Оценка профиля N-гликозилирования молекулы рекомбинантного фактора свертывания крови VIIа

Введение. Специфическая коагуляционная активность фактора свертывания крови УПа зависит от наличия в молекуле данного белка N-ацетилнейраминовой (сиаловой) кислоты и фосфатных остатков. В связи с этим в качестве одного из критериев эффективности и безопасности лекарственных препаратов, содержащих данный белок, необходимо подтверждение подлинности профиля гликозилирования. Вместе с тем возможная вариабильность посттрансляционных модификаций требует индивидуального подхода к их оценке в соответствии с требованиями и рекомендациями по сравнению биоподобных препаратов. Материал и методы. В качестве объектов исследования использовали оригинальный препарат «НовоСэвен», биоподобный лекарственный препарат «Коагил-VII» и европейский референсный образец Human coagulation factor Vila (rDNA) CRS. Для анализа олигосахаридной части применяли методы анионообменной хроматографии и высокоэффективной жидкостной хроматографии гидрофильного взаимодействия с флюоресцентным и масс-спектрометрическим детектированием. Результаты. В ходе исследования установлен основной набор модификаций молекул рекомбинантного фактора свертывания крови Vila, представленный комплексными биантенными олигосахаридами с незначительным присутствием триантенных структур. Для биоподобного лекарственного препарата наиболее характерной является модификация дисиалированной галактозилированной комплексной группой с одним остатком фукозы. Заключение. Оценка профиля N-гликозилирования рекомбинантного фактора свертывания крови Vila, основанная на сравнительном анализе биоподобного препарата, оригинального препарата и стандартного образца CRS выявила различия в количественном содержании гликанов при общем совпадении времен удерживания основных пиков всех образцов. Масс-спектрометрическое исследование позволило осуществить структурную интерпретацию полученных хроматографических данных. На примере биоподобного препарата показана необходимость использования при подтверждении подлинности гликопрофиля в качестве образца сравнения аттестованного установленным образом стандартного образца предприятия.

Эптаког альфа, профиль гликозилирования, подлинность, масс-спектрометрический анализ, стандартный образец