Клеточный иммунный ответ на комбинированные ДНК-белковые конструкции, несущие антигены SARS-CoV-2

Обоснование. Один из подходов, позволяющий разрабатывать вакцины относительно быстро и недорого, — ДНК-вакцинные конструкции. Они особенно интересны для профилактики COVID-19, так как индуцируют оба типа иммунного ответа — гуморальный и Т-клеточный. Ранее нами были созданы две ДНК-вакцины на основе вектора pVAX: одна кодирует полный ген S-белка вируса SARS-CoV-2, вторая — только рецепторсвязывающий домен (RBD) белка S вируса SARS-CoV-2. Далее «голая» ДНК была обернута в поликатионный комплекс полиглюкин-спермидина, конъюгированного с белком RBD. Полученные комбинированные ДНК-белковые конструкции названы CCV-RBD и CCV-S соответственно.

Цель — исследовать на животной модели Т-клеточный иммунный ответ разработанных комбинированных ДНК-белковых кандидатных вакцин.

Материалы и методы. Мышей линии BALB/c иммунизировали конструкциями CCV-RBD и CCV-S, затем у них извлекали селезенки, из которых выделяли спленоциты. Клеточный ответ оценивали по способности спленоцитов секретировать цитокины в ответ на стимуляцию вирусными пептидами. Интенсивность ответа регистрировали с помощью метода внутриклеточного окрашивая цитокинов (ICS) с использованием проточной цитометрии.

Результаты. Мыши BALB/c (по 8 особей в группе) были иммунизированы дважды с интервалом три недели дозой 100 мкг ДНК: 1) CCV-RBD; 2) CCV-S; 3) интактные животные. Показано, что как хелперные Т-лимфоциты (CD4⁺), так и цитотоксические Т-лимфоциты (CD8⁺) животных, иммунизированных CCV-S и CCV-RBD, отвечают выбросом цитокинов в ответ на стимуляцию вирусными пептидами.

Заключение. В случае CCV-RBD наблюдали тенденцию к более высокому (по сравнению с группой CCV-S) ответу — как у CD4⁺ Т-хелперов, так и у CD8⁺ Т-киллеров. Возможно, это различие может быть связано с более эффективным синтезом белка RBD, чем белка S, обеспечиваемым ДНК-вакциной.