Immunophenotyping and morphological changes in circulating bovine lymphocytes in the process

Resumo

Texto integral

Настоящее исследование было предпринято для расширения доступных реагентов моноклональных антител (МКА), необходимых для изучения иммунной системы рогатого скота в норме и при патологии различного рода, в том числе при лейкозе КРС. Цель работы. Изучение экспрессии маркеров В-лимфоцитов, цитоморфологических изменений характерных для ВЛКРС, которые существенны для поиска ранних маркеров болезни. Используя клеточный биочип и методы иммуноцитохимического анализа на основе МКА, изучены экспрессия антигенов Ig и CD маркеров, вирусных антигенов, совокупность фенотипические и морфологические изменения циркулирующих В-лимфоцитов, полученных от животных спонтанно и экспериментально инфицированных ВЛКРС. Определен наиболее состав иммунологических маркеров типичный для ВЛКРС - CD19, CD20, CD5, IgM (sIgM, cIgM), обеспечивающий лучшее различие перси-стирующего лимфоцитоза/энзоотического лейкоза КРС и нормальных циркулирующих В-лимфоцитов; При лейкомогенезе установлена аберрантная экспрессия маркеров В-лимфоцитов sIgM/cyIgM и CD1 9/CD20, CD5, появление аномальных форм В-лимфоцитов - клетки Ридера, тени Боткина-Гумпрета, синдрома Рихтера. При культивировании ex vivo монону-клеаров животных, инфицированных и больных ВЛКРС отмечали их спонтанную пролиферацию и способность экспрессировать вирусные антигены. На ранней стадии развития болезни увеличивались пропорции В-лимфоцитов фенотипа sIgM+hiCD5+bnght. К 2 месяцам п/з интенсивность и плотность экспрессии CD5+, sIgM+ снижалась, а CD19+ - увеличивалась. В-лимфоциты преимущественно имели фенотип - sIgM+lowCD19+bright Cd5-/+. Выделяемые на 90 сутки В-лимфоциты соответствовали незрелому субтипу, экспрессируя cyIgM+-. Экспрессировали CD20+bright, отмечали отсутствие/снижение интенсивности и плотности экспрессии мембранных sIgM-/lowCD19+/lowCD5-/dim. Использование клеточного биочипа на основе МКА к IgM^, и CD маркерам лимфоцитов позволяет одновременно проводить иммунофенотипирование и изучение морфологии мононуклеаров крови КРС и выявлять животных, больных и инфицированных ВЛКРС.