Гетерологическая сенситизация альфа1А-адренорецепторов под действием серотонина в мезенхимных стромальных клетках

Аннотация

Полный текст

Мезенхимные стромальные клетки (МСК) входят в состав соединительной ткани и играют ключевую роль в процессах ее репарации, регенерации и поддержании гомеостаза. Данные клетки, секретируя множество пара-кринных факторов, регулируют множество функций ткани, а также способны дифференцироваться в остеобласты, хондробласты, адипоциты и миоциты. Ключевыми регуляторами функциональной активности МСК являются серотонин и норадреналин. Ранее мы показали, что норадреналин регулирует функциональную активность МСК, изменяя их чувствительность к норадреналину при помощи феномена гетерологической сенситизации а1А-адренорецепторов. При стимуляции сигнального пути p-адренорецепторы/Gs-белок/аденилатциклаза/ cAмPпроисходит транзиторное повышение уровня экспрессии а1А-адренергических рецепторов и их сопряжение с кальций-зависимой внутриклеточной сигнализацией. Как следствие, через 6 часов после стимуляции МСК норадреналином наблюдается повышение чувствительности клеток к этому гормону. В данной работе мы изучали, как влияют такие нейромедиаторы, как серотонин и норадреналин, на функциональную активность МСК. На первом этапе выяснили, какие изоформы рецепторов норадреналина и серотонина, сопряженные с Gs-белком и синтезом цАМФ, экспрессируются в МСК. Методом ПЦР мы установили, что в МСК экспрессируются мРНК рецепторов серотонина (HTR6, HTR7), и на уровне белка р1-, р2- и р3-адренорецепторы. Для выяснения потенциала регуляции гормональной чувствительности клеток мы стимулировали МСК серотонином или норадреналином и через 6 часов анализировали их чувствительность к норадреналину. Мы установили, что серотонин подобно норадреналину транзиторно повышает число клеток, отвечающих на норадреналин. Путем вестерн-блоттинга мы установили, что через 6 часов после стимуляции серотонином в МСК повышается уровень экспрессии a1А-адренорецепторов. Также мы показали с помощью ингибиторного анализа и ИФА, что серотонин и норадреналин имеют различные сигнальные механизмы гетерологической сенситизации. В случае норадреналина повышение экспрессии a1А-адренорецепторов не связано с активацией CREB^PAC. Таким образом, сопряжение адренергических рецепторов с кальциевой сигнализацией за счет повышения уровня экспрессии a1А-адренорецепторов в МСК при действии серотонина регулируется путем HTR6/Gs-белок/аденилатциклаза/cAMP/PKA/CREBи EPAC.