Medical clinical perspectives of the hypoxia adaptation factor inhibitors

Full Text

Введение Гипоксия, как типовой патологический процесс, в той или иной мере инициирует развитие и сопутствует течению многих заболеваний [7, 8, 10, 22]. Развитие гипоксии усугубляет течение основного заболевания и способствует его прогрессированию. Например, гипоксии отводится индуцирующая роль в патогенезе опухолевого роста, ревматических заболеваний [37, 42]. Следует отметить, что гипоксию относят к наиболее характерным чертам опухоли, в связи с чем она стала объектом многих научных исследований, целью которых является повышение эффективности противоопухолевой терапии [2]. Сегодня изучены фундаментальные механизмы формирования гипоксии различного генеза и индуцируемых ею нарушений метаболических и функциональных процессов на уровне клетки и субклеточных структур [4, 11, 18]. Выявлен ряд регуляторных факторов, обеспечивающих формирование срочной и долговременной адаптации клетки и всего организма к гипоксии [5, 6, 15, 17]. Среди них привлекает внимание регуляторный пептидный фактор адаптации к гипоксии - HIF-1α (гипоксией индуцированный фактор), активность которого увеличивается при снижении напряжения кислорода в крови. Показано, что этот фактор играет главную роль в системном ответе организма на гипоксию. Фактор HIF-1α ответственен за формирование основы долговременной адаптации к гипоксии, в том числе обеспечивает адаптацию опухолевых клеток к гипоксии, стимулирует ангиогенез [13, 42]. HIF-1α представляется удобной мишенью для фармакологического воздействия [12, 16]. Разработка лекарственных веществ, способных ингибировать активность HIF-1α и связанных с ним ростовых факторов, позволит более эффективно лечить онкологические и другие заболевания, в патогенезе которых индуцирующую роль играет кислородная недостаточность. Такой подход является актуальным направлением в экспериментальной фармакологии и имеет большое практическое значение для онкологии и ревматологии. Роль HIF-1α в развитии опухолей Как известно, при гипоксии в результате снижения внутриклеточного напряжения кислорода развиваются сначала функциональные, а затем структурные изменения в органах и тканях [9, 19]. Это относится и к гипоксии опухолевых клеток (внутриопухолевая гипоксия). Многие раковые опухоли включают области гипоксии. Внутриопухолевая гипоксия существенно ухудшает прогноз заболевания, поскольку в опухолевых тканях ангиогенез протекает очень интенсивно. Это, по-видимому, является одной из причин быстрого роста злокачественных опухолей. Кроме того, усиленный ангиогенез в опухоли способствует метастазированию ее клеток, что в конечном счете увеличивает смертность среди таких пациентов [42]. В развитии раковых опухолей гипоксия является важным (лимитирующим) фактором. Уменьшенная диффузия кислорода из окружающих тканей лимитирует рост опухоли. Однако со временем гипоксические условия стимулируют васкуляризацию и тем самым увеличивают рост опухоли и метастазирование. Для роста более 2 мм в диаметре опухоль нуждается в развитии собственных кровеносных сосудов, что достигается путем неоангиогенеза, управляемого транскрипционными факторами роста. В норме в организме существует равновесие между активаторами и ингибиторами неоангиогенеза [1, 26]. Активатором неоангиогенеза может выступать HIF-1α. В условиях тканевой гипоксии возрастает концентрация свободного HIF-1α в тканях. Повышенная экспрессия HIF-1α зарегистрирована при всех онкологических заболеваниях человека и подтверждается иммуногистохимическим изучением биопсий опухолевых тканей [54]. Повышенный уровень HIF-1α в тканях опухоли по сравнению с уровнем в окружающих нормальных тканях обычно коррелирует со степенью развития рака и смертностью. Повышение концентрации HIF-1α ведет к транскрипции гипоксия-зависимых генов и экспрессии сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGF), плацентарного фактора роста (PDGF) и эритропоэтина (EPO). Этот механизм развития сосудистого русла задействован в естественных условиях образования сосудов и при канцерогенезе. Молекулы факторов роста (VEGF, PDGF) присоединяются к внеклеточному домену трансмембранного рецептора тирозинкиназы. Происходит передача трансмембранного сигнала внутрь клетки, где запускаются сложные молекулярные реакции, приводящие к интенсивной пролиферации эндотелиальных клеток и развитию дополнительной капиллярной сети. Таким образом, в процессах пролиферации и ангиогенеза ткани опухоли неоспорима роль HIF-1α. Например, установлено, что концентрация HIF-1α и VEGF в тканях опухолей почек в несколько раз выше, чем в здоровых тканях [39]. Показано, что многие ростовые факторы являются HIF-индуцируемыми генами [45]. Например, важнейшим ростовым фактором, участвующим в развитии и прогрессии рака эндометрия, является VEGF. Семейство сосудистых эндотелиальных факторов роста представлено 5 членами: VEGF-A, VEGF-b, VEGF-C, VEGF-D и плацентарным ростовым фактором. Процесс неоангиогенеза обеспечивает фактор VEGF-A, который и называют VEGF [36]. C другой стороны, ростовые факторы индуцируют активируемый гипоксией транскрипционный фактор - HIF-1 (так называемый независимый от гипоксии путь активации HIF-1) [28]. На клеточной линии глиобластомы показана возможность инактивации этого сигнального пути при использовании ингибиторов рецептора фактора роста [32]. В условиях гипоксии происходит стабилизация HIF-1α, снижение степени деградации фактора и формирование функционально активных гетеродимеров с повышением ДНК-связывающей активности транскрипционного фактора, с чем часто связывают повышение экспрессии HIF-1-индуцированных генов в опухолях. Иными словами, недостаток кислорода инактивирует ферменты, гидроксилирующие HIF, что ведет к его активации. Кроме гипоксической стимуляции, HIF-1α также активируется фактором роста и онкогенами, которые стимулируют клеточную выживаемость и пролиферацию, тем самым влияя на потенциальную связь между ростом тканей и их обеспечением кислородом. Каскады фосфорилирования, такие как метаболические пути митоген-активированной протеинкиназы MAPK (mitogen activated protein kinase) и фосфоинозитид 3-киназы PI3K (phosphoinositide 3-kinase), активируются фактором роста и усиливают ответ HIF на гипоксию с помощью как посттрансляционного, так и трансляционного контроля [35]. Известно, что внутриклеточная деградация белков в протеасомах является регуляторным этапом многих физиологических и патологических процессов. Протеасомы принимают участие в деградации HIF-1α. Установлена определенная взаимосвязь между HIF-1α, ростовыми факторами и активностью протеасом в клетках. Показано, что в опухолях достаточно много факторов регулируют стабилизацию HIF-1α, однако роль протеасом в этом процессе также существенна [45]. Так, снижение деградации HIF-1α при использовании ингибиторов протеасом или при гипоксии приводит к значительному повышению экспрессии как мРНК VEGF, так и самого белка в опухолевых клетках [52]. Таким образом, возможно опосредованное участие протеасом в механизмах развития опухоли через изменение активности транскрипционных факторов и соответствующее изменение синтеза ростовых факторов. Своеобразные результаты обнаружены при опухолях эндометрия. Так, при раке эндометрия имело место сочетанное повышение тотальной протеасомной активности и ее пулов и повышение экспрессии HIF-1α. Возможно, это связано с существованием так называемого независимого от гипоксии пути активации HIF-1α. Стабилизация HIF-1α и, соответственно, увеличение его количества в ядерных экстрактах могут происходить при активации рецепторных тирозинкиназ при связывании с соответствующими ростовыми факторами, прежде всего с эпидермальным фактором роста и инсулиноподобным фактором роста [45]. Имеются также данные о наличии альтернативных протеасом-независимых путей деградации HIF-1α другими протеолитическими системами, прежде всего кальпаин-опосредованной [55]. Вероятно, при раке эндометрия активация HIF-1α происходит преимущественно альтернативным путем. При исследовании больных с морфологически верифицированным раком эндометрия было установлено наличие взаимосвязи между химотрипсинподобной активностью протеасом и содержанием ростовых факторов (VEGF) и HIF-1 в тканях опухоли. Обнаружены корреляционные связи между активностью пулов протеасом и экспрессией HIF-1 в опухолевой ткани, которые свидетельствуют о возможной регуляции содержания ростового и транскрипционного факторов протеасомами [21]. Другим важным протеолитическим регулятором содержания ростовых факторов, а возможно, и HIF-1α в клетках является металлопротеиназа PAPP-A (pregnancy-associateds plasma protein-A). Экспрессия HIF-1α и зависимая от него экспрессия VEGF в опухолях эндометрия связаны не только с активностью пула протеасом, но и с экспрессией металлопротеиназы PAPP-A [21]. Положительные корреляционные связи между содержанием HIF-1, VEGF и металлопротеиназой PAPP-A дают основание считать, что этот протеолитический фермент является важным регулятором содержания ростовых и транскрипционного факторов. В условиях опухолевой гипоксии HIF-1α вызывает экспрессию гена, кодирующего киназу 1 пируватдегидрогеназы (PDK1), которая ограничивает количество пирувата, входящего в цикл трикарбоновых кислот, что приводит к уменьшению усвоения кислорода митохондриями. Эта адаптивная реакция клеток опухоли на низкое содержание кислорода в тканях экономит молекулярный кислород, когда его недостаточно, и делает его доступным для других критических клеточных процессов. Эти данные позволяют предположить, что ингибирование HIF-1α или PDK1 in vivo может изменить метаболизм опухоли и должно приводить к снижению уровня оксигенации опухоли. В этих условиях можно ожидать повышения эффективности гипоксия-таргетной терапии, в частности гипоксического цитотоксина тирапазамина. Экспериментальная проверка на опухолевых клетках и ксенотрансплантатах с применением эхиномицина (низкомолекулярного ингибитора HIF-1α) и дихлорацетата (низкомолекулярного ингибитора PDK1) подтвердила данную гипотезу. Отмечено увеличение усвоения кислорода опухолевыми клетками, приведшее к снижению уровня оксигенации опухоли, что сопровождалось выраженным повышением эффективности тирапазамина. Таким образом, HIF-1α опосредует решающие физиологические ответы клетки на гипоксию. Использование этого гомеостатического механизма в клинической фармакотерапии может вести к существенному повышению эффективности лечения наиболее распространенных заболеваний [3, 14, 20]. Активация HIF-1α-фактора является принципиальным механизмом адаптации раковых клеток к гипоксии. В условиях опухолевой гипоксии HIF-1α выступает индуктором ростовых факторов, стимулирует ангиогенез и опухолевый рост. Поэтому для предотвращения развития раковой опухоли представляется необходимым тормозить активацию HIF-1α. Вместе с тем возможны различные подходы к регулированию активности HIF-1α и связанных с ним ростовых факторов при различных видах патологии. Ингибиторы HIF-1α и их клиническое значение в онкологии Выяснение патогенетической роли фактора HIF-1α в развитии опухолей делает возможным проведение целенаправленной, или таргетной, терапии злокачественных новообразований, поскольку с помощью лекарственных средств можно угнетать продукцию HIF-1α. Предпринято достаточно много попыток изменить активность HIF-1α с помощью лекарственных веществ [37, 48]. Учеными разных стран обсуждается вопрос о значимости ингибиторов HIF-1α в патогенетической терапии раковых опухолей. Многие современные лекарственные средства таргетной терапии опосредованно блокируют функции HIF-1α-фактора и оказывают антиангиогенное действие (рис. 1). Например, трастузумаб (герцептин), гефитиниб, цалфостин С (ингибитор протеинкиназы С), вортманнин (ингибитор PI3K), PD98095 (ингибитор MAPK), рапамицин (сиролимус, ингибитор FRAP/mTOR), сорафениб и сунитиниб (мультикиназные ингибиторы) [25, 41]. Учитывая непосредственное влияние протеинов HIF-1α на процессы ангиогенеза и опухолевый рост, ведется поиск прямых блокаторов HIF-1α. Предложен экспериментальный препарат AMG 386 (нейтрализующий полипептид), который останавливает проангиогенные эффекты HIF-1α [44]. Изучая проблему создания селективных противоопухолевых препаратов, рассматривается возможность блокады экспрессии HIF-lα с помощью низкомолекулярных веществ и моноклональных антител. Так, разработан препарат WX-G250 - химерное моноклональное антитело, нацеленное на HIF-1α [29]. Интерес исследователей обращен также к факторам роста, их рецепторам и путям, которые находятся под влиянием HIF-lα. В настоящее время активно изучаются ингибиторы сигнальных путей рецепторов ростовых факторов, PI3K, МАРК и их downstream белков, таких, как mTOR, причем в ряде экспериментов был показан определенный терапевтический эффект. Среди веществ, способных подавлять активность HIF-1α или снижать его клеточный уровень, следует отметить его природный антагонист p35srj, ингибиторы белка теплового шока 90 (радицикол, гедданамицин), топоизомеразы I и II, PI3K, в частности вортманнин, а также винкристин, таксол, 2-метоксиэстрадиол, производные карбомицина. В исследованиях с культурами опухолевых клеток и с опухолями мышей установлен противоопухолевый эффект некоторых из упомянутых веществ. Разработаны механизмы стабилизации HIF-1α путем изменения скорости его метаболизма (уменьшение синтеза и/или ускорение распада) [46]. Уменьшение образования HIF-1α. HIF-1α является субъединицей гетеродимерного белка HIF-1, бета-субъединица которого экспрессируется постоянно, альфа же субъединица регулируется кислородом (рис. 1). Синтез HIF-1α может реализовываться через кислород-независимые механизмы. Так, HIF-1α синтезируется в реакциях, контролируемых такими сигнальными системами, как MAPK (mitogen activated proteinkinase - активируется на сигналы, способствующие пролиферации) и PI3K (фосфатидилинозитол-3-киназа - регуляторный белок, находящийся на пересечении различных сигнальных путей и контролирующий ключевые функции клетки, особое значение имеет в регуляции таких функций, как рост, выживаемость, опухолевая трансформация). Активируются сигнальные системы MAPK и PI3K через рецептор тирозинкиназы, специфический сукцинат-зависимый рецептор GPR-91 и др. [6]. Снижать синтез HIF-1α можно разными путями. Выделяют ингибиторы образования белка еще на этапе мРНК. Так действует олигонуклеотид под шифром EZN-2968, который снижает уровень HIF-1α как in vitro, так и in vivo. В клинических исследованиях вещество показало свою эффективность, получены положительные результаты у пациентов с почечной карциномой с метастазами. Другим соединением, ингибирующим РНК экспрессию HIF-1α, является аминофлавон. Второй подход - блокада синтеза HIF-1α на рибосомах на матрице информационной РНК, то есть блокада трансляции HIF-1α. К препаратам с таким механизмом относят топотекан, его более активный и более удобный по фармакокинетическим характеристикам аналог под шифром EZN-2208. Угнетают образование HIF-1α сердечные гликозиды, что открывает новые возможности применения данной группы кардиотонических средств. Обсуждается вопрос использования сердечных гликозидов в качестве противораковых средств. Проводятся экспериментальные и клинические испытания некоторых из них [53]. В качестве еще одного перспективного средства, ингибирующего избыточную экспрессию HIF-1α при некоторых солидных опухолях, рассматривается препарат носкапин (наркотин - производное бензилизохинолина). Этот алкалоид опия применяется как противокашлевое средство. Экспериментальное изучение носкапина показало его антиангиогенное действие при глиомах (нейроэпителиальных опухолях) [40]. Отечественными исследователями показана роль опиоидной системы (а именно, мю- и дельта- опиоидных рецепторов) в повышении устойчивости миокарда к ишемии-реперфузии при адаптации к хронической нормобарической гипоксии. Предварительная блокада опиоидных рецепторов налтрексоном и другими более избирательными антагонистами опиоидных рецепторов предупреждала кардиопротекторный эффект адаптации [24]. Ускорение распада HIF-1α. В условиях нормоксии деградация белкового фактора происходит путем гидроксилирования аминокислотных остатков пролина молекулы HIF-1α ферментом пролилгидроксилазой (PHD), который является молекулярным сенсором кислорода [38]. В дальнейшем измененная субъединица HIF-1α подвергается протеасомной деградации. В состоянии гипоксии белковая молекула HIF-1α не гидроксилируется, остается стабильной и накапливается. Субъединицы HIF-1α и HIF-1β объединяются. Образовавшийся в результате этого транскрипционный белок HIF-1 в ядре клетки связывается с особыми последовательностями ДНК в генах, экспрессия которых индуцируется гипоксией [46]. Усилить протеасомную деградацию HIF-1α могут ингибиторы Hsp90 (белок теплового шока), например препарат гелданамицин. Белок Hsp90 участвует в укладке, активации и сборке белков, в том числе HIF-1α. Связывание гелданамицина с Hsp90 нарушает взаимодействие Hsp90 с HIF-1α, препятствуя его правильной укладке и подвергая разрушению, опосредуемому протеасомой. Свойством ингибитора белка теплового шока обладает и бензилиден-лактамное соединение KNK437, которое угнетает обусловленную гипоксией резистентность раковых клеток к лучевой терапии. Это связано с тем, что HIF-1α в значительной степени отвечает за резистентность опухолевых клеток к ионизирующей радиации в условиях гипоксии [43]. Эхиномицин и антрациклиновые антибиотики (доксорубицин, даунорубицин) угнетают транскрипционную активность HIF-1-фактора, блокируя его связывание с компонентами транскрипционного активного комплекса (HRE). При множественной миеломе используют ингибитор транскрипционной активности HIF-1-фактора - бортезомиб. Данный препарат относится к ингибиторам протеасом. Угнетение активности протеасом ведет к такому типу накопления HIF-1α, как в случае нормоксии. Парадоксально, но при блокаде протеасом накопленный HIF-1α транскрипционно неактивен [42]. Применение ингибитора 20S протеасомы бортезомиба приводит к снижению экспрессии VEGF в культуре раковых клеток мочевого пузыря [33] В последние годы определенные успехи достигнуты в фармакотерапии рака почки и мочевого пузыря, при которых HIF-1α, факторы роста, тирозинкиназы, mTOR и управляемые ими процессы рассматриваются как основные мишени в медикаментозном лечении. Основные механизмы действия таргетных препаратов, блокирующих ангиогенез и пролиферацию при раке почки, можно представить такими группами [1]: 1. Блокада циркулирующих во внеклеточной среде молекул VEGF. Такой механизм действия характерен для препаратов бевацизумаб, афлиберцепт, леналидомид. Бевацизумаб (IgG1-рекомбинантное моноклональное антитело) связывает все изоформы VEGF, ингибирует ангиогенез. Показана высокая эффективность применения бевацизумаба для лечения распространенного почечноклеточного рака (увеличение безрецидивного периода и уменьшение объема опухоли по сравнению с плацебо) [31]. Афлиберцепт избирательно связывает молекулы VEGF, препятствуя их взаимодействию с рецепторами тирозинкиназ. Леналидомид - ингибирует VEGF и фактор роста фибробластов (FGF), модулирует Т-клеточное звено иммунитета [27]. 2. Селективная блокада внеклеточных доменов рецепторов тирозинкиназ VEGFR, PDGFR, EGFR. Этот механизм характерен для препаратов пазопаниб, эрлотиниб, цетуксимаб, панитумумаб, акситиниб, ваталаниб и семаксаниб. Пазопаниб - селективный ингибитор VEGFR и PDGFR. Уменьшает размеры опухолей на 30 % [49]. Эрлотиниб - селективный ингибитор рецепторов эпидермального фактора роста (EGFR). Цетуксимаб (антитела к EGFR), панитумумаб (высокоспецифичное человеческое антитело к EGFR). Остальные препараты проходят экспериментально-клинические исследования [23]. 3. Одновременная блокада доменов рецепторов тирозинкиназ и внутриклеточных тирозинкиназ. Так действуют препараты сорафениб (ингибитор мультикиназ и рецепторов на поверхности клеток), сунитиниб (низкомолекулярный ингибитор тирозинкиназы VEGFR и PDGFR), лапатиниб (активный ингибитор EGFR и ErbB2-тирозинкиназ). Регорафениб и цедираниб проходят экспериментально-клинические исследования [51]. 4. Блокада внутриклеточного энзима mTOR, активирующего киназы, ответственные за поддержку жизнедеятельности опухолевых клеток. При участии mTOR возрастает синтез HIF-1α. Гиперпродукция HIF-1α вызывает в свою очередь гиперэкспрессию VEGF и PDGF с последующей активацией ангиогенеза. Учитывая влияние mTOR на синтез HIF-1α, блокада mTOR была избрана одной из мишеней таргетной терапии. Специфическими блокаторами mTOR являются темсиролимус и эверолимус [30]. Следует помнить, что стратегия использования ингибиторов HIF-1α в онкологии может оказать неблагоприятное воздействие при сопутствующих ишемических состояниях. Если в терапии раковых опухолей существует необходимость угнетения активности HIF-1α, то при ишемической болезни сердца и ишемии головного мозга патогенетически оправдано усиление активности данного фактора. Повышение экспрессии фактора роста эндотелия сосудов через активацию HIF-1α индуцирует образование новых кровеносных сосудов в области ишемии мозга и сердца, усиливая кровоток и кислородное обеспечение, тем самым уменьшая ишемию [47]. Другие показания к применению ингибиторов HIF-1α Помимо роста злокачественных новообразований и их метастазирования патологический ангиогенез лежит в основе ревматоидного артрита, ретинопатии, псориаза. Так, ревматоидный артрит характеризуется гипоксией и экспрессией гипоксией индуцируемых транскрипционных факторов. Наблюдаемая при ревматоидном артрите опухолеподобная гиперплазия синовиальной оболочки оказывает деструктивное действие на внутрисуставные ткани и формируется из новообразованных сосудов. При этом важную роль в ангиогенезе и пролиферации фибробластов играют факторы роста эндотелиоцитов, тромбоцитов, фибробластов, вырабатываемые макрофагоподобными и фибробластоподобными синовиоцитами. Пролилгидроксилаза (PHD-2) регулирует уровень HIF-1-фактора и экспрессию ангиогенных генов в клетках фибробластоподобных синовиоцитов, поэтому эта изоформа фермента может служить фармакологической мишенью при данном заболевании [37]. Есть исследования, показавшие, что селективное ингибирование HIF-1α в адипоцитах может стать эффективным терапевтическим подходом в коррекции метаболической дисфункции при ожирении. Так, изучен ингибитор HIF-1α под шифром PX-478, эффективно подавляющий активацию HIF-1α в жировой ткани мышей, получавших богатую жирами диету. Ингибирование HIF-1α приводило к снижению прибавки веса у животных в условиях липидной нагрузки. Кроме того, применение PX-478 уменьшало фиброз жировой ткани и количество воспалительных инфильтратов в ней [50]. Заключение В развитии ряда заболеваний гипоксия играет индуцирующую роль. Так, в онкологии отмечено, что гипоксия стимулирует ангиогенез в области опухолевого роста, способствует метастазированию опухолевых клеток. Объективным показателем развития гипоксии является активность белкового регуляторного фактора HIF-1α (гипоксией индуцированный фактор-1α), который играет ведущую роль в реализации процессов адаптации клеток, тканей и всего организма на гипоксию [34]. Поскольку HIF-1α является патогенетически значимым фактором в развитии опухолей и ряда других заболеваний, то изучение регуляции его содержания необходимо для четкого понимания механизмов развития заболевания и поиска эффективных лекарственных средств для молекулярно-направленной терапии. HIF-1α регулирует процессы адаптации тканей, в том числе тканей опухоли, к состоянию гипоксии, и его можно использовать в качестве специфической мишени для фармакологического воздействия. Такой подход открывает новые возможности для таргетной фармакотерапии в медицинской практике путем использования ингибиторов HIF-1α и связанных с ним ростовых факторов. Применение ингибиторов HIF-1α является актуальным для фармакотерапии онкологических, ревматических и других заболеваний, в патогенезе которых имеют место состояния гипоксии и ишемии, поэтому поиск ингибиторов экспрессии и стимуляторов деградации HIF-1α также актуален, как и разработка селективных ингибиторов ростовых факторов и рецепторов к ним. Модуляция активности HIFα в клетках опухолевого микроокружения может быть важным инструментом терапевтического воздействия. Сегодня в онкологической практике успешно применяется ряд препаратов, снижающих активность ростовых факторов, индуцированную HIF-1α. Однако ингибирования одного лишь HIF-1α может быть недостаточно для остановки ангиогенеза и роста опухоли, так как имеются HIF-независимые пути развития заболевания, которые не позволят получить ожидаемый результат. В этом случае необходима комбинация ингибиторов HIF-1-фактора со средствами традиционной терапии.

About the authors

Vasiliy Egorovich Novikov

Smolensk State Medical University

Email: nau@sgma.info
Doctor of Medical Sciences, professor, Head of the Department of Pharmacology

Elena Vasilievna Pozhilova

Smolensk State Medical University

Email: nau@sgma.info
Postgraduate Fellow, Dept. of Pharmacology

Olga Sergeevna Levchenkova

Smolensk State Medical University

Email: os.levchenkova@gmail.com
PhD (Pharmacology), Senior Lecturer, Dept. of Pharmacology

References