Частота выявления делеций AZF, мутаций CFTR и длинных аллелей CAG-повтора AR при первичной лабораторной диагностике в гетерогенной группе пациентов с мужским бесплодием

Введение. В качестве молекулярно-генетических причин бесплодия у мужчин диагностируют микроделеции в области AZF на Y-хромосоме, компаунд-гетерозиготы по тяжелой и мягкой мутациям CFTR, как маркеры предрасположенности - длинные аллели CAG-повтора гена андрогенового рецептора (AR). Зачастую проводят комплексную лабораторную диагностику, при которой одновременно определяют панель биохимических, иммунологических, цито- и молекулярно-генетических маркеров. Целью настоящей работы стало выявление молекулярно-генетических нарушений, которые целесообразно одновременно тестировать у мужчины с неустановленной на текущий момент формой бесплодия для повышения информативности лабораторной диагностики. Материалы и методы. Проведено ретроспективное исследование, в которое вошли 885пациентов с мужским бесплодием. Делеции AZF определяли с помощью мультиплексной ПЦР по 10 STS-маркерам (sY83, sY84, sY86, sY127, sY134, sY143, sY152, sY157, sY254, sY255) и двум контрольным локусам, SRY и AMEL, с детекцией в полиакриламидном геле. Мутации в гене CFTR F508del, CFTRdel2,3(21kb), I507del, 1677delTA, 2143delT, 2184insA, 394delTT, W1282X, G542X, N1303K, R334W и 5Твыявляли методом ПЦР и мини-секвенирования. Для определения длины CAG-повтора AR проводили фрагментный анализ флуоресцентно меченных ПЦР-продуктов на капиллярном секвенаторе 3500xl. Результаты. Делеции AZFвыявлены в 8,2% случаев. Больше всего делеций было обнаружено в субрегионе AZFc - 58,9%, доля делеций AZFa составила 5,5%, AZFb - 12,3%, сочетанных делеций двух и трех субрегионов - 23,3%. Гетерозиготное носительство тяжелых мутаций CFTR обнаружено в 4,7% случаев, самой частой из них была мутация F508del - 83,3%, затем следовали CFTRdel21kb (7,1%) и W1282X(4,8%). Частота мягкой мутации сплайсинга 5Тсоставила 5,3%, а ее встречаемость достоверно превышала таковую в ранее опубликованной контрольной выборке (р=0,002). Генотипирование AR показало, что самым частым аллелем был 21(CAG), доля которого в распределении частот составила 21,5%. Выявлено 7CAG-гетерозигот с синдромом Кляйнфельтера. Длинные аллели с 27 и более CAG-тринуклеотидами были определены в 7,5% случаев мужского бесплодия. Заключение. В гетерогенной группе пациентов с мужским бесплодием при проведении первичной комплексной лабораторной диагностики причин заболевания целесообразно тестировать делеции AZFи наиболее частые мутации CFTR, включающие F508del, CFTRdel21kb, 1677delTA, 2143delT, W1282X и 5Т. Анализ более широкого перечня частых мутаций CFTR оправдан лишь в отношении пациентов с верифицированным обструктивным бесплодием. Перспективно секвенирование панелей ассоциированных с бесплодием генов с помощью NGS-технологий.

мужское бесплодие, делеции AZF, мутации CFTR, ген AR, ДНК-диагност ика