Определение свободнорадикальных реакций в цельной крови крыс Wistar при стресс-индуцированной физической нагрузке

Цель исследования - определение свободнорадикальных реакций в цельной крови крыс Wistar при стресс-индуцированной физической нагрузке. Материал и методы. Объект исследования - цельная кровь крыс-самцов Wistar. Крыс из опытной группы подвергли принудительному плаванию в аквариуме. Эксперимент проводился по Порсольту при температуре воды 25 °С. Время плавания 40 мин определено экспериментальным путем после моделирования стресса. С помощью спонтанной люминол-зависимой хемилюминесценции на биохемилюминометре БХЛМ 3606М определяли значения максимума интенсивности свечения (Imax) и скорости его роста (Ltg). Скорость свободнорадикальной реакции вычисляли по формуле, описанной Ю.А. Владимировым с соавт. (2011). Результаты. При стресс-индуцированной физической нагрузке значение Imax достоверно увеличивается в 1,09 раза (р < 0,05), а значение Ltg достоверно снижается в 4,65 раза (р < 0,05). Между указанными параметрами наблюдается линейная зависимость, описанная уравнением Imax = 128,411Ltg, где 128,411 - коэффициент, характеризующий чувствительность анализатора БХЛМ 3606М к излучению фотоэлектронного умножителя. С помощью этого уравнения установлены константы скоростей изученных свободнорадикальных реакций: константа первой реакции k1 = 11010 (моль/дм3)-1 · с-1, которая является константой скорости образования пероксинитрита, константа второй реакции k2 = 3,2107 (моль/дм3)-1 · с-1 - константа скорости восстановления глутатион-тиильного радикала до восстановленной формы глутатиона. Выводы. При стресс-индуцированной физической нагрузке наблюдаются реакция образования пероксинитрита из радикала монооксида азота, а также реакция восстановления глутатион-тиильного радикала до восстановленной формы глутатиона. Впервые свободнорадикальные реакции, имеющие место при стресс-индуцированной физической нагрузке, определены с помощью зависимости скорости свечения от соотношения максимума интенсивности хемилюминесценции к коэффициенту, характеризующему чувствительность анализатора БХЛМ 3606М к излучению фотоэлектронного умножителя. Впервые уравнение, описанное Ю.А. Владимировым с соавт. (2011), использовано при исследовании свободнорадикальных реакций с помощью анализаторов БХЛМ 360*. В процессе хемилюминесцентного исследования изучаемые вещества не разрушаются, вследствие чего ход реакций не изменяется. Кроме того, хемилюминесценция обладает высокой чувствительностью, что весьма важно при регистрации высокореакционных радикалов.