Псевдоэксфолиативная глаукома и молекулярно-генетические особенности обмена витамина D

Полный текст

Введение

Известно, что псевдоэксфолиативная глаукома (ПЭГ) — наиболее агрессивная и трудно поддающаяся медикаментозному и хирургическому лечению форма первичной открытоугольной глаукомы (ПОУГ). Несмотря на почти повсеместную распространённость, наиболее часто этот вид глаукомы встречается в странах Скандинавского полуострова, Северо-Западном и Центральном регионах Российской Федерации (РФ) [7]. Выявлено, что большое значение в патогенезе псевдоэксфолиативного синдрома (ПЭС) и ПЭГ имеют нарушения процессов функционирования экстрацеллюлярного матрикса, окислительный стресс, иммунологические нарушения, апоптоз, генетические детерминанты и факторы окружающей среды [22, 24, 27].

Витамин D является жирорастворимым витамином и по механизму действия и химическому строению относится к классу стероидов, гидро ксилированные производные которого обладают гормональной активностью [6]. Выявлено, что помимо своего основного воздействия — участия в регуляции кальций-фосфорного гомеостаза, витамин D оказывает целый ряд плейотропных эффектов, включая регуляцию воспалительных и иммунных процессов, контроль клеточной пролиферации, дифференцировки и апоптоза в различных тканях, в том числе органа зрения [14, 18].

Процессы синтеза витамина D хорошо изучены. Известно, что его предшественники — колекальциферол (синтезируется в коже под действием УФ-В лучей длиной волны 270–310 нм из 7-дегидрохолестерола) и эргокальциферол (поступает в организм человека с пищей) — не являются активными. Первый этап активации предшественников витамина D происходит в печени, где под действием фермента 25-гидроксилазы (CYP27A1 и CYP2R1) образуется кальцидиол или 25-гидро ксивитамин D (25(OH)D) — основная циркулирующая в крови форма. Именно 25(OH)D определяет статус витамина D в организме человека [6]. Далее, при участии фермента 1α-гидроксилазы (CYP27B1) кальцидиол превращается в активную форму — 1,25-дигидроксивитамин-D, или кальцитриол (1,25(OH)2D) — D-гормон). Хорошо известно, что второй этап гидроксилирования происходит в почках [8]. Однако ферменты гидроксилирования и, соответственно, возможность образования активного D-гормона были обнаружены также в клетках других органов и тканей. Так, в ходе экспериментальных и клинических исследований способность к эндогенной продукции 1,25(OH)2D была выявлена у клеток эндотелия роговицы (ЭР), беспигментного эпителия цилиарного тела (БЭЦТ), пигментного эпителия сетчатки и фибробластов склеры (ФС) [10]. Оказалось, что способность барьерных эпителиальных клеток глаза к синтезу активной формы витамина D сопоставима с таковой у метаболически активных тканей, включая респираторный эпителий, эпителий мочевого пузыря и молочной железы [10, 19, 28].

Известно, что большинство своих биологических эффектов 1,25(OH)2D осуществляет через специфический ядерный рецептор (NR1I1, VDR) [15]. Доказано, что VDR является ДНК-связывающим транскрипционным фактором и имеет большое значение в регуляции ряда физиологических процессов, включая клеточную дифференцировку, процессы апоптоза, иммунную регуляцию, метаболизм липидов и углеводов, тем самым выполняя функцию защитного фактора в развитии кардиоваскулярных, аутоиммунных, онкологических и других заболеваний [1, 4, 14, 23].

К настоящему времени имеются единичные исследования, подтверждающие возможность наличия рецептора витамина D в тканях глаза. Так, мРНК рецептора витамина D была обнаружена в роговичном и лимбальном эпителии [19, 28]. Кроме этого, в исследовании, проведённом J.A. Alsalem et al. [10], было выявлено, что клетки пограничных областей глазного яблока (ФС, ЭР, БЭЦТ и пигментного эпителия сетчатки) способны к экспрессии мРНК и самого VDR-протеина. Необходимо отметить, что наиболее выраженная экспрессия была характерна для культур клеток ЭР и БЭЦТ, играющих важную роль в продукции водянистой влаги [10].

Считается, что генетически детерминированное состояние VDR может вовлекаться в патогенез различных, в том числе глазных, заболеваний [1, 2, 17, 23]. В этом отношении наиболее изучены следующие единичные нуклеотидные полиморфизмы (SNP) в последовательности гена VDR: Cdx-2 (rs11568820) — в 1-м экзоне, FokI (rs10735810) — во 2-м экзоне, BsmI (rs1544410) и ApaI (rs7975232) — в 8-м интроне, TaqI (rs731236) — в 9-м экзоне [12, 26]. Так, показана связь указанных полиморфизмов с болезнью Паркинсона, сахарным диабетом, онкологической патологией, болезнью Альцгеймера [17, 23, 26]. В настоящее время имеются лишь единичные исследования, посвящённые установлению ассоциаций между полиморфизмами VDR и патологией органа зрения [2, 20]. Таким образом, понимание механизмов развития открытоугольной глаукомы (в том числе ПЭГ и ПОУГ) и действия витамина D поможет расширить знания в этой области.

Целью нашей работы было изучить возможную ассоциацию уровня 25-гидроксивитамина D и полиморфизмов BsmI, ApaI, TaqI и FokI гена рецептора витамина D с клиническими проявлениями псевдоэксфолиативной глаукомы.

Материалы и методы

Нами было обследовано 160 жителей Санкт-Петербурга и Ленинградской области в возрасте от 55 до 75 лет (72 мужчины (45 %) и 88 женщин (55 %)) европейского происхождения, которые подписали информированное согласие на участие в исследовании. Все участники были разделены на две группы. Основную группу составили 122 пациента (42 % мужчин и 58 % женщин) с наличием псевдоэксфолиативной глаукомы I–III стадий, 38 человек (55 % мужчин и 45 % женщин) без ПЭГ, ПОУГ и ПЭС составили группу контроля.

В исследование не включались пациенты, имеющие в анамнезе сахарный диабет, онкологические и аутоиммунные заболевания, тяжёлую сопутствующую патологию различных систем и органов, получающие лечение глюкокортикоидами, иммуносупрессорами, препаратами витамина D. Со стороны органа зрения критерием невключения было наличие в анамнезе увеитов, острых нарушений кровообращения в системах центральной артерии и центральной вены сетчатки, травм, заболеваний роговицы, влажной формы возрастной макулярной дегенерации.

Офтальмологическое обследование проводили в поликлинике с КДЦ и на кафедре офтальмологии ПСПбГМУ им. акад. И.П. Павлова, выполняли авторефрактометрию, визометрию, тонометрию по Маклакову, биомикроофтальмоскопию, компьютерную периметрию. Параметры диска зрительного нерва (ДЗН) оценивали при помощи гейдельбергской ретинальной томографии (HRT-II), длину передне-задней оси (ПЗО) глазного яблока и центральную толщину роговицы (ЦТР) измеряли на ультразвуковом био- и кератопахиметре AL-3000 (Tomey Corporation, Япония).

Молекулярно-генетическое и биохимическое обследования проводили в лаборатории биохимического гомеостаза человека НИИ Нефрологии ПСПбГМУ им. акад. И.П. Павлова.

Уровень 25(ОН)D в сыворотке крови определяли методом иммунохемилюминесцентного анализа при помощи тест-систем 25-ОН Vitamin D Abbott (США) на анализаторе Abbott Architect i2000 SR (США). Согласно клиническим рекомендациям Российской ассоциации эндокринологов (2015), за нормальную обеспеченность витамином D принимали значения 25(ОН)D в сыворотке крови, равные или превышающие 75 нМоль/л; за недостаточную — значения от 50 до 75 нМоль/л; значения ниже 50 нМоль/л расценивали как дефицит витамина D [6].

Полиморфизмы BsmI, ApaI, TaqI и FokI гена VDR были определены у 120 пациентов (50 мужчин, 70 женщин), имеющих ПЭГ. Детекцию аллельных полиморфизмов ApaI, BsmI, TaqI и FokI проводили методом полимеразной цепной реакции — полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПЦР-ПДРФ) с применением эндонуклеаз рестрикции (SibEnzyme, Новосибирск): FokI — с визуализацией в 3 % агарозном геле, ApaI, BsmI, TaqI — с визуализацией в 12 % полиакриламидном геле. Размеры полученных фрагментов определяли с помощью «ДНК-маркера 100bp+50bp» (SibEnzyme, Новосибирск). Постановку ПЦР осуществляли на амплификаторе iCycler (BioTeck, Великобритания). Специфичность праймеров проверяли при помощи программы PrimerBLAST (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast) (табл. 1).

 

Таблица 1. Структура олигопраймеров для определения аллельных полиморфизмов FokI, ApaI, BsmI и TaqI в гене VDR

Table 1. Primers for VDR gene polymorphisms (FokI, ApaI, BsmI and TaqI)

Ген	Локализация	Полиморфизм	Структура олигопраймеров
VDR	12q13-14	FokI (Т>С)	F: 5-AGCTGGCCCTGGCACTGACTCTGGCTCT3 R: 5-ATGGAAACACCTTGCTTCTTCTCCCTC-3
		ApaI (A>C)	F: 5-GTATCACCGGTCAGCAGTCATAGA-3 R: 5-TGTACGTCTGCAGTGTGTTGGA-3
		BsmI (A>G)	F: 5-GAGCCCAGTTCACGCAAGAG-3 R: 5-GGGGGGATTCTGAGGAACTAGATA-3
		TaqI (C>T)	F: 5-GTATCACCGGTCAGCAGTCATAGA-3 R: 5-TGTACGTCTGCAGTGTGTTGGA-3

 

Длину ампликона и расположение сайта распознавания эндонуклеазы рестрикции определяли при помощи ресурсов NCBI и NebCutter. Полиморфизмы BsmI, ApaI, TaqI и FokI представлены по стандартной номенклатуре, согласно которой при отсутствии рестрикционных сайтов аллели обозначаются заглавными буквами (B, A, T, F), при наличии области для рестрикционного фермента — строчными (b, a, t, f) [12].

Результаты молекулярно-генетического исследования, полученные в группе больных ПЭГ, сравнивали с данными, полученными при обследовании 212 здоровых доноров (145 мужчин и 67 женщин), обследованных в ФМИЦ им. В.А. Алмазова [4]. Группу сравнения рассматривали как общую популяцию.

Статистический анализ

Полученные в процессе исследования медико-биологические данные обрабатывали c использованием программной системы STATISTICA для Windows (версия 9). Частотные характеристики качественных показателей анализировали с помощью непараметрических методов χ2, χ2 с поправкой Йетса (для малых групп) и критерия Фишера. Количественные параметры в исследуемых группах сравнивали с использованием критериев Манна – Уитни, Вальда, медианного χ2 и модуля ANOVA. Для описания относительного риска развития заболевания рассчитывали отношение шансов (OR) и доверительный интервал (CI, интервал значений, в пределах которого с вероятностью 95 % находится ожидаемое значение OR). Как отсутствие ассоциации рассматривали OR = 1, как положительную ассоциацию — OR > 1, а OR < 1 — как отрицательную ассоциацию аллеля или генотипа с заболеванием (пониженный риск развития патологии). Доверительные интервалы для частотных показателей рассчитывали с применением точного метода Фишера. Характеристики выборок были представлены в виде среднего значения ± ошибка среднего значения (M ± m).

Результаты

Анализ результатов измерения биометрических показателей (длина ПЗО глазного яблока (мм), ЦТР (мкм) и площадь ДЗН (мм2)) у пациентов основной и контрольной групп показал отсутствие достоверных различий всех исследуемых параметров в обеих группах (табл. 2).

 

Таблица 2. Длина передне-задней оси глазного яблока, толщина роговицы в центре и площадь диска зрительного нерва у больных псевдоэксфолиативной глаукомой и в группе контроля

Table 2. The eye length, central cornea thickness and optic nerve head area in patients with pseudoexfoliative glaucoma and in control group

Параметр	Группа с псевдоэксфолиативной глаукомой	Группа контроля	p
Передне-задняя ось, мм	22,5 ± 0,4	22,3 ± 0,6	> 0,05
Центральная толщина роговицы, мкм	537,8 ± 7,9	560,3 ± 5,9	0,09
Площадь диска зрительного нерва, мм2	1,7 ± 0,1	1,6 ± 0,1	> 0,05

 

Результаты биохимического исследования продемонстрировали, что для пациентов с ПЭГ характерна более низкая концентрация 25(OH)D в сыворотке крови по сравнению с группой контроля (39,3 ± 1,2 и 52,7 ± 2,1 нМоль/л соответственно, p < 0,01). Выявлено, что количество больных с дефицитом витамина D в группе ПЭГ было значительно выше, чем в контрольной группе (86,4 и 59,5 % соответственно, p < 0,01). Кроме того, в отличие от группы контроля у 12,6 % больных ПЭГ наблюдался тяжёлый дефицит витамина D (< 25 нМоль/л).

Распределение генотипов и встречаемость аллелей полиморфизмов BsmI, ApaI, TaqI и FokI гена VDR у больных ПЭГ и в общей популяции представлены в табл. 3.

 

Таблица 3. Распределение генотипов и встречаемость аллелей полиморфизмов BsmI, ApaI, TaqI и FokI гена рецептора витамина D у пациентов с псевдоэксфолиативной глаукомой и в общей популяции

Table 3. BsmI, ApaI, TaqI, and FokI VDR gene polymorphisms genotypes distribution, and allele frequencies in patients with PEG and general population

Полиморфизмы	Распределение генотипов (%) и встречаемость аллелей					p
BsmI	BB	bb	Bb	B-аллель	b-аллель
Группа с псевдоэксфолиативной глаукомой	5,8	43,3	50,8	0,31	0,69	< 0,001
Контроль	24,1	21,7	54,2	0,51	0,49
ApaI	AA	aa	Aa	a-аллель	a-аллель
Группа с псевдоэксфолиативной глаукомой	17,5	27,5	55,0	0,45	0,55	> 0,05
Контроль	26,0	22,6	51,4	0,52	0,48
TaqI	TT	tt	Tt	T	t
Группа с псевдоэксфолиативной глаукомой	39,2	15,0	45,8	0,62	0,38	> 0,05
Контроль	45,3	9,4	45,3	0,68	0,32
FokI	FF	ff	Ff	F	f
Группа с псевдоэксфолиативной глаукомой	25,0	25,0	50,0	0,5	0,5	< 0,05
Контроль	34,0	14,6	51,4	0,6	0,4

 

Распределение генотипов всех изучаемых полиморфизмов гена VDR соответствовало равновесию Харди – Вайнберга. С учётом данных, представленных в табл. 3, не было найдено достоверных различий в распределении генотипов и встречаемости аллелей полиморфизмовApaI и TaqI гена VDR. В то же время у обследованных пациентов с ПЭГ чаще встречались b-аллель (p < 0,001) и bb-генотип (p < 0,001) полиморфизма BsmI и f-аллель и ff-генотип (p < 0,05) полиморфизма FokI гена рецептора витамина D по сравнению с общей популяцией. При этом установлено, что для группы обследованных нами пациентов с ПЭГ не имеется различий в распределении генотипов по половому признаку в сравнении с общей популяцией (p > 0,05).

При оценке концентрации 25(OH)D у больных ПЭГ, носителей различных генотипов гена VDR, нами не было выявлено достоверных различий (табл. 4)

 

Таблица 4. Концентрация 25(OH)D в сыворотке крови у больных псевдоэксфолиативной глаукомой, носителей различных генотипов полиморфизмов BsmI, ApaI, TaqI и FokI гена рецептора витамина D

Table 4. 25(OH)D concentration in PEG patients, carriers of different BsmI, ApaI, TaqI, and FokI VDR gene polymorphisms genotypes

Полиморфизмы	25(OH)D, нМоль/л			p
BsmI	BB	Bb	bb
	30,4 ± 6,2	39,5 ± 1,6	40,05 ± 2,0	> 0,05
ApaI	AA	Aa	aa
	40,4 ± 4,2	39,1 ± 1,4	38,6 ± 2,7	> 0,05
TaqI	TT	Tt	tt
	39,9 ± 2,2	39,1 ± 1,6	37,7 ± 3,7	> 0,05
FokI	FF	Ff	ff
	41,9 ± 2,1	38,5 ± 1,8	38,0 ± 2,9	> 0,05

 

У больных ПЭГ, носителей различных генотипов полиморфизмов BsmI, ApaI, TaqI и FokI гена VDR, были рассчитаны показатели ПЗО, ЦТР и площади ДЗН (табл. 5).

 

Таблица 5. Длина передне-задней оси глазного яблока, центральная толщина роговицы и площадь диска зрительного нерва у больных псевдоэксфолиативной глаукомой, носителей различных генотипов полиморфизмов BsmI, ApaI, TaqI и FokI гена рецептора витамина D

Table 5. The eye length, central cornea thickness and optic nerve head area in carriers of different BsmI, ApaI, TaqI, and FokI VDR gene polymorphisms genotypes

Параметры	Генотипы			p
BsmI-полиморфизм гена рецептора витамина D
	BB	Bb	bb
ПЗО, мм	23,4 ± 0,3	22,1 ± 0,7	22,8 ± 0,5	> 0,05
ЦТР, мкм	544,8 ± 8,6	538,6 ± 8,6	533,7 ± 11,5	> 0,05
Площадь ДЗН, мм2	1,6 ± 0,3	1,6 ± 0,1	1,7 ± 0,1	> 0,05
ApaI-полиморфизм гена рецептора витамина D
	AA	Aa	aa
ПЗО, мм	21,9 ± 1,2	22,3 ± 0,6	23,2 ± 0,2	> 0,05
ЦТР, мкм	546,3 ± 9,9	530,9 ± 12,6	543,1 ± 6,5	> 0,05
Площадь ДЗН, мм2	1,48 ± 0,2	1,66 ± 0,1	1,69 ± 0,1	> 0,05
TaqI-полиморфизм гена рецептора витамина D
	TT	Tt	tt
ПЗО, мм	22,7 ± 0,5	22,1 ± 0,8	23,2 ± 0,2	> 0,05
ЦТР, мкм	532,9 ± 0,2	533,8 ± 11,7	556,8 ± 8,4	> 0,05
Площадь ДЗН, мм2	1,7 ± 0,1	1,65 ± 0,1	1,48 ± 0,2	> 0,05
FokI-полиморфизм гена рецептора витамина D
	FF	Ff	ff
ПЗО, мм	23,2 ± 0,2	22,1 ± 0,7	22,6 ± 0,8	> 0,05
ЦТР, мкм	543,3 ± 5,4	536,8 ± 10,7	530,7 ± 19,9	> 0,05
Площадь ДЗН, мм2	1,7 ± 0,1	1,6 ± 0,1	1,7 ± 0,1	> 0,05
Примечние: ПЗО — передне-задняя ось; ЦТР — центральная толщина роговицы; ДЗН — диск зрительного нерва

 

Как видно из представленных данных, различий в исследуемых показателях в зависимости от генотипа гена VDR у больных ПЭГ выявлено не было. В то же время установлено, что у носителей F-аллеля полиморфизма FokI толщина роговой оболочки была больше, чем у носителей ff-генотипа (547,3 ± 4,1 и 502,1 ± 25,8 мкм соответственно, p < 0,01).

На основании полученных в ходе исследования данных был рассчитан риск ПЭГ в зависимости от генотипов изучаемых полиморфизмов гена рецептора витамина D. Выявлено, что носительство bb-генотипа полиморфизма BsmI гена VDR ассоциировано с увеличением риска ПЭГ в 8,2 раза [CI 95 %: 3,4–19,9], а носительство Bb-генотипа — в 3,9 раза [CI 95 %: 1,7–9,0]. Таким образом, наличие ПЭГ ассоциировано с носительством b-аллеля полиморфизма BsmI гена VDR. Кроме того, установлено, что носительство ff-генотипа полиморфизма FokIассоциировано с увеличением риска ПЭГ в 2,3 раза [CI 95 %: 1,2–4,5].

Обсуждение

Хорошо известно, что наличие тонкой роговой оболочки может быть одним из факторов риска глаукомы [13]. Результаты исследований продемонстрировали, что для больных ПЭС/ПЭГ также характерно уменьшение ЦТР. Предполагают, что такая особенность роговицы при наличии указанной патологии может быть связана с уменьшением плотности клеток стромы и потерей клеток эндотелия [9, 25]. В проведённом нами исследовании, несмотря на то, что у пациентов с ПЭГ ЦТР была ниже, чем в группе контроля (537,8 ± 7,3 и 560,3 ± 5,9 мкм), различия были недостоверны (p = 0,09).

Об истинной встречаемости дефицита витамина D у больных различными формами глаукомы в настоящее время сложно судить в связи с малочисленностью имеющихся работ. Результаты проведённых нами исследований показали, что пациенты с ПЭГ, ПОУГ, ПЭС имеют более низкий уровень 25(OH)D в сыворотке крови и более высокую распространённость дефицита витамина D по сравнению с пациентами без глаукомы и ПЭС (p < 0,01) [3]. Результаты, полученные в ходе данной работы, сопоставимы с результатами других исследователей. Так, при оценке уровня 25(OH)D у 314 больных ПОУГ во Франции было обнаружено, что для пациентов с глаукомой независимо от времени года характерна более низкая концентрация и высокая распространённость той или иной степени недостатка витамина D. Кроме того, авторы показали, что повышение уровня 25(OH)D на каждые 10 нМоль/л уменьшает риск встречаемости ПОУГ, а дефицит витамина D ассоциирован с увеличением риска ПОУГ в 2,1 раза [CI 95 %: 1,06–4,12] [16]. Вместе с тем результаты исследования, проведённого корейскими учёными (6094 человека старше 45 лет), также убедительно показали, что низкий уровень витамина D значительно увеличивает риск развития глаукомы и взаимосвязан с клиническими проявлениями дисфункции зрительного нерва у больных ПОУГ [29].

Как видно из результатов нашего исследования, для больных ПЭГ, так же как и для больных ПОУГ, характерна более частая встречаемость дефицита витамина D и степень его выраженности (86,4 % — ПЭГ, 59,5 % — группа контроля, p < 0,01). Учитывая известные механизмы патогенеза глаукомы и ПЭС, витамин D, в условиях его дефицита, может оказывать влияние на скорость и степень обновления внеклеточного матрикса, прогрессию апоптоза ганглиозных клеток сетчатки, а также на состояние эндотелия и базальных мембран сосудов и структур, имеющих отношение как к гидродинамике глаза, так и к продукции псевдоэксфолиативного материала, приводя к нарушениям, выявляемым при ПЭС/ПЭГ [10, 18, 21, 30].

Учитывая известную связь генетических особенностей рецептора витамина D с различными заболеваниями [12, 17, 23], нами были изучены четыре полиморфизма гена VDR у больных ПЭГ. Было установлено, что в группе обследованных нами пациентов с ПЭГ нет различий в распределении генотипов по половому признаку в сравнении с общей популяцией, что согласуется с данными отечественной литературы [4]. Вместе с тем нами впервые было выявлено, что для больных ПЭГ характерно носительство b-аллеля и bb-генотипа полиморфизма BsmI и ff-генотипа полиморфизма FokI гена VDR. Молекулярно-генетические исследования по изучению связи между геном рецептора витамина D и глазными болезнями ранее были сосредоточены на диабетической ретинопатии, возрастной макулярной дегенерации и миопии [2, 23]. У больных с глаукомой такие работы остаются единичными. Так, в работе китайских учёных, посвящённой изучению полиморфизмов BsmI, TaqI, FokI и Cdx-2 гена VDR у пациентов с ПОУГ (71 человек китайской народности Han), было показано преобладание Bb-генотипа и B-аллеля полиморфизма BsmI (p = 0,001 и p = 0,002 соответственно) и Tt-генотипа и t-аллеля полиморфизма TaqI (p = 0,013 и p = 0,018 соответственно) по сравнению с группой здоровых добровольцев (73 человека) [20]. В изученной нами популяции, так же как и в представленной выше работе, выявлена связь с полиморфизмом BsmI. Однако у больных ПЭГ европеоидной расы преобладало носительство bb-генотипа полиморфизма данного гена. Также в российской популяции больных ПЭГ выявлены различия по распределению аллелей и генотипам полиморфизма FokI. Возможно, такие отличия носят этнический характер, что подтверждается литературными данными, в том числе в Российской Федерации [5].

Необходимо отметить, что ни один изученный нами генотип не был ассоциирован с уровнем 25(OH)D в сыворотке крови и полученные связи между генотипами и наличием ПЭГ установлены на фоне высокого распространения дефицита витамина D как среди больных глаукомой, так и в контрольной группе.

Исследуя показатели длины ПЗО и площади ДЗН, нами не было обнаружено отличий у больных ПЭГ — носителей различных генотипов полиморфизмов BsmI, ApaI, TaqI и FokI гена VDR. В то же время при оценке центральной толщины роговицы было выявлено, что носители ff-генотипа полиморфизма FokI имели более тонкую роговицу, чем носители F-аллеля (502,05 ± 141,72 и 547 ± 37,97 мкм соответственно, p < 0,01). Такую закономерность, вероятно, можно объяснить особенностями VDR-белка при полиморфизме FokI. Известно, что полиморфизм FokI (rs10735810) находится в кодирующем ре гионе гена VDR, определяет структуру VDR-белка и рассматривается как независимый маркер в гене рецептора витамина D [12, 26]. При этом установлено, что короткая форма VDR-белка (424 аминокислоты, соответствует F-аллели) обладает более высокой (в 1,7 раза) транскрипционной активностью, чем длинная (427 аминокислот, соответствует f-аллели), что, возможно, может повлиять на транскрипционном и посттрансляционном уровнях на синтез и функционирование ряда веществ (включая различные типы коллагена, матриксные металлопротеиназы, трансформирующие факторы роста), имеющих значение в патогенезе как ПОУГ, так и ПЭГ [11].

Оценивая связь ПЭГ с изучаемыми полиморфизмами гена VDR, мы установили, что носительство bb- и Bb-генотипов полиморфизма BsmI гена VDR обусловливает увеличение риска ПЭГ в 8,24 и 3,9 раза соответственно; наличие ff-генотипа полиморфизма FokI — в 2,3 раза, что позволяет выделить данные генотипы как неблагоприятные по развитию глаукомного процесса. Предполагают, что полиморфизм BsmI, находящийся в нетранслируемом 3´-регионе, способен оказывать влияние на функцию рецептора витамина D и, таким образом, может быть связан с развитием заболеваний вследствие сцепления с неизвестными важными аллельными областями, локализованными отдалённо или в соседнем гене. Исследователи также не исключают возможности, что полиморфизмы, находящиеся в нетранслируемом регионе гена VDR, так же как и FokI-полиморфизм (ff-генотип), могут оказывать влияние на стабильность мРНК, транскрибируемой с гена рецептора витамина D, способствуя тем самым развитию ряда заболеваний, в том числе органа зрения [12, 26].

Выводы

В результате проведённого нами исследования установлено, что у больных ПЭГ европейского происхождения, жителей Санкт-Петербурга и Ленинградской области, концентрация 25(OH)D в сыворотке крови в основном соответствует дефициту или тяжёлому дефициту витамина D и не связана с носительством различных генотипов полиморфизмов BsmI, ApaI, TaqI и FokI гена рецептора витамина D.

Продемонстрировано наличие ассоциации носительства ff-генотипа полиморфизма FokI гена рецептора витамина D с меньшими значениями показателя центральной толщины роговицы.

Впервые найдена ассоциация носительства bb- и Bb-генотипов полиморфизма BsmI, а также ff-генотипа полиморфизма FokI гена VDR с риском ПЭГ.

Об авторах

Инесса Станиславовна Белецкая

ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова» Минздрава России

Автор, ответственный за переписку.
Email: glaziki@list.ru

врач-офтальмолог

Россия, Санкт-Петербург

Сергей Юрьевич Астахов

ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова» Минздрава России

Email: astakhov73@mail.ru

д-р мед. наук, профессор, заведующий кафедрой офтальмологии с клиникой

Россия, Санкт-Петербург

Татьяна Леонидовна Каронова

ФБГУ «НМИЦ им. В.А. Алмазова» Минздрава России

Email: karonova@mail.ru

д-р мед. наук, заведующая НИЛ Клинической эндокринологии Института эндокринологии

Россия, Санкт-Петербург

Ольга Владимировна Галкина

ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова» Минздрава России

Email: ovgalkina@mail.ru

канд. биол. наук, доцент, заведующая лабораторией биохимического гомеостаза Научно-исследовательского института нефрологии

Россия, Санкт-Петербург

Евдокия Олеговна Богданова

ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова» Минздрава России

Email: evdokia.bogdanova@gmail.com

младший научный сотрудник лаборатории биохимического гомеостаза Научно-исследовательского института нефрологии

Россия, Санкт-Петербург

Евгений Леонидович Акопов

ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова» Минздрава России

Email: elacop@mail.ru

канд. мед. наук, доцент кафедры офтальмологии с клиникой

Россия, Санкт-Петербург

Александра Анатольевна Козырева

ФБГУ «НМИЦ им. В.А. Алмазова» Минздрава России

Email: fairb@yandex.ru

старший научный сотрудник Института молекулярной биологии и генетики

Россия, Санкт-Петербург

Список литературы

Дополнительные файлы