МОДЕЛИРОВАНИЕ ДИАБЕТИЧЕСКОЙ НЕФРОПАТИИ У КРЫС В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

Аннотация

Полный текст

Цель работы: воспроизвести экспериментальную модель диабетической нефропатии при длительной гипергликемии, вызванной стрептозотоциновой интоксикацией у крыс. Материалы и методы исследования: экспериментальный сахарный диабет моделировали на 50-ти половозрелых беспородных крысах-самцах массой 200-230 г. путем однократного внутривенного введения стрептозотоцина («Sigma», США), растворенного в 0,1 М цитратном буфере с рН 4,5 в дозе 45 мг/кг. Количественное определение глюкозы в крови проводили на 3 сутки после введения цитотоксина и далее еженедельно, в утреннее время, натощак, в течение всего срока эксперимента, с помощью глюкометра «Глюкокард» (Россия). В эксперимент брали животных с уровнем глюкозы натощак более 17 ммоль/л. При достижении значения гликемии натощак более 20 ммоль/л животным вводили инсулин длительного действия «ЛантусСолоСтар» (Франция (подкожно)). В ходе эксперимента с интервалом в 1 неделю оценивали массу тела всех экспериментальных животных. Каждые 4 недели крыс помещали на 24 часа в индивидуальные метаболические камеры для сбора мочи с целью исследования суточной экскреции альбумина (колориметрическим методом с бромфеноловым синим «Vital Diagnostics» (Россия); определение концентрации креатинина сыворотки крови (с последующим расчётом клиренса креатинина) методом Яффе с использованием набора «Pliva-Lachema» (Чехия). По окончании эксперимента длительностью 12 недель определяли уровень гликированного гемоглобина с использованием набора «Фосфосорб» (Россия). Статистическую обработку результатов проводили с использованием табличного редактора Microsoft Excel 2007 и программы «GraphPad Prism 5.0». Результаты: уровень глюкозы в крови у крыс с сахарным диабетом на 3 день и на протяжении всего эксперимента достоверно превосходил показатели у интактных животных (в среднем в 4,5 раза (р<0,05)). Полученные результаты подтверждались статистически значимым увеличением к концу эксперимента уровня гликированного гемоглобина у крыс со стрептозотоциновой интоксикацией длительностью 3 месяца относительно интактных в 2 раза (р<0,05). У крыс с патологией по окончании исследования отмечали снижение массы тела на 20% по сравнению с исходной. Каждые 4 недели регистрировали достоверное повышение уровня белка в моче у животных со стрептозотоциновой интоксикацией по сравнению со значениями интактной группы крыс (в среднем в 2,4 раза (р<0,05)), что указывает на повреждение клубочкового аппарата нефрона диабетического генеза. Клиренс креатинина у крыс с сахарным диабетом увеличивался по сравнению с таковым у интактных животных (в 2,4 раза - 1-й месяц, в 1,64 раза - 2-й месяц, в 2,06 раза - 3-й месяц), что может происходить в результате гиперфильтрации креатинина, имеющей место в ранней фазе диабетической нефропатии. Выводы: полученные результаты свидетельствуют, что при длительном течении стрептозотоциновой интоксикации у крыс формируются ранние проявления диабетической нефропатии. Воспроизведенная экспериментальная модель может быть использована для углубленного фармакологического изучения потенциальных средств профилактики диабетической нефропатии. Работа выполнена за счет средств гранта Российского научного фонда (проект №14-25-00139)