Нарушение чувствительности к норадреналину в иммортализованных мезенхимных стромальных клетках

Аннотация

Полный текст

Мезенхимные стромальные клетки (МСК) выявляются в большинстве тканей организма и играют ключевую роль во многих процессах, включая поддержание гомеостаза жировой ткани. Функциональная активность МСК регулируется гормонами и нейромедиаторами, одним из ключевых является норадреналин. Ранее в нашей лаборатории в МСК был найден феномен гетерологической сенситизации альфа1 А-адреноре-цепторов, который связан с переключением с цАМФ на кальций-зависимую внутриклеточную сигнализация, что ведет к повышению чувствительности МСК к норадреналину. Ранее схожий механизм был обнаружен только в эмбриональных клетках. Также было показано, что соотношение между субпопуляциями МСК, экспрессирующих адренергические рецепторы, варьируется от донора к донору. Из-за высокой гетерогенности первичных МСК дальнейшее исследование сигнальных механизмов адренергической регуляции требует популяции с более однородной экспрессией адренорецепторов. Для этого мы решили использовать охарактеризованную линию иммортализованных МСК, полученных из жировой ткани (hTERT-МСК). В данной работе мы сравнивали чувствительность линейных hTERT-МСК и первичных мСк к норадрена-лину, а также способность этих клеток к регуляции чувствительности к катехоламинам. С помощью иммуноф-луоресцентного анализа мы показали, что hTERT-МСК экспрессируют все типы адренорецепторов. И в первичных МСК, и в линии hTERT-МСК, преобладали а1 А-адренорецепторы. Анализ с помощью проточной цитометрии показал, что процент линейных клеток, содержащих различные изоформы адренорецепторов, был довольно стабильным, но ниже по сравнению с первичными культурами. При исследовании чувствительности hTERT-МСК к норадреналину мы продемонстрировали, что ответ был ниже в 4 раза по сравнению с первичными МСК. При этом вариабельность ответа в hTERT-МСК была сходной с первичной культурой. Ранее мы показали, что первичные МСК отвечают на норадреналин через а1- и а2-адренорецепторы, а hTERT-МСК отвечают только через a1 -адренорецепторы. Исследуя феномен гетерологической сенситизации у hTERT-МСК, мы показали, что у данной культуры отсутствовала регуляция чувствительности к норадреналину, в отличие от первичной культуры, что вызвано сниженным потенциалом линейных клеток к синтезу cAMP. Таким образом, hTERT-МСК по сравнению с первичными МСК проявляют ослабленную способность реагировать на норадреналин, а также регулировать чувствительность к данному гормону.