Artery in Patients With ST-Segment Elevation Myocardial Infarction. Clin Appl Thromb Hemost 2014; ii:1076029614546329.
  3. Engler R. Free radical and granulocyte-mediated injury during myocardial ischemia and reperfusion. Am J Cardiol 1989; 63:19-23.
  4. Domingo-Gonzalez R., Martínez-Colón G.J., Smith A.J. et al. Inhibition of Neutrophil Extracellular Trap Formation after Stem Cell Transplant by Prostaglandin E2. Am J Respir Crit Care Med 2016; 193 (2): 186-197.
  5. Martin M.J. Hypertonic saline inhibits arachidonic acid priming of the human neutrophil oxidase. J Surg Res 2013; 179 (1): 39-40.
  6. Hamm C.W., Bassand J.-P., Agewall S. et al. ESC Guidelines For the management of acute coronary syndromes in patients presenting without persistent ST-segment elevation: The Task Force for the management of acute coronary syndromes (ACS) in patients presenting without persistent ST-segment elevation of the European Society of Cardiology (ESC). European Heart Journal 2011; 32 (23): 2999-3054.
  7. Гринштейн Ю.И., Филоненко И.В., Савченко А.А. и др. Способ диагностики резистентности к ацетилсалициловой кислоте. Патент № 2413953 РФ. МПК G01N 33/86 (2006.01). Опубл. 10.03.2009. Бюлл. № 7. 8 с. (Grinshtein Y.I., Filonenko I.V., Savchenko A.A. et al. A method of diagnosing resistance to acetylsalicylic acid // Patent No. 2413953 of the Russian Federation. MPK G01N 33/86 (2006.01). Publ. 10.03.2009. Bull. No. 7. 8 p.)
  8. Шкапова Е.А., Куртасова Л.М., Савченко А.А. Показатели люцигенин- и люминол-зависимой хемилюминесценции нейтрофилов крови у больных раком почки. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины 2010; 149 (2): 201-203. (Shkapova E.A., Kurtasova L.M., Savchenko A.A. The performance of lucigenin- and luminol-dependent chemiluminescence of blood neutrophils in patients with kidney cancer. Bulletin of experimental biology and medicine 2010; 149 (2): 201-203.)
  9. Савченко А.А. Определение активности NAD(P)-зависимых дегидрогеназ в нейтрофильных гранулоцитах биолюминесцентным методом. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины 2015; 159 (5): 656-660. (Savchenko A.A. The determination of the NAD(P)-dependent dehydrogenases activity in neutrophilic granulocytes by a bioluminescent method // Bulletin of experimental biology and medicine 2015; 159 (5): 656-660.)
  10. Биохимия /Под ред. Е.С. Северина. М., 2004: 784. (Biochemistry /Ed. by E.S. Severin. M., 2004: 784.)
  11. Kobayashi Y. Neutrophil biology: an update. EXCLI J 2015; 14: 220-227.
  12. Han C.Y., Umemoto T., Omer M. et al. NADPH oxidase-derived reactive oxygen species increases expression of monocyte chemotactic factor genes in cultured adipocytes. J Biol Chem 2012; 287 (13): 10379-10393.
  13. Rosa A.P., Jacques C.E., de Souza L.O. et al. Neonatal hyperglycemia induces oxidative stress in the rat brain: the role of pentose phosphate pathway enzymes and NADPH oxidase. Mol Cell Biochem 2015; 403 (1-2): 159-167.
  14. Гринштейн И.Ю., Савченко А.А., Гринштейн Ю.И. и др. Состояние гемостаза и функциональной активности нейтрофилов у больных с разной чувствительностью к ацетилсалициловой кислоте при остром коронарном синдроме. Кардиоваскулярная терапия и профилактика 2015; 14 (5):29-34. (Grinshtein I.Yu., Savchenko A.A., Grinshtein, Y.I. et al. Hemostasis and functional activity of neutrophils in patients with different sensitivity to acetylsalicylic acid in acute coronary syndrome. Cardiovascular Therapy and Prevention 2015; 14 (5):29-34.)

Views

Abstract - 149

PDF (Russian) - 102

PlumX


Copyright (c) 2017 Grinshtein I.Y., Savchenko A.A., Grinshtein Y.I., Gvozdev I.I.

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International License.