11-amino acid peptide imitating the structure of erythropoietin α-helix b improves endothelial function, but stimulates thrombosis in rats.


Cite item

Full Text

Abstract

The aim of the study was to test whether P-αB can be positioned as a preventing and treating agent for cardiovascular diseases.Materials and methods. The study was performed on sexually mature male Wistar rats. Endothelial dysfunction was modulated by a 7-days intraperitoneal administration of L-NAME at the dose of 2.5 mg/100 g. P-αB, or erythropoietin (EPO), was used for therapy at the dose of 2.5 µg/100 g × 3 times for 7 days, the total dose was 7.5 µg/100 g. The function of endothelium was estimated by an endothelium-dependent and endothelium-independent vasodilation. In addition, a histological assessment of the abdominal aortic wall state and the analysis of eNos, Tnf and Il-1β genes expression were performed. To estimate prothrombotic properties, P-αB and EPO were administered, at the doses of 2.5 and 5 µg/100 g (3 times a day for 7 days, the total doses were 7.5 µg/100 g and 15 µg/100 g, respectively) and on the 8th day, the time of ferric (III) chloride-induced carotid artery thrombosis was estimated.Results. Theresults of the functional tests for endothelium-dependent and endothelium-independent vasodilatation, as well as the histological picture of the aorta have evidenced that P-αB and EPO do not affect L-NAME-induced hypertension but improve the endothelium function. At the same time, P-αB shows a significantly higher endothelial-protective activity, reducing the coefficient of endothelial dysfunction from 5.1±0.15 to 2.72±0.12. In addition, P-αB has significantly increased the expression of eNos and reduced the expression level of Tnf and Il-1β mRNA genes. Carrying out Ferric (III) chloride-induced carotid artery thrombosis has revealed that P-αB (5 µg/100 g × 3 times a day for 7 days, total dose was 15 µg/100 g) has a lower but statistically significant prothrombotic activity than EPO.Conclusion. P-αB can be positioned as an atheroprotector because of its ability to prevent the death of endothelial cells, as well as to reduce remodeling and proinflammatory activation of the vascular wall. However, the prothrombotic properties of P-αB limit its use as a preventing and treating agent for atherosclerosis-associated diseases.

Full Text

ВВЕДЕНИЕ Перманентный рост атеросклероз-ассоциированных заболеваний в общей структуре причин смертности и инвалидизации населения развитых стран диктует необходимость их углубленного изучения и совершенствования методов коррекции [1, 2]. При этом опыт, накопленный, начиная с первых работ Н.Н. Аничкова [3], демонстрирует, что атеросклеротическое повреждение сосудистой стенки является длительным многофакторным процессом [4]. В соответствии с современным пониманием патогенеза сердечно-сосудистых заболеваний, интегральную роль в развитии атеросклероза и связанных с ним осложнений играет эндотелиальная дисфункция (ЭД) [5-7]. Изменения в спектре секретируемых и экспрессируемых эндотелием молекул и нарушение его барьерной функции в конечном итоге приводят к инфильтрации сосудистой стенки атероматозными массами и образованию атеросклеротических бляшек [8]. Возникающий патогенетический каскад становится актуальной мишенью для фармакологического воздействия [1, 2]. Эффективным способом предотвратить повреждение эндотелия является применение молекул с универсальной цитопротективной активностью [9]. Одной из таких молекул является эндогенный гликопротеин эритропоэтин (EPO) [10]. Ряд проведенных нами работ продемонстрировал, что EPO способен значительно улучшать морфофункциональное состояние сосудистой стенки при моделировании ЭД у крыс [11-14]. Тем не менее, многолетний опыт показывает, что многообещающие результаты доклинических исследований EPO слабо транслируются в клиническую реальность и его главной нишей остается лечение анемии [15-17]. В 2004 г. Michael Brines и др. [17] доказали, что негематопоэтические эффекты EPO реализуются через гетеродимерный комплекс EPOR/CD131. Обнаружение того факта, что эритропоэтические и тканезащитные свойства EPO реализуются посредством двух различных рецепторных систем, привело к созданию предпосылок для принципиально нового направления в поиске инновационных молекул с цитопротекторной активностью. В 2008 г. те же авторы [18] представили обобщенные результаты изучения цитопротекторной активности 11-аминокислотного пептида на основе a-спирали B эритропоэтина, имитирующего пространственную часть молекулы, которая взаимодействует с гетеродимерным EPOR/ CD131 рецептором, но не взаимодействует с гомодимерным EPOR/EPOR рецептором. Данное соединение (P-αB, цибенитид, PubChem CID: 91810664) продемонстрировал способность существенно улучшать морфофункциональное состояние тканей при диабетическом отеке сетчатки, ишемии-реперфузии почек, а также значительно улучшать когнитивные функции в модели галантамин-индуцированной амнезии, при отсутствии какого-либо влияния на эритропоэз. ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ - оценка эндотелиопротективной и атеропротективной активности P-αB, а также оценка протромботических свойств данной молекулы для выявления препятствий в клиническом применении P-αB в качестве средства для лечения и профилактики сердечно-сосудистых катастроф. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Животные Животные были получены из питомника Charles River Laboratories (Массачусетс, США). Содержались в центре доклинических исследований НИИ Фармакологии живых систем. После прохождения 14-дневного карантинного режима, крысы были стратифицированы по массе и рассажены по 9 особей в отдельные конвенциональные клетки в соответствии с принадлежностью к экспериментальной группе. До и во время выполнения исследования животные содержались в помещениях с искусственным освещением (режим 12 ч/12 ч) при температуре 21-23°С, влажности 38-50% и имели свободный доступ к корму и воде. Номер заключения независимого этического комитета 06-09/02-1 от 16.05.2019 г. Эксперимент был выполнен на 76 крысах-самцах (200-220 г) линии Wistar. При работе соблюдались требования Закона РФ «О защите животных от жестокого обращения» от 24.06.1998 года, правил лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ (ГОСТ 3 51000.3-96 и ГОСТ Р 53434-2009), директивы Европейского сообщества (86/609 ЕС) и Правил лaбoрaтoрнoй прaктики, принятых в Российcкoй Фeдeрaции (прикaз MЗ РФ № 708 oт 29.08.2010 г.). Моделирование эндотелиальной дисфункции Дисфункцию эндотелия моделировали путем 7-дневного внутрибрюшинного введения блокатора эндотелиальной синтазы оксида азота L-NAME (Sigma Aldrich, США) в дозе 2,5 мг/100 г. Для оценки эндотелиопротективного эффекта P-αB в сравнении с EPO из 36 крыс-самцов линии Wistar (200-220 г) были сформированы 4 группы по 9 животных: 1) ЭД + EPO (ООО «Фармапарк») (2,5 мкг/100 г 3 раза в течение 7 дней, суммарная доза 7,5 мкг/100 г); 2) ЭД + P-αB (ООО «Фармапарк») (2,5 мкг/100 г 3 раза в течение 7 дней, суммарная доза 7,5 мкг/100 г); 3) ЭД + Растворитель (0,9% раствор натрия хлорида 0,1 мл/100 г 3 раза в течение 7 дней, суммарная доза 0,3 мл/100 г); 4) Интактные + Растворитель (0,9% раствор натрия хлорида 0,1 мл/100 г 3 раза в течение 7 дней, суммарная доза 0,3 мл/100 г). Ровно через 24 часа после последнего введения L-NAME каждому животному под наркозом (Золазепам (Virbac, Франция) 6 мг/100 г + Хлоралгидрат (Panreac, Испания)) катетеризировали левую сонную артерию для внутрисосудистого измерения артериального давления с помощью аппарата Biopac MP150. На фоне непрерывного измерения артериального давления стимулировали эндотелийзависимую (Ацетилхолин 4 мкг/100 г) и эндотелийнезависимую (Натрия нитропруссид, 3 мкг/100 г) вазодилатацию. Вазоактивные агенты вводили с интервалом 15 минут через катетер, установленный в бедренной вене. При выполнении всех манипуляций животным был присвоен уникальный код и хирург не знал принадлежность животного к группе. Отношение площади над кривой падения давления при введении натрия нитропруссида к площади над кривой падения давления при введении ацетилхолина принимали за коэффициент эндотелиальной дисфункции (КЭД). После проведения функциональных сосудистых проб животных эвтаназировали обескровливанием и забирали абдоминальный отдел аорты для гистологических исследований, а также оценки экспрессии мРНК генов eNos, Il-1b и Tnf. Гистология Образцы абдоминальной аорты фиксировали в 10%-растворе формальдегида с последующей заливкой в парафин в автомате карусельного типа «STP120» (Microm International GMbH, Германия). Заливку блоков со стандартной ориентацией кусочков осуществляли на станции для заливки биологического материала в парафин «EC 350» (Microm International GMBH, Германия). Для обеспечения стандартизации заливку в парафин осуществляли в виде мультиблоков по 5-6 кусочков. Срезы для гистологического исследования толщиной 5 мкм изготавливали на полуавтоматическом ротационном микротоме с системой транспортировки и расправления срезов «НМ 340Е» (Microm International GMbH, Германия). Окраску гематоксилином и эозином осуществляли в автомате для окраски гистологических срезов и мазков (Microm International GMbH, Германия). Описательное исследование гистологических препаратов выполняли под микроскопом Axio Scope A1 (Carl Zeiss Microimaging GMbH, Германия). Определение экспрессии eNos, Tnf и Il-1β методом количественной полимеразной цепной реакции (кПЦР) Ткань аорты забирали, гомогенизировали и 10 минут инкубировали при 37°С в растворе «Extract RNA». После лизирования образца в реагенте его подвергли хлороформной чистке, а образовавшийся осадок РНК промывали изопропиловым спиртом и 70%-ным этиловым спиртом. Концентрацию полученной РНК измеряли на спектрафотометре IMPLENNanoPhotometer®. Выход РНК составлял примерно 1000 нг/мкл. Обратную транскрипцию проводили с использованием набора MMLVRTSK021 в соответствии с протоколом фирмы-производителя (Evrogen). Смесь аккуратно перемешивали и в течение 2 минут прогревали при 70°C для расплавления вторичных структур РНК и последующего отжига праймера OligoDT. После переносили образцы в лед. Всю реакционную смесь инкубировали 60 мин при 40°C в термоциклере T100™ThermalCycler (Bio-Rad). Для остановки реакции прогревали смесь при 70°C в течение 10 минут. Полученную кДНК разводили до концентрации 1 нг/мкл. Уровень экспрессии гена оценивали относительно значений референсного гена Gapdh. Расчет экспрессии в конкретной точке производился по формуле: Экспрессия гена = 2^[(Ct(Gapdh)-Ct(Ген интереса)] (таб. 1). Изучение протромботической активности 40 крыс, были разделены на 5 равных групп: 1) EPO (2,5 мкг/100 г 3 раза в течение 7 дней, суммарная доза 7,5 мкг/100 г); 2) EPO (5 мкг/100 г 3 раза в течение 7 дней, суммарная доза 15 мкг/100 г); 3) P-αB (2,5 мкг/100 г 3 раза в течение 7 дней, суммарная доза 7,5 мкг/100 г); 4) P-αB (5 мкг/100 г 3 раза в течение 7 дней, суммарная доза 15 мкг/100 г); 5) 0,9% раствор натрия хлорида (0,1 мл/100 г 3 раза в течение 7 дней, суммарная доза 0,3 мл/100 г). Через 24 часа после последней инъекции препарата (растворителя для контрольной группы) животных наркотизировали и фиксировали к операционному столику. Затем выполняли разрез длиной 10 мм слева от срединной линии шеи, выделяли общую сонную артерию и аккуратно отделяли ее от окружающих тканей, не повреждая блуждающий нерв. С использованием ультразвукового допплерографа Минимакс-Допплер (Санкт-Петербург, Россия) на выделенной артерии определяли точку наилучшего сигнала, после чего прикладывали ватку, смоченную 50% раствором железа (III) хлорида и засекали время до снижения исходного сигнала до ≈10%. При выполнении всех манипуляций животным был присвоен уникальный код и хирург не знал принадлежность животного к группе. Статистический анализ Статистическую обработку проводили с использованием программной среды вычислений R. Характер распределения признаков в статистической выборке определяли с помощью критерия Шапиро-Уилка и критерия Шпигельхальтера (библиотека normtest), оценку равенства дисперсий - с помощью критерия Левене (библиотека lawstat). В зависимости от типа распределения признаков и равенства дисперсий значимость полученных результатов оценивали с применением параметрического (ANOVA) или непараметрического (критерий Краскела-Уоллиса) однофакторного дисперсионного анализа, а в качестве post-hoc анализа для выявления различий при межгрупповых сравнениях использовали непарный t-критерий Стьюдента или критерий Манна-Уитни, соответственно, с поправкой Бенджамини-Хохберга на множественную проверку гипотез. Результаты считали достоверными при p≤0,05. РЕЗУЛЬТАТЫ Оценка эндотелиальной дисфункции 8-дневное введение L-NAME (2,5 мг/100 г) привело к значительному росту артериального давления. При этом терапия EPO и P-αB статистически значимо не повлияла на значения систолического и диастолического артериального давления (таб. 2). В то же время проведение функциональных проб с ацетилхолином и натрия нитропруссидом выявило значимый эффект терапии в отношении NO-продуцирующей функции эндотелия (рис.1А). Группа, получавшая L-NAME и 0,9% раствор натрия хлорида, продемонстрировала почти 5-кратное увеличение КЭД (5,1±0,15 у.е. при 1,21±0,09 у интактных животных). В группе с применением EPO и P-αB этот показатель составил 3,81±0,14 и 2,72±0,12, соответственно. Гистологическая картина стенки аорты При гистологическом исследовании определена аналогичная тенденция, характеризующая эндотелиопротективную активность EPO и P-αB (рис. 1Б). - L-NAME + 0,9% раствор натрия хлорида. В группе животных с L-NAME-индуцированной ЭД выявлены значительные морфологические изменения в сравнении с интактными животными, которые заключались в наличии признаков периваскулярного и перицеллюлярного отека, воспаления всех оболочек стенки сосуда (аорты). В периваскулярной ткани отмечалось наличие единичных диапедезных кровоизлияний, а в просвете сосуда наличие пристеночных микротромбов. В области эндотелиальной выстилки наблюдалось набухание эндотелиоцитов, слущивание их с поверхности базальной мембраны. В небольших участках с сохраненным эндотелием ядра клеток располагались вдоль стенки кровеносного сосуда. В единичных эндотелиоцитах отмечался кариолизис и вакуолизация цитоплазмы, сморщивание клеток, вплоть до их гибели. Имела место круглоклеточная инфильтрация средней и наружной оболочек. В средней оболочке, в гладких миоцитах отмечалась вакуольная дистрофия. В наружной оболочке наблюдалось разволокнение и наличие признаков отека. Плотность клеток как в средней, так и в наружной оболочках высокая. - L-NAME+EPO (2,5 мкг/100 г). В данной группе наблюдалась полиморфноклеточная инфильтрация наружной оболочки сосуда, на фоне незначительных нарушений архитектоники эластических мембран, наличии функционально активных фибробластов (клетки с темно-базофильной цитоплазмой, крупных размеров визуализируемые в центре средней оболочки), что может свидетельствовать о начальных признаках фиброза. Визуализировалось небольшое количество реактивно-измененных гладких миоцитов, расположенных между окончатыми эластическими мембранами. При этом, большинство эндотелиоцитов имели уплощенную форму и располагались непрерывно, их ядра ориентированы параллельно базальной мембране. -L-NAME+ P-αB (2,5 мкг/100 г). При изучении гистологических срезов в группе животных после фармакологической коррекции P-αB была выявлена почти полная сохранность архитектоники слоев стенки сосуда. Соотношение толщины слоев не имело визуальных отличий в сравнении с данными интактной группы животных. Наблюдалось сохранение эндотелиальной выстилки, расположение эндотелиоцитов в один слой на базальной мембране, плоская форма клеток и слабо оксифильная цитоплазма. Ядра палочковидной формы, ориентированы вдоль кровеносного сосуда. Признаков перицеллюлярного и периваскулярного отека не визуализировалось. Выявлена немного повышенная плотность клеток на единице площади среза, однако без признаков деструкции, которая наблюдалась у животных без фармакологической терапии. Экспрессия eNos, Tnf и Il-1β по данным количественной ПЦР При моделировании L-NAME-индуцированной ЭД в сравнении с интактными животными во всех группах выявлено увеличение относительной экспрессии мРНК гена eNos. При этом экспрессия eNOS растет в ряду: ЭД+ 0,9% раствор натрия хлорида <ЭД+EPO <ЭД+P-αB. Уровень мРНК генов провоспалительных цитокинов Tnf и Il-1β характеризовалось наибольшим увеличением в группе ЭД без терапии, а применение EPO и P-αB снижало степень их экспрессии (рис. 2). Оценка протромботической активности При оценке времени наступления железа (III) хлорида-индуцированного тромбоза у животных, в течение 8 дней, получавших EPO и P-αB, было обнаружено дозозависимое сокращение времени тромбообразования. Более значимый протромботический эффект продемонстрировал EPO, который сократил время тромбообразования до 16,7±1,2 мин (2,5 мкг/100 г) и 14,2±1,3 мин (5 мкг/100 г) по сравнению с 19,5±0,9 мин в группе без применения препаратов. P-αB в дозе 1,25 мкг/100 г статистически значимо не повлиял на время тромбообразования, а в дозе 2,5 мкг/100 г ускорил тромбоз сонной артерии до 16,2±1,1 мин (рис. 3). ОБСУЖДЕНИЕ Наша работа показала, что 11-аминокислотный пептид P-αB, обладающий избирательным сродством к гетеродимерному рецептору EPOR/CD131, способен снижать повреждение эндотелия при L-NAME-индуцируемом дефиците оксида азота. Блокада eNOS привела к стойкой гипертензии, спровоцировавшей морфологические изменения стенки сосудов, которые выражались в ее гипертрофии, некрозе и нарушении архитектоники. С использованием молекулярно-биологического анализа мы обнаружили повышение экспрессии мРНК гена eNos, что по всей видимости является компенсаторной реакцией на гипертензию. Наряду с этим вырос уровень провоспалительных цитокинов - TNF-α и IL-1β. Троекратное применение P-αB в дозе 2,5 мкг/100 г не повлияло на артериальную гипертензию, связанную с введением L-NAME, однако привело к более выраженному увеличению экспрессии мРНК гена eNos. Возможно, это объясняется тем, что за счет антиапоптических свойств P-αB повысил количество функционирующих клеток, которые способны синтезировать eNOS. Примечательно, что в группе с применением EPO, несмотря на снижение КЭД, уровень мРНК гена eNos достоверно не увеличился относительно контроля. Это согласуется с данными, полученными Sultan F. и др., демонстрирующими, что EPO, способен угнетать экспрессию eNOS [19]. По всей видимости, это свойство качественно отличает вазотропную активность P-αB от других препаратов эритропоэтинового ряда. Полученные результаты также свидетельствуют, что P-αB способен предотвращать воспалительную активацию в модели L-NAME-индуцированной ЭД. Этот феномен скорее всего связан как с антиапоптической активностью соединения, так и с собственной противовоспалительной активностью молекул эритропоэтинового ряда. Данное свойство очень значимо для потенциального атеропротектора, поскольку снижение цитокиновой активации необходимо для стабилизации атеросклеротической бляшки и предупреждения ее разрыва. Наконец, последний этап исследования с использованием FeCl3 -индуцированного тромбоза сонной артерии у крыс выявил, что P-αB обладает протромботическими свойствами. Протромботическая активность P-αB выражена в меньшей степени, чем у EPO и в нашем исследовании не проявилась в тех дозах, в которых он демонстрирует эндотелиопротективное действие (2,5 мкг/100г × 3 в течение 7 дней). Тем не менее, данное свойство является значимым ограничением в позиционировании P-αB в качестве средства для профилактики и лечения сердечно-сосудистых заболеваний, связанных с атеросклерозом. Мы видим перспективу в модификации P-αB путем присоединения пептидных мотивов, обладающих антиагрегантной активностью. Для устранения протромботической активности к P-αB могут быть добавлены аминокислотные последовательности Arg-Gly-Asp и Lys-Gly-Asp. Известно, что Arg-Gly-Asp и Lys-Gly-Asp обладают выраженными антиагрегантными свойствами [20-22]. В ряде отечественных работ также были выявлены антитромботические и антиагрегантные свойства другого вспомогательного аминокислотного трипептида Pro-Gly-Pro. [23-25]. Кроме того, Pro-Gly-Pro стабилизирует молекулу в биологических средах за счет ингибирования активности протеолитических ферментов [26] и обладает способностью блокировать ангиотензин-превращающий фермент [27], один из важнейших проатерогенных факторов, который катализирует реакцию образования ангиотензина II и способствует ремоделированию сосудистой стенки [28]. Ключевым вопросом остается характер (позиция, линкеры и т.д.) для встраивания данных аминокислотных последовательностей в базисную молекулу. Биоинформатический анализ позволит определить наиболее оптимальные локализации для присоединения трипептидов, позволяющие не влиять на интересующие фармакофоры, сохранив и эндотелиопротективную, и антиагрегантную активность. ЗАКЛЮЧЕНИЕ 11-аминокислотный пептид, имитирующий α-спираль B эритропоэтина, обладает выраженным эндотелиопротективным и, потенциально, атеропротективным действием ввиду способности предотвращать гибель эндотелиоцитов, а также снижать ремоделирование и провоспалительную активацию сосудистой стенки. Тем не менее, протромботическая активность P-αB ограничивает его применение в качестве средства для профилактики и лечения атеросклероз-ассоциированных заболеваний и обуславливает необходимость дальнейших модификаций данной молекулы
×

About the authors

M. V. Korokin

Belgorod State National Research University

Email: mkorokin@mail.ru

V. O. Soldatov

Belgorod State National Research University

Email: pharmsoldatov@gmail.com

A. A. Tietze

University of Gothenburg

Email: a.tietze@tietze-lab.com

M. V. Golubev

Belgorod State National Research University

Email: golubevvano@yandex.ru

A. E. Belykh

Kursk State Medical University

Email: and-white@yandex.ru

M. V. Kubekina

Institute of Gene Biology of the Russian Academy of Sciences

Email: marykumy@gmail.com

O. A. Puchenkova

Belgorod State National Research University

Email: lesya759@yandex.ru

T. A. Denisyuk

Kursk State Medical University

Email: denitatyana@yandex.ru

V. V. Gureyev

Belgorod State National Research University

Email: produmen@yandex.ru

T. G. Pokrovskaya

Belgorod State National Research University

Email: pokrovskaia-tg@mail.ru

O. S. Gudyrev

Belgorod State National Research University

Email: gudyrev@mail.ru

M. A. Zhuchenko

Scientific Research Centre, Kurchatov Institute

Email: maksim.zhuchenko@pharmapark.ru

M. A. Zatolokina

Kursk State Medical University

Email: marika1212@mail.ru

M. V. Pokrovskiy

Belgorod State National Research University

Email: mpokrovsky@yandex.ru

References

  1. Глушко А.А., Воронков А.В., Черников М.В. Молекулярные мишени для поиска веществ, обладающих эндотелиопротекторными свойствами (обзорная статья) // Биоорганическая химия. 2014. Т. 40. № 5. С. 515-527. doi: 10.7868/S0132342314050066.
  2. Тюренков И.Н., Воронков А.В., Слиецанс А.А., Волотова Е. В. Эндотелиопротекторы новый класс фармакологических препаратов // Вестник Российской академии медицинских наук. 2012, Т. 67, №7. - С. 50-57. DOI: https://doi.org/10.15690/vramn.v67i7.341
  3. Zárate A., Manuel-Apolinar L., Basurto L., De la Chesnaye E., Saldívar I. Cholesterol and atherosclerosis. Historical considerations and treatment // Arch Cardiol Mex. - 2016. - V. 86, N 2. - P. 163-9. doi: 10.1016/j.acmx.2015.12.002. Epub 2016 Jan 7.
  4. Orekhov A.N., Poznyak A.V., Sobenin I.A., Nikifirov N.N., Ivanova E.A. Mitochondrion as a selective target for treatment of atherosclerosis: Role of mitochondrial DNA mutations and defective mitophagy in the pathogenesis of atherosclerosis and chronic inflammation // Curr Neuropharmacol. 2019. doi: 10.2174/1570159X17666191118125018.
  5. Marzetti E., Calvani R., Cesari M., Buford T.W., Lorenzi M., Behnke B.J., Leeuwenburgh C. Mitochondrial dysfunction and sarcopenia of aging: from signaling pathways to clinical trials // Int J Biochem Cell Biol. - 2013. - V. 45, N 10. - P. 2288-301. doi: 10.1016/j.biocel.2013.06.024.
  6. Воронков А. В., Поздняков Д. И., Мирошниченко К. А., Потапова А. А. Влияние новых производных пиримидина на вазодилатирующую функцию эндотелия сосудов головного мозга в условиях хронической травматической энцефалопатии // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2019. Т. 82. № 11. С. 11-14. doi: 10.30906/0869-2092-2019-82-11-11-14.
  7. Воронков А.В., Поздняков Д.И. Оценка влияния 4-гидрокси-3,5-ди-трет-бутилкоричной кислоты на изменения антитромботического потенциала эндотелия у кроликов в условиях ишемии головного мозга // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2018. Т. 81. № 8. С. 3-7. doi: 10.30906/0869-2092-2018-81-8-3-7
  8. Gimbrone M.A. Jr., García-Cardeña G. Endothelial cell dysfunction and the pathobiology of atherosclerosis // Circ Res. - 2016. - V. 118, N 4. - P. 620-636. doi: 10.1161/CIRCRESAHA.115.306301.
  9. Елагин, В.В. Подходы к коррекции ишемических и реперфузионных повреждений почек в эксперименте / В.В. Елагин, О.И. Братчиков, А.А. Ульянова // Научные результаты биомедицинских исследований. - 2018. - №4(3). - С. 63-69. doi: 10.18413/2313-89552018-4-3-0-6.
  10. Shabelnikova A.S., Lutsenko V.D., Pokrovskii M.V., Peresipkina A.A., Korokin M.V., Gudyrev O.S., Hoshenko Y.A. Protective effects of recombinant erythropoietin in ischemia of the retina: The role of mechanisms of preconditioning // Research Journal of Medical Sciences. - 2015. - V. 9, N 4. - P. 200-203. doi: 10.3923/rjmsci.2015.200.203.
  11. Корокина, Л.В. Фармакологическая коррекция L-NAME индуцированного дефицита оксида азота рекомбинантным эритропоэтином / Л.В. Корокина, И.М. Колесник, M.В. Покровский, М.В. Корокин, А.С. Белоус, Е.Б. Артюшкова, Т.Г. Покровская, О.С. Гудырев, А.Е. Королев, Л.А. Павлова, О.О. Новиков // Кубанский научный медицинский вестник. - 2009. - №9 (114). - С. 66-69.
  12. Denisyuk T. Pharmacotherapeutic strategies for endothelial dysfunction correction with use of statins in syndrome of systemic inflammatory response // Research Results in Pharmacology. - 2017. - V. 3, N 4. - P. 35-77. doi: 10.18413/2313-8971-2017-3-4-35-77.
  13. Денисюк, Т.А. Сочетанное применение рекомбинатного эритропоэтина и статинов при эндотоксининдуцированной эндотелиальной дисфункции / Т.А. Денисюк, М.В. Покровский // Аллергология и иммунология. - 2016. - №17(1). - С. 64-65.
  14. Rajkumar D.S.R., Gudyrev O.S., Faiteison A.V., Pokrovskii M.V. Study of the microcirculation level in bone with osteoporosis and osteoporotic fractures during therapy with recombinant erythropoietin, rosuvastatin and their combinations // Research result: pharmacology and clinical pharmacology. -2015. - V. 4, N 6. - P. 57-60. doi: 10.18413/2313-8971-2015-1-4-57-60.
  15. Souvenir R., Doycheva D., Zhang J.H., Tang J. Erythropoietin in stroke therapy: friend or foe // Curr Med Chem. - 2015. - V. 22, N 10. - P. 1205-13.
  16. Pearl R.G. Erythropoietin and organ protecttion: lessons from negative clinical trials // Crit Care. -2014. - V. 18, N 5. - P. 526. doi: 10.1186/s13054-014-0526-9.
  17. Brines M., Grasso G., Fiordaliso F., Sfacteria A., Ghezzi P., Fratelli M., Latini R., Xie Q.W., Smart J., Su-Rick C.J., Pobre E., Diaz D., Gomez D., Hand C., Coleman T., Cerami A. Erythropoietin mediates tissue protection through an erythropoietin and common beta-subunit heteroreceptor // Proc Natl Acad Sci U S A. -2004. - V. 101, N 41. - P. 14907-12. doi.org/10.1073/pnas.0406491101.
  18. Brines M., Patel N.S., Villa P., Brines C., Mennini T., De Paola M., Erbayraktar Z., Erbayraktar S., Sepodes B., Thiemermann C., Ghezzi P., Yamin M., Hand C.C., Xie Q.W., Coleman T., Cerami A. Nonerythropoietic, tissue-protective peptides derived from the tertiary structure of erythropoietin // Proc Natl Acad Sci USA. - 2008. - V. 105, N 31. - P. 10925-30. doi: 10.1073/pnas.0805594105.
  19. Sultan F., Singh T.U., Kumar T., Rungsung S., Rabha D.J., Vishwakarma A., Sukumaran S.V., Kandasamy A., Parida S. Shortterm exposure of erythropoietin impairs endothelial function through inhibition of nitric oxide production and eNOS mRNA expression in the rat pulmonary artery // Pharmacol Rep. -2017. - V. 69, N 4. - P. 658-665. doi: 10.1016/j.pharep.2017.02.003.
  20. Pytela R., Pierschbacher M.D., Ginsberg M.H., Plow E.F., Ruoslahti E. Platelet membrane glycoprotein IIb/IIIa: member of a family of Arg-Gly-Asp--specific adhesion receptors // Science. -1986. - V. 231, N 4745. - P. 1559-62. doi: 10.1126/science.2420006.
  21. Sheu J.R., Yen M.H., Peng H.C., Chang M.C., Huang T.F. Triflavin, an Arg-Gly-Asp-containing peptide, prevents platelet plug formation in in vivo experiments // Eur J Pharmacol. -1995. - V. 294, N 1. - P. 231-8. doi: 10.1016/0014-2999(95)00530-7.
  22. Hung Y.C., Kuo Y.J., Huang S.S., Huang T.F. Trimucrin, an Arg-Gly-Asp containing disintegrin, attenuates myocardial ischemia-reperfusion injury in murine by inhibiting platelet function // Eur J Pharmacol. - 2017. - V. 813. - P. 24-32. doi: 10.1016/j.ejphar.2017.07.039.
  23. Pastorova V.E., Liapina L.A., Alshmarin I.P., Ostrovskaia P.U., Gudasheva T.A., Lugovskoĭ E.V. Fibrin-depolymerization activity and the antiplatelet effect of small cyclic and linear proline-containing peptides // Izv Akad Nauk Ser Biol. - 2001. - N. 5. - P. 593-6.
  24. Lyapina L.A., Pastorova V.E., Obergan T.Y. Changes in hemostatic parameters after intranasal administration of peptide Pro-GlyPro // Bull Exp Biol Med. -2007. - V. 144, N 4. - P. 491-3. doi: 10.1007/s10517-007-0358-6.
  25. Liapina L.A., Grigor’eva M.E., Andreeva L.A., Miasoedov N.F. Protective antithrombotic effects of proline-containing peptides in the animal body subjected to stress // Izv Akad Nauk Ser Biol. -2010. - N 4. - P. 462-7.
  26. Shevchenko K.V., Nagaev I.Y., Andreeva L.A., Shevchenko V.P., Myasoedov N.F. Stability of prolin-containing peptides in biological media // Biomed Khim. - 2019. - V. 65, N 3. - P. 180- 201. doi: 10.18097/PBMC20196503180.
  27. Wang Z., Zhang S., Jin H., Wang W., Huo J., Zhou L., Wang Y., Feng F., Zhang L. Angiotensin-I-converting enzyme inhibitory peptides: Chemical feature based pharmacophore generation // Eur J Med Chem. - 2011. - V. 46, N 8. - P. 3428-33. doi: 10.1016/j. ejmech.2011.05.007.
  28. Montezano A.C., Nguyen Dinh Cat A., Rios F.J., Touyz R.M. Angiotensin II and vascular injury // Curr Hypertens Rep. -2014. - V. 16, N 6. - P. 431. doi: 10.1007/s11906-014-0431-2.

Supplementary files

Supplementary Files
Action
1. JATS XML
Download

Copyright (c) 2019 Korokin M.V., Soldatov V.O., Tietze A.A., Golubev M.V., Belykh A.E., Kubekina M.V., Puchenkova O.A., Denisyuk T.A., Gureyev V.V., Pokrovskaya T.G., Gudyrev O.S., Zhuchenko M.A., Zatolokina M.A., Pokrovskiy M.V.

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: ПИ № ФС 77 - 67428 от 13.10.2016. 

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies