Иммунофенотипирование и морфологические изменения циркулирующих лимфоцитов крупного рогатого скота в процессе культивирования ex vivo и лекомогенеза

Аннотация

Полный текст

Настоящее исследование было предпринято для расширения доступных реагентов моноклональных антител (МКА), необходимых для изучения иммунной системы рогатого скота в норме и при патологии различного рода, в том числе при лейкозе КРС. Цель работы. Изучение экспрессии маркеров В-лимфоцитов, цитоморфологических изменений характерных для ВЛКРС, которые существенны для поиска ранних маркеров болезни. Используя клеточный биочип и методы иммуноцитохимического анализа на основе МКА, изучены экспрессия антигенов Ig и CD маркеров, вирусных антигенов, совокупность фенотипические и морфологические изменения циркулирующих В-лимфоцитов, полученных от животных спонтанно и экспериментально инфицированных ВЛКРС. Определен наиболее состав иммунологических маркеров типичный для ВЛКРС - CD19, CD20, CD5, IgM (sIgM, cIgM), обеспечивающий лучшее различие перси-стирующего лимфоцитоза/энзоотического лейкоза КРС и нормальных циркулирующих В-лимфоцитов; При лейкомогенезе установлена аберрантная экспрессия маркеров В-лимфоцитов sIgM/cyIgM и CD1 9/CD20, CD5, появление аномальных форм В-лимфоцитов - клетки Ридера, тени Боткина-Гумпрета, синдрома Рихтера. При культивировании ex vivo монону-клеаров животных, инфицированных и больных ВЛКРС отмечали их спонтанную пролиферацию и способность экспрессировать вирусные антигены. На ранней стадии развития болезни увеличивались пропорции В-лимфоцитов фенотипа sIgM+hiCD5+bnght. К 2 месяцам п/з интенсивность и плотность экспрессии CD5+, sIgM+ снижалась, а CD19+ - увеличивалась. В-лимфоциты преимущественно имели фенотип - sIgM+lowCD19+bright Cd5-/+. Выделяемые на 90 сутки В-лимфоциты соответствовали незрелому субтипу, экспрессируя cyIgM+-. Экспрессировали CD20+bright, отмечали отсутствие/снижение интенсивности и плотности экспрессии мембранных sIgM-/lowCD19+/lowCD5-/dim. Использование клеточного биочипа на основе МКА к IgM^, и CD маркерам лимфоцитов позволяет одновременно проводить иммунофенотипирование и изучение морфологии мононуклеаров крови КРС и выявлять животных, больных и инфицированных ВЛКРС.