Сравнение методов выявления биопленочного синдрома при бактериальном вагинозе
- Авторы: Шалепо К.В.1, Спасибова Е.В.1, Крысанова А.А.1, Хуснутдинова Т.А.1, Будиловская О.В.1, Сторожева К.В.1, Тапильская Н.И.1, Савичева А.М.1, Коган И.Ю.1
-
Учреждения:
- ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта»
- Выпуск: № 7 (2025)
- Страницы: 121-129
- Раздел: Оригинальные статьи
- URL: https://journals.eco-vector.com/0300-9092/article/view/689013
- DOI: https://doi.org/10.18565/aig.2025.117
- ID: 689013
Цитировать
Полный текст



Аннотация
При бактериальном вагинозе Gardnerella vaginalis и Fannyhessea vaginae образуют высокоструктурированные плотные биопленочные консорциумы. Ключевые клетки являются маркерами биопленочной организации бактериальных сообществ.
Цель: Сравнить микробиологические методы выявления биопленочного синдрома при бактериальном вагинозе.
Материалы и методы: Обследованы 28 женщин с жалобами на вагинальные выделения. Клиническим материалом служило отделяемое влагалища. Использовали метод микроскопии препаратов с окраской по Граму и метиленовым синим, а также метод флуоресцентной гибридизации in situ (FISH или РиГинаМ). Для молекулярного исследования использовали тест «Фемофлор».
Результаты: Диагноз бактериального вагиноза при исследовании по Нудженту установлен у 89,3% (25/28) женщин. Как при микроскопической оценке микробиоценоза влагалища с использованием анилиновых красителей, так и при оценке методом РиГинаМ получены одинаковые результаты (отношение Л:Э менее 4:1, обнаружены ключевые клетки). Лишь в трех случаях всеми методами ключевые клетки не были обнаружены. У 25 пациенток с диагностированным бактериальным вагинозом тестом «Фемофлор» во всех клинических материалах были обнаружены G. vaginalis со средним логарифмом 7,55, в 22 случаях были обнаружены F. vaginae. В трех случаях физиологического микробиоценоза влагалища общая бактериальная масса была в основном представлена лактобациллами. У этих женщин обнаружены G. vaginalis, но общая бактериальная масса их была низкой (3,6; 4,1 и 6,8 lg), F. vaginae обнаружена лишь в одном случае (2,1 lg).
Заключение: Ключевые клетки как маркер биопленочного бактериального вагиноза выявляются как при окраске препаратов по Граму, метиленовым синим, так и методом РиГинаМ. Микроскопический метод с окраской анилиновыми красителями не дифференцирует виды бактерий, входящих в состав ключевой клетки; для метода РиГинаМ необходимы специфические зонды, позволяющие определить вид микроорганизма. Метод мультиплексной ПЦР в режиме реального времени может быть использован для диагностики бактериального вагиноза в сочетании с методами микроскопии.
Полный текст

Об авторах
К. В. Шалепо
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта»
Автор, ответственный за переписку.
Email: 2474151@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-3002-3874
к.б.н., с.н.с. группы экспериментальной микробиологии
Россия, Санкт-ПетербургЕ. В. Спасибова
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта»
Email: elena.graciosae@gmail.com
ORCID iD: 0009-0002-6070-4651
врач-бактериолог лаборатории клинической микробиологии
Россия, Санкт-ПетербургА. А. Крысанова
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта»
Email: krusanova.anna@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-4798-1881
к.м.н., с.н.с. группы экспериментальной микробиологии
Россия, Санкт-ПетербургТ. А. Хуснутдинова
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта»
Email: husnutdinovat@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-2742-2655
к.м.н., с.н.с. группы экспериментальной микробиологии
Россия, Санкт-ПетербургО. В. Будиловская
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта»
Email: o.budilovskaya@gmail.com
ORCID iD: 0000-0001-7673-6274
к.м.н., с.н.с. группы экспериментальной микробиологии
Россия, Санкт-ПетербургК. В. Сторожева
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта»
Email: kvstorozheva@mail.ru
ORCID iD: 0009-0005-8954-0234
аспирант
Россия, Санкт-ПетербургН. И. Тапильская
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта»
Email: tapnatalia@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-5309-0087
д.м.н., профессор, в.н.с. отдела репродукции
Россия, Санкт-ПетербургА. М. Савичева
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта»
Email: savitcheva@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-3870-5930
д.м.н., профессор, заслуженный деятель науки РФ, заведующая отделом медицинской микробиологии
Россия, Санкт-ПетербургИ. Ю. Коган
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии имени Д.О. Отта»
Email: ovr@ott.ru
ORCID iD: 0000-0002-7351-6900
чл.-корр. РАН, д.м.н., профессор, директор
Россия, Санкт-ПетербургСписок литературы
- Peebles K., Velloza J., Balkus J.E., McClelland R.S., Barnabas R.V. High global burden and costs of bacterial vaginosis: a systematic review and meta-analysis. Sex. Transm. Dis. 2019; 46(5): 304-11. https://dx.doi.org/10.1097/OLQ.0000000000000972
- Muzny C.A., Balkus J., Mitchell C., Sobel J.D., Workowski K., Marrazzo J. et al. Diagnosis and management of bacterial vaginosis: summary of evidence reviewed for the 2021 Centers for Disease Control and Prevention Sexually Transmitted Infections Treatment Guidelines. Clin. Infect. Dis. 2022; 74(Suppl. 2): S144-51. https://dx.doi.org/10.1093/cid/ciac021
- Yudin M.H., Money D.M. No. 211 – Screening and management of bacterial vaginosis in pregnancy. J. Obstet. Gynaecol. Can. 2017; 39(8): e184-91. https://dx.doi.org/10.1016/j.jogc.2017.04.018
- Workowski K.A., Bolan G.A.; Centers for Disease Control and Prevention. Sexually transmitted diseases treatment guidelines, 2015. MMWR Recomm. Rep. 2015; 64(RR-03): 1-137.
- Ison C.A., Hay P.E. Validation of a simplified grading of Gram stained vaginal smears for use in genitourinary medicine clinics. Sex. Transm. Infect. 2002; 78(6): 413-5. https://dx.doi.org/10.1136/sti.78.6.413
- Coleman J.S., Gaydos C.A. Molecular diagnosis of bacterial vaginosis: an update. J. Clin. Microbiol. 2018; 56(9): e00342-18. https://dx.doi.org/10.1128/JCM.00342-18
- Swidsinski A., Mendling W., Loening-Baucke V., Ladhoff A., Swidsinski S., Hale L.P. et al. Adherent biofilms in bacterial vaginosis. Obstet. Gynecol. 2005; 106(5 Pt 1): 1013-23. https://dx.doi.org/10.1097/ 01.aog.0000183594.45524.d2
- Hardy L., Jespers V., Dahchour N., Mwambarangwe L., Musengamana V., Vaneechoutte M. et al. Unravelling the bacterial vaginosis-associated biofilm: a multiplex Gardnerella vaginalis and Atopobium vaginae fluorescence in situ hybridization assay using peptide nucleic acid probes. PLOS One. 2015; 10(8): e0136658. https://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0136658
- Abou Chacra L., Fenollar F., Diop K. Bacterial vaginosis: what do we currently know? Front. Cell. Infect. Microbiol. 2022; 11: 672429. https://dx.doi.org/10.3389/fcimb.2021.672429
- Gardner H.L., Dukes C.D. Haemophilus vaginalis vaginitis: a newly defined specific infection previously classified non-specific vaginitis. Am. J. Obstet. Gynecol. 1955; 69(5): 962-76. https://dx.doi.org/10.1016/ 0002-9378(55)90095-8
- Vaneechoutte M., Guschin A., Van Simaey L., Gansemans Y., Van Nieuwerburgh F., Cools P. Emended description Gardnerella vaginalis and description Gardnerella leopoldii sp. nov., Gardnerella piotii sp. nov. and Gardnerella swidsinskii sp. nov., with delineation of 13 genomic species within the genus Gardnerella. Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2019; 69(3): 679-87. https://dx.doi.org/10.1099/ijsem.0.003200
- Крысанова А.А., Гущин А.Е., Савичева А.М. Значение определения генотипов Gardnerella vaginalis в диагностике рецидивирующего бактериального вагиноза. Медицинский алфавит. 2021; 30: 48-52. [Krysanova A.A., Gushchin A.E., Savicheva A.M. The importance of determining Gardnerella vaginalis genotypes in the diagnosis of recurrent bacterial vaginosis. Medical Alphabet. 2021; 30: 48-52 (in Russian)]. https://dx.doi.org/10.33667/ 2078-5631-2021-30-48-52
- Swidsinski A., Doerffel Y., Loening-Baucke V., Swidsinski S., Verstraelen H., Vaneechoutte M. et al. Gardnerella biofilm involves females and males and is transmitted sexually. Gynecol. Obstet. Invest. 2010; 70(4): 256-63. https://dx.doi.org/10.1159/000314015
- Swidsinski A., Loening-Baucke V., Swidsinski S., Sobel J.D., Dörffel Y., Guschin A. Clue cells and pseudo clue cells in different morphotypes of bacterial vaginosis. Front. Cell. Infect. Microbiol. 2022; 12: 905739. https://dx.doi.org/10.3389/fcimb.2022.905739
- Swidsinski A., Amann R., Guschin A., Swidsinski S., Loening-Baucke V., Mendling W. et al. Polymicrobial consortia in the pathogenesis of biofilm vaginosis visualized by FISH. Historic review outlining the basic principles of the polymicrobial infection theory. Microbes Infect. 2024; 26(8): 105403. https://dx.doi.org/10.1016/j.micinf.2024.105403
- Oliveira R., Almeida C., Azevedo N.F. Detection of microorganisms by fluorescence in situ hybridization using peptide nucleic acid. Methods Mol. Biol. 2020; 2105: 217-30. https://dx.doi.org/10.1007/ 978-1-0716-0243-0_13
- Савичева А.М. Современные представления о лабораторной диагностике репродуктивно значимых инфекций у женщин репродуктивного возраста. Мнение эксперта. Вопросы практической кольпоскопии. Генитальные инфекции. 2022; (3): 34-9. [Savicheva A.M. Modern ideas about the laboratory diagnosis of reproductively significant infections in women of reproductive age. Expert opinion. Issues of Practical Colposcopy & Genital Infections. 2022; 3: 34-9 (in Russian)]. https://dx.doi.org/10.46393/27826392_2022_3_34
- Савичева А.М., Крысанова А.А., Шалепо К.В., Спасибова Е.В., Будиловская О.В., Хуснутдинова Т.А., Тапильская Н.И., Коган И.Ю., Свидзинский А.В., Свидзинская С. Применение метода флуоресцентной гибридизации in situ в диагностике бактериального вагиноза. Акушерство и гинекология. 2023; 12: 68-77. [Savicheva A.M., Krysanova A.A., Shalepo K.V., Spasibova E.V., Budilovskaya O.V., Khusnutdinova T.A., Tapilskaya N.I., Kogan I.Yu., Swidsinski A.V., Swidsinski S. Application of fluorescent in situ hybridization in the diagnosis of bacterial vaginosis. Obstetrics and Gynecology. 2023; (12): 68-77 (in Russian)]. https://dx.doi.org/10.18565/aig.2023.129
- Randjelovic I., Moghaddam A., Freiesleben de Blasio B., Moi H. The role of polymorphonuclear leukocyte counts from urethra, cervix, and vaginal wet mount in diagnosis of nongonococcal lower genital tract infection. Infect. Dis. Obstet. Gynecol. 2018; 2018: 8236575. https://dx.doi.org/10.1155/2018/8236575
- Кира Е.Ф. Бактериальный вагиноз. М.: МИА; 2012. 470 c. [Kira E.F. Bacterial vaginosis. Moscow: MIA; 2012. 470 p. (in Russian)].
- Amsel R., Totten P.A., Spiegel C.A., Chen K.C., Eschenbach D., Holmes K.K. Nonspecific vaginitis. Diagnostic criteria and microbial and epidemiologic associations. Am. J. Med. 1983; 74(1): 14-22. https://dx.doi.org/10.1016/ 0002-9343(83)91112-9
- Nugent R.P., Krohn M.A., Hillier S.L. Reliability of diagnosing bacterial vaginosis is improved by a standardized method of gram stain interpretation. J. Clin. Microbiol. 1991; 29(2): 297-301. https://dx.doi.org/10.1128/ jcm.29.2.297-301.1991
Дополнительные файлы
