Валидация методики количественного определения суммы флавоноидов в траве астрагала шерстистоцветкового (Astragalus dasyanthus L.)

Основной группой действующих веществ астрагала шерстистоцветкового (Astragalus dasyanthus L.) являются флавоноиды, среди которых преобладает гиперозид. Разработка достаточно точной и простой методики количественного определения содержания флавоноидов, а также ее валидация являются актуальной проблемой. Цель работы. Валидация методики количественного определения суммы флавоноидов в траве астрагала шерстистоцветкового. Материал и методы. Объектом исследования явилась трава астрагала шерстистоцветкового. Определены оптимальные условия экстрагирования суммы флавоноидов из сырья: степень измельчения сырья - 1 мм, экстрагент - спирт этиловый 70%-ный, соотношение сырье-экстрагент 1:100, нагревание в течение 45 мин. При изучении условий спектрофотометрирования установлено, что оптимальным является использование 2 мл 5%-ного раствора алюминия хлорида. Устойчивое окрашивание извлечений из сырья с алюминия хлоридом наступает через 15 мин и сохраняется в течение 1,5 ч, что достаточно для проведения анализа. Результаты. Валидация методики проведена по параметрам линейности, повторяемости, воспроизводимости и правильности методики. Установлено, что в пределах измерений концентраций (начиная с оптической плотности 0,33 до оптической плотности 0,89) зависимость содержания гиперозида от массы навески сырья носит линейный характер. Повторяемость методики определяли на одном образце сырья в шести повторностях. Критерий приемлемости, выражаемый величиной относительности стандартного отклонения, составил 4,38%, что свидетельствует о прецизионности методики в условиях повторяемости. Определение воспроизводимости методики выполняли два исследователя. Изучение проводили на трех образцах в трех повторностях. Относительное стандартное отклонение составило 4,67%, что указывает на прецизионность методики в условиях воспроизводимости. Правильность методики устанавливали измерением содержания гиперозида в растворах, полученных путем добавления необходимого количества стандартного раствора гиперозида (0,25; 0,5 мл) к исследуемому раствору. В разработанной методике процент восстановления колеблется от 98,15 до 102,35%, его средняя величина составляет 100,36%, а также отсутствует систематическая ошибка, относительная неопределенность при доверительной вероятности 0,95 не превышает 2,89%. Выводы. Разработанная методика количественного определения флавоноидов в траве астаргала шерстистоцветкового может быть использована для стандартизации сырья «Трава астрагала шерстистоцветкового» по содержанию флавоноидов.

астрагал шерстистоцветковый, флавоноиды, спекгрофотометрический метод, валидация методики