Сравнительное хроматографическое и спектральное исследование алкалоидного состава биомассы культуры ткани и травы мачка жёлтого

Введение. Культура клеток и тканей растений является эффективной технологией получения различных вторичных метаболитов, в том числе и для использования в фармацевтической промышленности. Соединения, синтезированные в каллусных и суспензионных культурах, могут быть идентичны растительным, а выход вторичных метаболитов в некоторых случаях превосходит растительные источники. В этом отношении представляет большой интерес мачок желтый (Glaucium flavum Crantz.), который содержит глауцин, обладает уникальным противокашлевым действием и является источником получения целого ряда лекарственных препаратов.

Цель работы ‒ сравнительное фитохимическое исследование алкалоидного состава культуры ткани и травы мачка жёлтого.

Материал и методы. Каллусные культуры ткани мачка желтого (Glaucium flavum Crantz.) получены в условиях лаборатории Института фармации Казанского государственного медицинского университета. Трава мачка жёлтого, культивируемого на территории Ботанического сада Самарского университета, собрана в период цветения растений в 2021 г. Сравнительное исследование алкалоидного состава каллусной культуры и травы мачка желтого осуществляли методами люминесцентной микроскопии на микроскопе марки «Альтами» ЛЮМ-2 (Россия), тонкослойной хроматографии (ТСХ) на пластинках «Сорбфил-ПТСХ-АФ-А-УФ», а также спектрофотометрии. В качестве системы растворителей использовали смесь растворителей н-бутанол–уксусная кислота–вода 4:1:2. Детекцию разделенных веществ проводили просматриванием хроматографических пластинок в УФ-свете при длинах волн 366 и 254 нм с последующим проявлением реактивом Драгендорфа. Идентификацию выделенного глауцина гидрохлорида осуществляли на основании данных УФ-, ¹Н-ЯМР, ¹³С-ЯМР-спектроскопии. Спектры ЯМР ¹Н получали на приборе «JNM-ECX 400» (399,78 МГц), спектры ЯМР ¹³С – на приборе «JNM-ECX 400» (100,52 МГц). Спектры регистрировали с помощью спектрофотометра «Specord 40» (Analytik Jena AG, Германия) в диапазоне длин волн 190–500 нм.

Результаты. В ходе люминесцентного анализа культуры ткани мачка желтого (Glaucium flavum Crantz.), а также интактных растений отмечен характерный для изохинолиновых алкалоидов тип свечения. Методом ТСХ-анализа в образцах каллусных культур и надземной части мачка желтого обнаружены изохинолиновые алкалоиды, в том числе глауцин, однако при этом отмечено более низкое содержание глауцина в образце каллусной культуры по сравнению с таковым интактного растения. Спектрофотометрический анализ исследуемых образцов показал, что характер кривой поглощения у интактных растений и культур такни мачка жёлтого имеет как общие, так и отличительные признаки. УФ-спектр водно-спиртового извлечения из образца культуры ткани мачка жёлтого имеет схожий спектрофотометрический профиль, однако в нем содержится лишь один максимум поглощения (288 нм), совпадающий с таковым УФ-спектра водно-спиртового извлечения из травы данного растения.

Выводы. Окончательный вывод относительно содержания глауцина в исследуемых образцах культуры ткани мачка жёлтого можно будет сделать только в ходе препаративного выделения веществ из биомассы с использованием колоночной хроматографии.