ГЕНОТИПИРОВАНИЕ ЭМБРИОНОВ С ПОМОЩЬЮ ФРАГМЕНТНОГО STR-АНАЛИЗА ПОСЛЕ ПРОВЕДЕНИЯ ПОЛНОГЕНОМНОЙ АМПЛИФИКАЦИИ


Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация

Цель. Разработать метод определения материнского или отцовского происхождения хромосомных анеуплоидий эмбриона с помощью STR-анализа у пациентов программ вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ). Материалы и методы. Разработка велась с использованием материала биопсии трофэктодермы эмбрионов 58 пар пациентов (116 человек). Предимплантационное генетическое тестирование на анеуплоидии (ПГТ-А) и моногенные заболевания (ПГТ-М) осуществляли с помощью высокопроизводительного секвенирования. Определение происхождения анеуплоидий проводили фрагментным анализом STR-маркеров. Результаты. После ПГТ-А анеуплоидии были выявлены у 67 эмбрионов (41%); эуплоидными были 65 (40%); мозаичные формы были обнаружены у 28 (17%) эмбрионов. Были разработаны праймеры для анализа хромосом 1, 3, 4, 5, 6, 7, 9, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 19, 22 и X. Проведенный анализ (16-я хромосома (n=7 эмбрионов), 19-я хромосома (n=5 эмбрионов) и 22-я хромосома (n=8 эмбрионов)) показал, что с помощью данного подхода можно идентифицировать анеуплоидии как материнского, так и отцовского происхождения. Заключение. Показана принципиальная технологическая возможность проведения фрагментного STR-анализа с целью генотипирования эмбрионов с использованием различных продуктов полногеномной амплификации. Это позволяет проводить ПГТ-А и ПГТ-М совместно с генотипированием эмбрионов без необходимости повторных биопсий. Изучение влияния родительского вклада в развитие анеуплоидий эмбрионов в будущем позволит выбрать оптимальную тактику ведения пациентов с неоднократными неудачными попытками ВРТ и невынашиванием беременности в анамнезе.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Алексей Николаевич ЕКИМОВ

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России

Email: a_ekimov@oparina4.ru
врач лабораторный генетик лаборатории молекулярно-генетических методов Москва, Россия

Наталья Владимировна АЛЕКСАНДРОВА

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России

Email: alexnat1@yandex.ru
д.м.н., старший научный сотрудник НОЦ ВРТ с клиническим отделением имени Ф. Паулсена Москва, Россия

Екатерина Сергеевна ШУБИНА

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России

Email: e_shubina@oparina4.ru
зав. лабораторией анализа геномных данных Москва, Россия

Ольга Владимировна РИТЧЕР

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России

Email: o_ritcher@oparina.ru
врач клинической лабораторной диагностики лаборатории молекулярно-генетических методов Москва, Россия

Андрей Юрьевич ГОЛЬЦОВ

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России

Email: andrey.goltsov@gmail.com
научный сотрудник лаборатории молекулярно-генетических методов Москва, Россия

Татьяна Алексеевна НАЗАРЕНКО

ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России

Email: t_nazarenko@oparina4.ru
д.м.н., профессор, директор института репродуктивной медицины Москва, Россия

Список литературы

  1. Faramarzi A., Khalili M.A., Ashourzadeh S. Oocyte morphology and embryo morphokinetics in an intra-cytoplasmic sperm injection programme. Is there a relationship? Zygote. 2017; 25(2):190-6. https://dx.doi.org/10.1017/ S0967199417000041.
  2. El-Danasouri I., Sterzik K., Rinaldi L., Pacchiarotti A., DeSanto M., Selman H. Effect of transferring a morphologically impaired embryo with a good quality embryo on the pregnancy and implantation rates. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci. 2016; 20(3): 394-8.
  3. Dahdouh E.M., Balayla J., Garcia-Velasco J.A. Comprehensive chromosome screening improves embryo selection: a meta-analysis. Fertil. Steril. 2015; 104(6): 1503-12. https://dx.doi.org/10.1016/j.fertnstert.2015.08.038.
  4. Minasi M.G., Colasante A., Riccio T., Ruberti A., Casciani V., Scarselli F. et al. Correlation between aneuploidy, standard morphology evaluation and morphokinetic development in 1730 biopsied blastocysts: a consecutive case series study. Hum. Reprod. 2016; 31(10): 2245-54. https://dx.doi.org/10.1093/ humrep/dew18.
  5. Бейк Е.П., Сыркашева А.Г., Долгушина Н.В. Эффективность программ вспомогательных репродуктивных технологий у пациенток позднего репродуктивного возраста. Гинекология. 2018; 20(1): 109-12.
  6. Munné S., Alikani M., Ribustello L., Colls P., Martmez-Ortiz P.A., McCulloh D.N. ; Referring Physician Group. Euploidy rates in donor egg cycles significantly differ between fertility centers. Hum. Reprod. 2017; 32(4): 743-9. https://doi. org/10.1093/humrep/dex031.
  7. Rabinowitz M., Ryan A., Gemelos G., Hill M., Baner J., Cinnioglu C. et al. Origins and rates of aneuploidy in human blastomeres. Fertil. Steril. 2012; 97(2): 395-401. https://dx.doi.org/10.1016/j. fertnstert.2011.11.034.
  8. Handyside A.H., Montag M. Multiple meiotic errors caused by predivision of chromatids in women of advanced maternal age undergoing in vitro fertilisation. Eur. J. Hum. Genet. 2012; 20(7): 742-7. https://dx.doi.org/10.1038/ ejhg.2011.272.
  9. Назаренко Т.А. Эндокринные факторы женского и мужского бесплодия. Принципы гормонального лечения. М.: МИА; 2017.
  10. Zhou Z., Ma Y.L., Li Q., Zhang Y., Huang Y.H., Tu Z.H. et al. Clinical application of oligo array-CGH for detecting balanced translocations in preimplantation genetic diagnosis. Int. J. Clin. Exp. Pathol. 2017; 10(7): 7821-35. eCollection 2017.
  11. Daser A., Thangavelu M., Pannell R., Forster A., Sparrow L., Chung G. et al. Interrogation of genomes by molecular copy-number counting (MCC). Nat Methods. 2006; 3(6): 447-53. https://dx.doi.org/10.1038/nmeth880.
  12. Treff N.R., Tao X., Ferry K.M., Su J., Taylor D., Scott R.T. Development and validation of an accurate quantitative real-time polymerase chain reactionbased assay for human blastocyst comprehensive chromosomal aneuploidy screening. Fertil. Steril. 2012; 97(4): 819-24. 10. https://dx.doi.org/1016/j. fertnstert.2012.01.115.
  13. Fiorentino F., Biricik A., Bono S., Spizzichino L., Cotroneo E., Cottone G. et al. Development and validation of a next-generation sequencing-based protocol for 24-chromosome aneuploidy screening of embryos. Fertil. Steril. 2014; 101(5): 1375-82. https://dx.doi.org/10.1016/j.fertnstert.2014.01.051.
  14. Aleksandrova N., Shubina E., Ekimov A., Kodyleva T., Mukosey I., Makarova N., Kulakova E., Levkov L., Trofimov D., Sukhikh G. Comparison of the results of preimplantation genetic screening obtained by a-CGH and NGS methods from the same. Gynecol. Endocrinol. 2016; 32(Suppl. 2): 1-4. https://dx.doi.org/10. 1080/09513590.2016.1232892.
  15. Александрова Н.В., Шубина Е.С., Екимов А.Н., Кодылева Т.А., Мукосей И.С., Макарова Н.П., Кулакова Е.В., Левков Л.А., Барков И.Ю., Трофимов Д.Ю., Сухих Г.Т. Молекулярная биология. 2017; 51(2): 308-13. https://dx.doi.org/10.7868/ S0026898417010025.
  16. Demko Z.P., Simon A.L., McCoy R.C., Petrov D.A., Rabinowitz M. Effects of maternal age on euploidy rates in a large cohort of embryos analyzed with 24-chromosome single-nucleotide polymorphism-based preimplantation genetic screening Fertil. Steril. 2016; 105(5): 1307-13. https://dx.doi. org/10.1016/j.fertnstert.2016.01.025.
  17. McCoy R.C., Demko Z.P., Ryan A., Banjevic M., Hill M., Sigurjonsson S. et al. Evidence of selection against complex mitotic-origin aneuploidy during preimplantation development. PLOS Genet. 2015; 11(10): e1005601. https:// dx.doi.org/10.1371/journal.pgen.1005601.
  18. Fragouli E., Wells D. Aneuploidy in the human blastocyst. Cytogenet. Genome Res. 2011; 133(2-4): 149-59. https://dx.doi.org/10.1159/000323500.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© ООО «Бионика Медиа», 2021