ИШЕМИЯ И ИШЕМИЯ-РЕПЕРФУЗИЯ КАК МОДУЛЯТОР ФУНКЦИОНИРОВАНИЯ БЕЛКА-ТРАНСПОРТЕРА ГЛИКОПРОТЕИНА-P

Аннотация

Полный текст

Цель работы: оценить экспрессию белка-транспортера гликопротеина-P (Pgp) в лобной доле коры головного мозга крыс wistar при односторонней окклюзии общей сонной артерии, а также при окклюзии-реперфузии, и проанализировать корреляционную зависимость между экспрессией транспортера и свободно-радикальным статусом ткани мозга. Материалы и методы исследования: работа выполнена на 90 крысах-самцах wistar массой 250 - 300 г. Животных разделили на 3 группы: 1-я группа - интактные животные (n=6); 2-я группа - животные, которым моделировали ишемию головного мозга; 3-я группа - животные, которым моделировали ишемию головного мозга в течении 30 минут с последующей реперфузией. Крысам 1-й группы выполнялась «ложная» операция со вскрытием и ушиванием кожных покровов, без перевязки сонной артерии. Животные 2-й группы были разделены на следующие серии: 30 мин, 60 мин, 1,5 ч, 4 ч, 12 ч, 5 суток и 14 суток после окклюзии общей сонной артерии и аналогичные сроки после 30-минутной окклюзии и последующей реперфузии - для 3-й группы (n=6 в каждой группе на каждый срок эксперимента). Окклюзию общей сонной артерии моделировали под эфирным наркозом после вскрытия мягких тканей шеи животных, выделения правой общей сонной артерии путем наложения на нее лигатуры с последующим ушиванием раны. При моделировании окклюзии-реперфузии артерия пережималась сосудистым зажимом в течение 30 минут. Гистологический материал подвергали стандартной иммуногистохимической обработке. В гомогенате коры больших полушарий определяли содержание ТБК-реактивных продуктов, уровень свободных сульфгидрильных (SH) групп, активность глутатионпероксидазы и глутатион-S-трансферазы. Полученные результаты обрабатывали с помощью программы «StatSoft Statistica 7.0». Результаты: установлено, что экспрессия Pgp снижалась на 12-й ч окклюзии на 59,2% (p<0,05) и увеличивалась на 65,9% (p<0,05) на 5-е сутки опыта. В остальные сроки изучаемый показатель от уровня интактных животных не отличался (p>0,05). Односторонняя окклюзия общей сонной артерии с последующей реперфузией приводила к снижению экспрессии Pgp в ткани мозга через 4 и 12 ч после реперфузии на 61,3% и 74,8% (p<0,05) соответственно. В остальные сроки наблюдения изучаемый показатель достоверно от значений интактных животных не отличался (p>0,05). Окклюзия общей сонной артерии, а также окклюзия-реперфузия приводили к развитию выраженного окислительного стресса в ткани коры головного мозга. При проведении корреляционного анализа была выявлена зависимость между экспрессией Pgp в гематоэнцефалическом барьере и активностью антиоксидантного фермента глутатионпероксидазы в ткани коры головного мозга на протяжении всего исследования (Rs=0,352, p=0,024). Выводы: Односторонняя перевязка общей сонной артерии у крыс приводит к развитию окислительного стресса в ткани лобной доли коры, уменьшению экспрессии Pgp через 12 ч от момента окклюзии и к ее увеличению на 5-е сутки эксперимента. Односторонняя окклюзия общей сонной артерии у крыс с последующей реперфузией сопровождается развитием выраженного окислительного стресса в ткани мозга и снижением экспрессии Pgp через 4 и 12 ч после реперфузии. Выявлена прямая корреляционная зависимость между экспрессией Pgp и активностью глутатионпероксидазы в пораженной ткани лобных долей коры головного мозга на протяжении всего эксперимента при ишемии и ишемии-реперфузии.