Влияние интерлейкина-4 на трансэндотелиальный транспорт липопротеинов низкой плотности

Обоснование. Важными участниками атеросклеротического процесса являются цитокины. Продукт Т-хелперов и тучных клеток интерлейкин-4 вызывает активацию эндотелиальных клеток и в то же время индуцирует поляризацию макрофагов по антивоспалительному М2-фенотипу.

Цель — изучить влияние интерлейкина-4 на активацию трансэндотелиального транспорта липопротеинов низкой плотности.

Материалы и методы. Трансэндотелиальный транспорт липопротеинов низкой плотности оценивали на монослое эндотелиальных клеток человека линии EA.hy926 в 2-камерной модели. Для этого к клеткам на сутки добавляли выделенные из плазмы крови человека 200 мкг/мл липопротеинов низкой плотности, а также 1, 10 или 100 нг/мл интерлейкина-4, либо 10 или 50 нг/мл интерлейкина-6, либо 50 нг/мл фактора некроза опухоли, либо совместно 10 нг/мл интерлейкина-4 и 50 нг/мл фактора некроза опухоли, либо фосфатно-солевой буфер. Целостность эндотелиального монослоя контролировали по прохождению через него 1 мкг/мл флуоресцеина Na. Содержание в клетках мРНК определяли методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией, белков — Вестерн-блоттингом, активность в культуральных средах матриксных металлопротеиназ-1, -2 и -9 — зимографией, концентрации интерлейкинов-6 и -8 — иммуноферментным анализом

Результаты. Интерлейкин-4 не оказывал влияния на прохождение через монослой эндотелиальных клеток липопротеинов низкой плотности, в том числе при стимуляции данного процесса фактором некроза опухоли. При этом интерлейкин-4 подавлял секрецию клетками интерлейкина-8 и повышал выработку интерлейкина-6. Последний также не вызывал изменений проницаемости эндотелиального монослоя. Кроме того, интерлейкин-4 не влиял на экспрессию генов CAV, SCARB1, ACVRL1, кодирующих белки, участвующие в трансэндотелиальном транспорте липопротеинов низкой плотности. Добавление к клеткам интерлейкина-4 или -6 не приводило к изменению активности продуцируемых ими матриксных металлопротеиназ.

Заключение. Интерлейкин-4 не влияет на трансэндотелиальный транспорт липопротеинов низкой плотности, при этом модулируя выработку эндотелиоцитами других цитокинов. В дальнейшем требуется установление действия на трансэндотелиальный транспорт липопротеинов низкой плотности более широкого спектра цитокинов, продуцируемых клетками интимы, а также выяснение молекулярных механизмов влияния на указанный процесс фактора некроза опухоли с целью идентификации новых мишеней терапии атеросклероза.