Оценка эффективности и возможности оптимизации методики анализа уровня микро-РНК-371-3 (HSA-miR-371-3p) в плазме для диагностики и мониторинга эффекта терапии герминогенных опухолей у мужчин


Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация

Обоснование. Выбор оптимальной тактики лечения больных герминогенными опухолями (ГО) базируется на определении совокупности прогностических факторов. Практически все больные ГО с хорошим прогнозом могут быть излечены путем рационального сочетания лекарственного и хирургического методов. В то же время результаты лечения пациентов с плохим прогнозом остаются крайне неудовлетворительными. Одним из способов повышения эффективности терапии является поиск современных молекулярно-биологических факторов, способных оптимизировать и персонализировать лечебный подход. Цель исследования: создание системы ОТ-ПЦР (полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией) анализа миР-351-3, предварительная оценка диагностической эффективности анализа концентрации этой молекулы, определение возможности (ей) оптимизации технологии и перспектив внедрения в практику нового метода мониторинга ГО на основе ОТ-ПЦР-анализа миР-371-3. Методы. Дизайн, синтез и анализ системы ОТ-ПЦР детекции миР-371-3 были проведены с использованием отечественной реагентики, оценка диагностической ценности метода была проведена с использованием материала (плазмы) пациентов с верифицированным диагнозом ГО (n=13) и здоровых доноров (n=15). Для разработки метода специфической изоляции миР-371-1 из плазмы были использованы суперпарамагнитные частицы (СПМЧ) и ДНК-зонд, комплементарный миР-371-3. Результаты. Создана оригинальная система для количественного анализа миР-371-3 метдом ОТ-ПЦР (ttTR-PCR), показана аналитическая эффективность этой системы в широком диапазоне концентраций детектируемой молекулы. Проведена оценка концентрации миР-371-3 в плазме пациентов с ГО и здоровых доноров. Для увеличения чувствительности технологии в целом разработана и протестирована методика специфического выделения миР-371-3 из плазмы с помощью СПМЧ. Заключение. Качественная оценка миР-371-3 в плазме представляется перспективным методом мониторинга эффективности терапии ГО, но технология анализа этой молекулы требует оптимизации и масштабной клинической валидации.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

М. С Князева

Научный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Петрова; ООО «Онко-система»

Санкт-Петербург, Россия; Москва, Россия

В. А Загоруйко

Научный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Петрова; ООО «Онко-система»

Санкт-Петербург, Россия; Москва, Россия

Е. В Борисов

Научный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Петрова; ООО «Онко-система»

Санкт-Петербург, Россия; Москва, Россия

Е. И Сидина

Научный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Петрова; ООО «Онко-система»

Санкт-Петербург, Россия; Москва, Россия

Н. С Никифорова

Научный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Петрова; ООО «Онко-система»

Санкт-Петербург, Россия; Москва, Россия

М. А Слюсаренко

Научный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Петрова; ООО «Онко-система»

Санкт-Петербург, Россия; Москва, Россия

И. В Назарова

Научный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Петрова; ООО «Онко-система»

Санкт-Петербург, Россия; Москва, Россия

А. И Семенова

Научный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Петрова; ООО «Онко-система»

Санкт-Петербург, Россия; Москва, Россия

А. К Носов

Научный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Петрова; ООО «Онко-система»

Санкт-Петербург, Россия; Москва, Россия

С. А Проценко

Научный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Петрова; ООО «Онко-система»

Санкт-Петербург, Россия; Москва, Россия

А. В Малек

Научный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Петрова; ООО «Онко-система»

Email: anastasia@malek.com
к.м.н., зав. лабораторией субклеточных технологий 197758, Россия, Санкт-Петербург, пос. Песочный, ул. Ленинградская, 68

Список литературы

  1. Rajpert-De Meyts E, McGlynn K.A., Okamoto K, et al. Testicular germ cell tumours. Lancet. 2016;387(10029):1762-74. Doi: 10.1016/ S0140-6736(15)00991-5
  2. Einhorn L.H. Treatment of testicular cancer: A new and improved model. J Clin Oncol. 1990;8:1777-81. doi: 10.1200/JCO.1990.8.11.1777.
  3. Honecker F, Aparicio J., Berney D, et al. ESMO Consensus Conference on testicular germ cell cancer: diagnosis, treatment and follow-up. Ann Oncol. 2018;29(8):1658-86. Doi: 10.1093/ annonc/mdy217.
  4. Batool A., Karimi N., Wu X.N., et al. Testicular germ cell tumor: a comprehensive review. Cell Mol Life Sci. 2019;76(9):1713-27. Doi: 10.1007/ S00018-019-03022-7.
  5. Трякин А.А, Гладков О.А., Матвеев В.Б. и др. Практические рекомендации по лекарственному лечению герминогенных опухолей у мужчин. Практические рекомендации RUSSCO. 2016.
  6. Leao R, Ahmad A.E., Hamilton R.J. Testicular Cancer Biomarkers: A Role for Precision Medicine in Testicular Cancer. Clin Genitourin Cancer 2019;17(1):e176-83. Doi: 10.1016/]. clgc.2018.10.007.
  7. Narita T, Hatakeyama S., Yoneyama T, et al. Clinical implications of serum N- glycan profiling as a diagnostic and prognostic biomarker in germ-cell tumors. Cancer Med. 2017;6(4):739-48. doi: 10.1002/cam4.1035.
  8. Ellinger J, Wittkamp V., Albers P, et al. Cell-Free Circulating DNA: Diagnostic Value in Patients With Testicular Germ Cell Cancer. J Urol. 2009;181:363-371. doi: 10.1016/j.juro.2008.08.118.
  9. Cebotaru C.L., Olteanu E.D., Antone N.Z., et al. Circulating tumor cells in germ cell tumors: are those biomarkers of real prognostic value? A review. Med Pharm Reports. 2016;89(2):203-11. doi: 10.15386/cjmed-570.
  10. Tafrihi M., Hasheminasab E. MiRNAs: Biology, Biogenesis, their Web-based Tools, and Databases. MicroRNA. 2018. doi: 10.2174/221153660766 6180827111633.
  11. Wang J., Chen J., Sen S. MicroRNA as Biomarkers and Diagnostics. J Cell Physiol. 2016;231(1):25-30. doi: 10.1002/jcp.25056.
  12. Max K.E.A., Bertram K., Akat K.M., et al. Human plasma and serum extracellular small RNA reference profiles and their clinical utility. Proc. Natl. Acad. Sci. 2018;115(23):E5334-43. doi: 10.1073/pnas.1714397115.
  13. Izzotti A., Carozzo S., Pulliero A., et al. Extracellular MicroRNA in liquid biopsy: applicability in cancer diagnosis and prevention. Am J Cancer Res. 2016;6(7):1461-93.
  14. Toiyama Y, Okugawa Y, Fleshman J., et al. MicroRNAs as potential liquid biopsy biomarkers in colorectal cancer: A systematic review. Biochim Biophys. Acta - Rev Cancer. 2018;1870(2):274-82. doi: 10.1016/j.bbcan.2018.05.006.
  15. Kashyap D., Kaur H. Cell-free miRNAs as noninvasive biomarkers in breast cancer: Significance in early diagnosis and metastasis prediction. Life Sci. 2020;246:117417. Doi: 10.1016/j. lfs.2020.117417.
  16. Jiang M., Li X., Quan X., et al. Clinically Correlated MicroRNAs in the Diagnosis of Non-Small Cell Lung Cancer: A Systematic Review and MetaAnalysis. Biomed Res Int. 2018;2018:1-14. doi: 10.1155/2018/5930951.
  17. Git A., Dvinge H., Salmon-Divon M., et al. Systematic comparison of microarray profiling, real-time PCR, and next-generation sequencing technologies for measuring differential microRNA expression. RNA. 2010;16(5):991-1006. doi: 10.1261/rna.1947110.
  18. Faraldi M., Gomarasca M., Banfi G., Lombardi G. Free Circulating miRNAs Measurement in Clinical Settings: The Still Unsolved Issue of the Normalization. Adv Clin Chem. 2018;87:113-39. doi: 10.1016/bs.acc.2018.07.003.
  19. Palmer R.D., Murray M.J., Saini H.K., et al. Malignant Germ Cell Tumors Display Common MicroRNA Profiles Resulting in Global Changes in Expression of Messenger RNA Targets. Cancer Res. 2010;70(7):2911-23. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-09-3301.
  20. Dieckmann K.-P, Spiekermann M., Balks T, et al. MicroRNAs miR-371-3 in serum as diagnostic tools in the management of testicular germ cell tumours. Br J Cancer. 2012;107(10):1754-60. doi: 10.1038/bjc.2012.469.
  21. Myklebust M.P, Rosenlund B., Gjengsts P, et al. Quantitative PCR Measurement of miR-371a-3p and miR-372-p Is Influenced by Hemolysis. Front Genet. 2019;22;10:463. Doi: 10.3389/ fgene.2019.00463.
  22. Spiekermann M., Dieckmann K.-P, Balks T., Bullerdiek J., Belge G. Is relative quantification dispensable for the measurement of microRNAs as serum biomarkers in germ cell tumors? Anticancer Res. 2015;35(1):117-21.
  23. Dieckmann K.-P, Radtke A., Geczi L., et al. Serum Levels of MicroRNA-371a-3p (M371 Test) as a New Biomarker of Testicular Germ Cell Tumors: Results of a Prospective Multicentric Study. J Clin Oncol. 2019;37(16):1412-23. Doi: 10.1200/ JCO.18.01480.
  24. Benes V., Castoldi M. Expression profiling of microRNA using real-time quantitative PCR, how to use it and what is available. Methods. 2010;50:244-49 Doi: 10.1016/j. ymeth.2010.01.026.
  25. Androvic P, Valihrach L., Elling J., et al. Twotailed RT-qPCR: A novel method for highly accurate miRNA quantification. Nucleic Acids Res. 2017;45(15):1-13. doi: 10.1093/nar/gkx588.
  26. Korobkina E.A., Knyazeva M.S.P, Kil Y.V., et al. Comparative analysis of rt-qpcr based methodologies for m1crorna detection. Klin Lab Diagnostika. 2018;63(11):722-28. doi: 10.18821/0869- 2084-2018-63-11-722-728.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© ООО «Бионика Медиа», 2020