ОЦЕНКА АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТИ БАЦИЛЛЯРНОГО ПРОБИОТИКА BACILLUS SUBTILIS (ШТАММ 534)


Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация

Цель исследования. Уточнение филогенетического положения и определение антимикробного спектра и природы антибиотической активности бациллярного пробиотика Bacillus subtilis 534. Материалы и методы. Методом ПЦР исследовали ген 16S рРНК штамма 534. Секвенирование ДНК проводили на автоматическом секвенаторе Genetic Analyzer 3500 и сравнивали полученную последовательность с другими последовательностями в базах данных GenBank и Ribosomal Database Project. Антимикробную активность определяли в погруженной культуре штамма 534 методом диффузии в агар в отношении 17 тест-штаммов. Выделение антибиотика из культуральной жидкости проводили сорбцией на Amberlite XAD-2, десорбцией смесью н-бутанол-ацетон-вода с последующим упариванием и растворением в 60% водном этаноле, внесением раствора в колонку с силикагелем Kieselgel 60 и ступенчатой элюцией растворителями хлороформ-метанол. Активные фракции исследовали методом тонкослойной хроматографии с биоавтографией. Спектр УФ-поглощения определяли на спектрофотометре UV-1601 PC. Результаты. На основании анализа последовательности ДНК гена 16S рРНК, депонированной в международной базе GenBank под номером KU051696, подтверждена принадлежность штамма 534 к виду Bacillus subtilis. В условиях культивирования in vitro штамм 534 подавляет рост ряда штаммов Staphylococcus aureus (включая MRSA), S. epidermidis, S. haemolyticus, S. hominis, Bacillus pumilis, Micrococcus luteus, Klebsiella рneumoniae, Candida sp., Aspergillus niger, Saccharomyces cerevisiae. Установлено, что штамм B. subtilis 534 образует не менее трех антибиотиков. Заключение. Бациллярный пробиотик Bacillus subtilis 534 - основа препарата споробактерин, в условиях глубинного культивирования проявляет антибактериальную и противогрибковую активность. Химический анализ показал образование не менее трех антибиотиков, один из которых относится к полиенам, а именно к триенам.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Н. И ГАБРИЭЛЯН

Федеральный научный центр трансплантологии и искусственных органов им. академика В.И. Шумакова минздрава России

Email: labgso@mail.ru
д-р мед. наук, зав. отд. эндотоксикозов и гнойно-септических осложнений Федерального научного центра трансплантологии и искусственных органов им. академика В.И. Шумакова Минздрава России

Е. М ГОРСКАЯ

Федеральный научный центр трансплантологии и искусственных органов им. академика В.И. Шумакова минздрава России

Email: emg168@mail.ru
д-р мед. наук, ст. науч. сотр. отд. эндотоксикозов и гнойно-септических осложнений Федерального научного центра трансплантологии и искусственных органов им. академика В.И. Шумакова Минздрава России

Т. В КРУПЕНИО

Федеральный научный центр трансплантологии и искусственных органов им. академика В.И. Шумакова минздрава России

Email: ypsa89@mail.ru
лаборант-исследователь отд. эндотоксикозов и гнойно-септических осложнений Федерального научного центра трансплантологиии искусственных органов им. академика В.И. Шумакова Минздрава России

В. А ЗЕНКОВА

Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе

Email: ovefr@yandex.ru
канд. хим. наук, ст. науч. сотр. лаб. химического изучения биологически активных соединений микробного происхождения Научно-исследовательского института по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе РАН

Т. А ЕФИМЕНКО

Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе

Email: efimen@inbox.ru
науч. сотр. сектора поиска природных соединений, преодолевающих устойчивость бактерий отд. микробиологии Научноисследовательского института по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе

И. А МАЛАНИЧЕВА

Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе

Email: malanicheva.irina@yandex.ru
канд. биол. наук, ст. науч. сотр. сектора поиска природных соединений, преодолевающих устойчивость бактерий отд. микробиологии Научно-исследовательского института по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе

И. Г СУМАРУКОВА

Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе

Email: noks59@yandex.ru
науч. сотр. сектора поиска природных соединений, преодолевающих устойчивость бактерий отд. микробиологии Научно-исследовательского института по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе

О. В ЕФРЕМЕНКОВА

Научно-исследовательский институт по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе

Email: ovefr@yandex.ru
канд. биол. наук, руководитель сектора поиска природных соединений, преодолевающих устойчивость бактерий отд. микробиологии Научно-исследовательского института по изысканию новых антибиотиков им. Г.Ф. Гаузе РАН

В. Ф ЕВЛАШКИНА

Научный центр экспертизы средств медицинского применения минздрава России

Email: evlashkina@expmed.ru
вед. эксперт лаб. бактериофагов и препаратов нормофлоры с коллекцией микроорганизмов Научного центра экспертизы средств медицинского применения Минздрава России

Д. С ДАВЫДОВ

Научный центр экспертизы средств медицинского применения минздрава России

Email: davydov@expmed.ru
начальник лаб. бактериофагов и препаратов нормофлоры с коллекцией микроорганизмов Научного центра экспертизы средств медицинского применения Минздрава России

Список литературы

  1. Johnson B., Anker H., Meleney F. Bacitracin: a new antibiotic produced by a member of the B. subtilis group. Science 1945; 102: 376-377.
  2. Suzuki M., Yamada K., Nagao M., Aoki EL., Matsumoto M., Hirayama T., Yamamoto H., Hiramatsu R., Ichiyama S., Iinuma Y. Antimicrobial ointments and methicillin-resistant Staphylococcus aureus USA300. Emerg. Infect. Dis. 2011; 17(10): 1917-1920.
  3. Fickeis P. Antibiotic compounds from Bacillus: why are they so amazing? Am. J. Biochem. and Biotech. 2012; 8(1): 40-46.
  4. Габриэлян Н.И., Сускова В.С., Сусков С.И., Темнова В.В., Вологодская Н.Л. Изучение влияния пробиотика споробактерина на функциональное состояние фагоцитарной системы. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины 2012; 153(5): 653-656.
  5. Габриэлян Н.И., Давыдов Д.С., Горская Е.М., Спирина Т. С., Осипова И.Г. Антагонизм in vitro споробактерина в отношении нозокомиальных штаммов микробов. Вестник трансплантологии и искусственных органов 2008; 6; 12-18.
  6. Казаков Э.Н., Габриэлян Н.И., Сенченко О.Р., Петраков К.В., Арефьева Л.И., Воронин Е.М. К вопросу о профилактике инфекционных осложнений после кардиохирургических вмешательств в условиях искусственного кровообращения. Российский медицинский журнал 2013; 2: 13-16.
  7. Третьяков А.А., Стадников А.А., Валышев А.В. Клинико-экспериментальное обоснование применения споробактерина в комплексной терапии при механической желтухе. Анналы травматологии и ортопедии 2001; 2: 42-48.
  8. Сорокина В.О., Минасов Б.Ш., Попова О.В., Попов О.С. Применение споробактерина в лечении пациентов с ожоговыми ранами. Медицинский вестник Башкортостана 2013; 8(6): 106-108.
  9. Ветлугина Л.А., Никитина Е.Т. Противогрибковые полиеновые антибиотики. Алма-Ата: Наука, 1980. 247 с.
  10. Nishikiori T., Masuma R., Oiwa R., Katagiri M., Awaya J., Iwai Y., Omura S. Aurantinin, a new antibiotic of bacterial origin. J. Antib. 1978; 31(6): 525-532.
  11. Neseman G., Prave P., Sukatsch D., Vertesy L. Ein Polyen-Antibiotikum aus Bakterien. Naturwissenschaften 1972; 59: 81-82.
  12. Abriouel H., Franz C.M.A.P., Ben Omar N., Galvez A. Diversity and applications of Bacillus bacteriocins. FEMS Microbiol. Rev. 2011; 35: 201-232.
  13. Raaijmakers J.M., De Bruijn I., Nybroe O., Ongena M. Natural functions of lipopeptides from Bacillus and Pseudomonas: more than surfactants andantibiotics. FEMS Microbiol Rev. 2010; 34(6): 1037-1062.
  14. Rea M.C., Ross R.P., Cotter P.D., Hill C. Classification of bacteriocins from gram-positive bacteria. In: Drider D., Rebuffat S. (eds.). Prokaryotic Antimicrobial Peptides: From Genes to Applications. New York: Springer-Verlag, 2011; Chapter 3: 29-53.
  15. Shahcheraghi S.H., Ayatollahi J., Lotfi M. Applications of Bacillus subtilis as an important bacterium in medical sciences and human life. Trop. J. Med. Res. 2015; 18: 1-4.
  16. Егоров Е.С., Баранова И.Н. Бактериоцины: Образование, свойства, применение. Антибиотики и химиотерапия 1999; 6: 33-40.
  17. Маланичева И.А., Козлов Д.Г., Ефименко Т.А., Зенкова В.А., Катруха Г.С., Резникова М.И., Королев А.М., Борщевская Л.Н., Тарасова О.Д., Синеокий С.П., Ефременкова О.В. Новые антибиотики, образуемые штаммами Bacillus subtilis. Микробиология 2014; 83(4): 445-450.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© ООО «Бионика Медиа», 2016