Влияние эндогенных полифенолов, фотопериода и минерального состава питательной среды на формирование каллусной ткани реликтовых голосеменных растений Sequoia sempervirens (D.Don) Endl.

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация

Актуальность. Sequoia sempervirens (D.Don) Endl. – самые высокие реликтовые растения-долгожители, характеризующиеся ограниченным ареалом произрастания. Ценная древесина секвойи способна накапливать уникальные вторичные метаболиты, не имеющие синтетических аналогов. Создать стрессоустойчивые и высокопродуктивные растения можно с использованием методов клеточной биотехнологии, в частности, клеточной селекции in vitro, которая проводиться на каллусной культуре. Поэтому необходимо разрабатывать технологию in vitro быстрого получения хорошо пролиферирующей каллусной ткани с повышенным содержанием вторичных метаболитов.

Цель исследования – изучить влияние минерального состава питательной среды, фотопериода и эндогенных полифенолов на формирование каллусной ткани секвойи (Sequoia sempervirens (D.Don) Endl.) in vitro.

Материал и методы. Объект исследования – растения Sequoia sempervirens (D.Don) Endl.  Каллусную ткань получали из сегментов хвои и междоузлий стебля, которые изолировали из интактных растений. Экспланты культивировали на питательной среде МС и WPM, содержащей 2,5 мг/л БАП и 2,5 мг/л 2,4-Д. Локализацию фенольных соединений изучали в хвое, стеблях, апикальных почках растений секвойи, а также в каллусной ткани, полученной на питательной среде с разным минеральным составом и при различных режимах освещения. Для этого применяли гистохимические методы: на сумму фенольных соединений материал окрашивали 0,08% растром реактива Fast Blue, для изучения локализации флаванов (катехины и проантоцианидины) использовали реакцию с ванилиновым реактивом в парах соляной кислоты.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

С. М. Зайцева

Российский государственный аграрный университет – МСХА имени К.А. Тимирязева

Автор, ответственный за переписку.
Email: smzaytseva@yandex.ru

к.б.н., доцент, кафедра биотехнологии

Россия, Москва

Е. А. Калашникова

Российский государственный аграрный университет – МСХА имени К.А. Тимирязева

Email: kalash0407@mail.ru

д.б.н., профессор, кафедра биотехнологии

Россия, Москва

Р. Н. Киракосян

Российский государственный аграрный университет – МСХА имени К.А. Тимирязева

Email: mia41291@mail.ru

к.б.н., доцент, кафедра биотехнологии

Россия, Москва

Список литературы

  1. Алексеева Г.М., Белодубровская Г.А., Блинова К.Ф., Гончаров М.Ю., Жохова Е.В. Фармакогнозия. Лекарственное сырье растительного и животного происхождения. Под ред. Г.П. Яковлева. Санкт-Петербург. СпецЛит. 2013.
  2. Носов А.М. Регуляция синтеза вторичных соединений в культуре клеток растений. Биология культивируемых клеток и биотехнология растений. Под ред. Р.Г. Бутенко. М.: Наука. 1991.
  3. Тюкавкина Н.А. Биофлавоноиды. М.: Издательский дом «Русский врач». 2002. 56 с.
  4. Буданова Е.В., Горленко К.Л., Киселев Г.Ю. Вторичные метаболиты растений: механизмы антибактериального действия и перспективы применения в фармакологии. Антибиотики и химиотерапия. 2019; 64: 5–6.
  5. Mamadalieva N.Z., Mamedov N.A. Taxus brevifolia a High-Value Medicinal Plant, as a Source of Taxol. Medicinal and Aromatic Plants of North America. Springer, Cham. 2020: 201–218.
  6. Zhang J., D'Rozariо A., Adams J.M. Sequoia maguanensis, a new Miocene relative of the coast redwood, Sequoia sempervirens, from China: Implications for paleogeography and paleoclimate. American Journal of Botany. 2015; 102(1). doi: 10.3732/ajb.1400347
  7. Laoué J., Fernandez C., Ormeño E. Plant Flavonoids in Mediterranean Species: A Focus on Flavonols as Protective Metabolites under Climate Stress. Plants. 2022; 11: 172.
  8. Запрометов М.Н. Фенольные соединения и их роль в жизни растения. LVI Тимирязевские чтения. М.: Наука. 1996. 45 с.
  9. Libby W.J. Cloning coast redwoods. California Agriculture. 1982; 36(8): 34–35.
  10. Soukupova J., Cvikrova M., Albrechtova J., Rock B.N., Eder J. Histochemical and Biochemical Approaches to the Study of Phenolic Compounds and Peroxidases in Needles of Norway Spruce (Picea abies). New Phytol. 2000; 146: 403414.
  11. Лакин Г.Ф. Биометрия: учеб. пособие для биол. спец. вузов. М.: Высшая школа. 1990. 352 с.
  12. Дубравина Г.А., Зайцева С.М., Загоскина Н.В. Изменения в образовании и локализации фенольных соединений при де-дифференциации тканей тисса ягодного и тисса канадского в условиях in vitro. Физиология растений. 2005; 52: 755–762.
  13. Калашникова, Е.А., Зайцева С.М., Доан Тху Тхуи, Киракосян Р.Н. Влияние регуляторов роста на морфогенетическую активность экспланотов Dioscorea nipponica Makino и образование полифенолов. Международный научно-исследовательский журнал. 2020; 6–2(96): 6–11.
  14. Загоскина Н.В., Дубравина Г.А., Алявина А.К., Гончарук Е.А. Влияние ультрофиолетовой (УФ-Б) радиации на образование и локализацию фенольных соединений в каллусных культурах чайного растения. Физиология растений. 2003; 50(2): 302–308.
  15. Zametov M.N. Nikolaeva T.N. The ability of isolated chloroplasts from bean leaves to carry out biosynthesis of phenolic compounds. 2003; 50(5): 699–702.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рис. 1. Образование первичной каллусной ткани в местах поранения: культивирование эксплантов в темноте на питательных средах WPM (а) и МС (б); культивирование эксплантов на свету на питательных средах WPM (в) и МС (г)

Скачать (166KB)
3. Рис. 2. Формирование каллусной ткани на питательных средах с разным содержанием минеральных веществ и при различных режимах освещения: а – на питательной среде МС в темноте; б – на питательной среде WPM в темноте; в и г – на питательных средах МС и WPM на свету соответственно; д и е – каллусная ткань 3-го пассажа, культивируемая при 16-часовом фотопериоде на средах МС и WPM соответственно

Скачать (719KB)
4. Рис. 3. Инициация каллусной ткани S. sempervirens при культивировании на питательных средах МС (а) и WPM (б) и ее культивирование в течении 4 мес. (в) на свету в пробирках

Скачать (343KB)
5. Рис. 4. Влияние предобработки на формирование каллусной ткани и рост верхушечной меристемы

Скачать (225KB)
6. Рис. 5. Клетки каллусной ткани, полученной на питательных средах МС (а) и WPM (б)

Скачать (212KB)
7. Рис. 6. Локализация фенольных соединений в меристематических (а) и проводящих и покровных (б–в) тканях Sequoia, используемых в качестве эксплантов для инициирования каллусных культур: рекация на флаваны с ванилиновым реактивом (а, в) и суммарное содержание фенольных соединений с реактивом Fast Blue (б)

Скачать (203KB)
8. Рис. 7. Внешний вид каллусной ткани 3-го пассажа, полученной на среде WPM в чашках Петри в отсутствие света

Скачать (136KB)
9. Рис. 8. Локализация фенольных соединений при инициации первичной каллусной ткани на экспланте (а, б), в клетках первичной каллусной ткани (в) и каллуса третьего пассажа секвойи, культивируемой в отсутствие освещения: реакция на сумму растворимых фенольных соединений с реактивом Fast blue (а–г) и ванилиновым реактивом на локализацию флаванов (д, е)

Скачать (415KB)
10. Рис. 9. Локализация флаванов в клетках каллуса первого пассажа секвойи, культивируемой в присутствии освещения: при инициации первичного каллуса на экспланте (а), в каллусной культуре 3-го пассажа (б); реакция на суммарное содержание фенольных соединений с реактивом Fast blue в куллусной культуре 3-го пассажа (в)

Скачать (226KB)
11. Рис. 10. Каллусная ткань, полученная в присутствии освещения (а), локализация фенольных соединений при иницииации каллуса на экспланте (б) и в маложизнеспобной каллусной ткани после 3 мес. субкультивирования в присутствии освещения (в–д)

Скачать (405KB)

© ИД "Русский врач", 2023

Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах