Способность сперматозоидов с фрагментированной ДНК связываться с блестящей оболочкой ооцита

Обложка


Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация

Обоснование. Среди бесплодных пар значительную долю составляют случаи с идиопатическим бесплодием. При этом у партнера нормозооспермия может сопровождаться высокой долей сперматозоидов с фрагментированной ДНК. Изучение селективности блестящей оболочки ооцита в отношении сперматозоидов с фрагментированной ДНК для совершенствования методов отбора сперматозоидов и повышения эффективности программ экстракорпорального оплодотворения — крайне перспективное направление.

Цель — оценить способность сперматозоидов с фрагментированной ДНК связываться с блестящей оболочкой ооцита.

Материалы и методы. Материалом для исследования послужили образцы эякулята от пациентов с нормозооспермией (n = 5), образцы эякулята доноров спермы (n = 4), а также блестящие оболочки незрелых ооцитов (n = 25) от девяти пациенток. Эякулят готовили путем центрифугирования в градиенте плотности силиконовых частиц и с помощью метода флотации сперматозоидов, фрагментацию ДНК сперматозоидов оценивали с помощью метода флуоресцентного мечения одно- и двунитевых разрывов ДНК (TUNEL assay). Работу с гаметами и блестящими оболочками ооцитов проводили с помощью микроманипуляционного оборудования и фемтосекундного лазера.

Результаты. В исследовании показано, что сперматозоиды с фрагментированной ДНК могут эффективно связываться с блестящей оболочкой ооцита. Однако среди сперматозоидов, связавшихся с блестящей оболочкой, доля клеток с фрагментированной ДНК была достоверно ниже, чем в группе не связавшихся. Полученные данные указывают на важную роль блестящей оболочки ооцита в селекции сперматозоидов с интактной ДНК.

Заключение. Сперматозоиды с фрагментированной ДНК сохраняют способность связываться с блестящей оболочкой ооцита. Селективные свойства блестящей оболочки ооцита в отношении сперматозоидов с фрагментированной ДНК можно использовать для отбора гамет при внутрицитоплазматической инъекции сперматозоидов в ооцит и для выбора оптимальной стратегии в случаях «скрытого» мужского фактора, при котором мужчины с нормозооспермией сталкиваются с нарушением фертильности, в частности, из-за повреждения ДНК сперматозоидов.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Мария Алексеевна Ищук

Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта

Email: mashamazilina@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-4443-4287
SPIN-код: 1237-6373
Россия, Санкт-Петербург

Евгения Михайловна Комарова

Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта

Email: evgmkomarova@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-9988-9879
SPIN-код: 1056-7821

канд. биол. наук

Россия, Санкт-Петербург

Елена Александровна Лесик

Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта

Email: lesike@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-1611-6318
SPIN-код: 6102-4690

канд. биол. наук

Россия, Санкт-Петербург

Ирина Дмитриевна Мекина

Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта

Автор, ответственный за переписку.
Email: irendf@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-0813-5845
SPIN-код: 4682-8590

канд. биол. наук

Россия, Санкт-Петербург

Анна Андреевна Пендина

Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта

Email: pendina@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-9182-9188
SPIN-код: 3123-2133

канд. биол. наук

Россия, Санкт-Петербург

Александр Мкртичевич Гзгзян

Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта

Email: agzgzyan@gmail.com
ORCID iD: 0000-0003-3917-9493
SPIN-код: 6412-4801

д-р мед. наук, профессор

Россия, Санкт-Петербург

Наталья Игоревна Тапильская

Научно исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта

Email: tapnatalia@mail.ru
ORCID iD: 0000-0001-5309-0087
SPIN-код: 3605-0473

д-р мед. наук, профессор

Россия, Санкт-Петербург

Олеся Николаевна Беспалова

Научно исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта

Email: shiggerra@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-6542-5953
SPIN-код: 4732-8089

д-р мед. наук

Россия, Санкт-Петербург

Список литературы

  1. Agarwal A., Mulgund A., Hamada A., et al. A unique view on male infertility around the globe // Reprod. Biol. Endocrinol. 2015. Vol. 13. No. 1. P. 1–9. doi: 10.1186/S12958-015-0032-1
  2. Kushnir V.A., Barad D.H., Albertini D.F., et al. Systematic review of worldwide trends in assisted reproductive technology 2004–2013 // Reprod. Biol. Endocrinol. 2017. Vol. 15. No. 1. P. 1–9. doi: 10.1186/S12958-016-0225-2
  3. Simon L., Proutski I., Stevenson M., et al. Sperm DNA damage has a negative association with live-birth rates after IVF // Reprod. Biomed. Online. 2013. Vol. 26. No. 1. P. 68–78. doi: 10.1016/J.RBMO.2012.09.019
  4. Leung E.T.Y., Lee C.L., Tian X., et al. Simulating nature in sperm selection for assisted reproduction // Nat. Rev. Urol. 2022. Vol. 19. No. 1. P. 16–36. doi: 10.1038/S41585-021-00530-9
  5. Marzano G., Chiriacò M.S., Primiceri E., et al. Sperm selection in assisted reproduction: A review of established methods and cutting-edge possibilities // Biotechnol. Adv. 2020. Vol. 40. doi: 10.1016/J.BIOTECHADV.2019.107498
  6. Gil M., Sar-Shalom V., Melendez Sivira Y., et al. Sperm selection using magnetic activated cell sorting (MACS) in assisted reproduction: a systematic review and meta-analysis // J. Assist. Reprod. Genet. 2013. Vol. 30. No. 4. P. 479–485. doi: 10.1007/S10815-013-9962-8
  7. Sakkas D., Ramalingam M., Garrido N., et al. Sperm selection in natural conception: what can we learn from Mother Nature to improve assisted reproduction outcomes? // Hum. Reprod. Update. 2015. Vol. 21. No. 6. P. 711–726. doi: 10.1093/humupd/dmv042
  8. Liu D.Y., Baker H.W.G. Human sperm bound to the zona pellucida have normal nuclear chromatin as assessed by acridine orange fluorescence // Hum. Reprod. 2007. Vol. 22. No. 6. P. 1597–1602. doi: 10.1093/HUMREP/DEM044
  9. Chiu P.C.N., Lam K.K.W., Wong R.C.W., et al. The identity of zona pellucida receptor on spermatozoa: an unresolved issue in developmental biology // Semin. Cell Dev. Biol. 2014. Vol. 30. P. 86–95. doi: 10.1016/J.SEMCDB.2014.04.016
  10. Redgrove K.A., Anderson A.L., Dun M.D., et al. Involvement of multimeric protein complexes in mediating the capacitation-dependent binding of human spermatozoa to homologous zonae pellucidae // Dev. Biol. 2011. Vol. 356. No. 2. P. 460–474. doi: 10.1016/J.YDBIO.2011.05.674
  11. Liu D.Y., Garrett C., Baker H.W.G. Low proportions of sperm can bind to the zona pellucida of human oocytes // Hum. Reprod. 2003. Vol. 18. No. 11. P. 2382–2389. doi: 10.1093/HUMREP/DEG456
  12. Menkveld R., Vermeiden J.P.W., Rhemrev J.P.T., et al. Acrosomal morphology as a novel criterion for male fertility diagnosis: relation with acrosin activity, morphology (strict criteria), and fertilization in vitro // Fertil. Steril. 1996. Vol. 65. No. 3. P. 637–644. doi: 10.1016/S0015-0282(16)58167-9
  13. Garrett C., Liu D.Y., Baker H.W.G. Selectivity of the human sperm-zona pellucida binding process to sperm head morphometry // Fertil. Steril. 1997. Vol. 67. No. 2. P. 362–371. doi: 10.1016/S0015-0282(97)81924-3
  14. WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen. 5th ed. Geneva: World Health Organization, 2010 [дата обращения 05.09.2023]. Доступ по ссылке: https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/44261/97859051060905_rus.pdf?sequence=34&isAllowed=y
  15. Dyk Q.V. Incidence of aneuploid spermatozoa from subfertile men: selected with motility versus hemizona-bound // Hum. Reprod. 2000. Vol. 15. No. 7. P. 1529–1536. doi: 10.1093/humrep/15.7.1529
  16. Gelbaya T.A., Potdar N., Jeve Y.B., et al. Unexplained Infertility, the controversial matter in management of infertile couples // J. Reprod. Infertil. 2015. Vol. 16. No. 1. P. 1.
  17. Mackenna A. Contribution of the male factor to unexplained infertility: a review // Int. J. Androl. 1995. Vol. 18. No. 1. P. 58–61. doi: 10.1111/J.1365-2605.1995.TB00640.X
  18. Wang C., Swerdloff R.S. Limitations of semen analysis as a test of male fertility and anticipated needs from newer tests // Fertil. Steril. 2014. Vol. 102. No. 6. P. 1502–1507. doi: 10.1016/J.FERTNSTERT.2014.10.021
  19. Burkman L.J., Coddington C.C., Franken D.R., et al. The hemizona assay (HZA): development of a diagnostic test for the binding of human spermatozoa to the human hemizona pellucida to predict fertilization potential // Fertil. Steril. 1988. Vol. 49. No. 4. P. 688–697. doi: 10.1016/S0015-0282(16)59841-0
  20. De Almeida Ferreira Braga D.P., Iaconelli A., De Cássia Sávio Figueira R., et al. Outcome of ICSI using zona pellucida-bound spermatozoa and conventionally selected spermatozoa // Reprod. Biomed. Online. 2009. Vol. 19. No. 6. P. 802–807. doi: 10.1016/J.RBMO.2009.09.020
  21. Liu D.Y., Baker H.W.G. Defective sperm-zona pellucida interaction: a major cause of failure of fertilization in clinical in-vitro fertilization // Hum. Reprod. 2000. Vol. 15. No. 3. P. 702–708. doi: 10.1093/humrep/15.3.702
  22. Liu D.Y., Baker H.W.G. Frequency of defective sperm-zona pellucida interaction in severely teratozoospermic infertile men // Hum. Reprod. 2003. Vol. 18. No. 4. P. 802–807. doi: 10.1093/HUMREP/DEG164
  23. Leung E.T.Y., Lee B.K.M., Lee C.L., et al. The role of spermatozoa-zona pellucida interaction in selecting fertilization-competent spermatozoa in humans // Front. Endocrinol. 2023. Vol. 14. doi: 10.3389/FENDO.2023.1135973/FULL
  24. Menkveld R., Franken D.R., Kruger T.F., et al. Sperm selection capacity of the human zona pellucida // Mol. Reprod. Dev. 1991. Vol. 30. No. 4. P. 346–352. doi: 10.1002/mrd.1080300409
  25. Liu D.Y., Baker H.W.G. Acrosome status and morphology of human spermatozoa bound to the zona pellucida and oolemma determined using oocytes that failed to fertilize in vitro // Hum. Reprod. 1994. Vol. 9. No. 4. P. 673–679. doi: 10.1093/oxfordjournals.humrep.a138570
  26. Liu D.Y., Gordon Baker H.W. High frequency of defective sperm – zona pellucida interaction in oligozoospermic infertile men // Hum. Reprod. 2004. Vol. 19. No. 2. P. 228–233. doi: 10.1093/humrep/deh067
  27. Huszar G., Ozenci C.C., Cayli S., et al. Hyaluronic acid binding by human sperm indicates cellular maturity, viability, and unreacted acrosomal status // Fertil. Steril. 2003. Vol. 79. No. 3. P. 1616–1624. doi: 10.1016/S0015-0282(03)00402-3
  28. Balasuriya A., Serhal P., Doshi A., et al. Processes involved in assisted reproduction technologies significantly increase sperm DNA fragmentation and phosphatidylserine translocation // Andrologia. 2014. Vol. 46. No. 2. P. 86–97. doi: 10.1111/and.12052
  29. Panner Selvam M.K., Ambar R.F., Agarwal A., et al. Etiologies of sperm DNA damage and its impact on male infertility // Andrologia. 2021. Vol. 53. No. 1. doi: 10.1111/AND.13706
  30. Tesarik J., Kopecny V., Plachot M., et al. Activation of nucleolar and extranucleolar RNA synthesis and changes in the ribosomal content of human embryos developing in vitro // J. Reprod. Fertil. 1986. Vol. 78. No. 2. P. 463–470. doi: 10.1530/JRF.0.0780463
  31. Tesarik J., Kopecny V., Plachot M., et al. Early morphological signs of embryonic genome expression in human preimplantation development as revealed by quantitative electron microscopy // Dev. Biol. 1988. Vol. 128. No. 1. P. 15–20. doi: 10.1016/0012-1606(88)90261-8
  32. Veeck L.L. Atlas of the human oocyte and early conceptus. Philadelphia: Williams Wilkins, 1991. 441 p.
  33. Ganeva R., Parvanov D., Vasileva M., et al. Higher pregnancy rates after zona pellucida sperm selection // Fertil. Steril. 2019. Vol. 112. No. 3. doi: 10.1016/j.fertnstert.2019.07.826
  34. Liu F., Qiu Y., Zou Y. et al. Use of zona pellucida-bound sperm for intracytoplasmic sperm injection produces higher embryo quality and implantation than conventional intracytoplasmic sperm injection // Fertil. Steril. 2011. Vol. 95. No. 2. P. 815–818. doi: 10.1016/J.FERTNSTERT.2010.09.015
  35. Black M., Liu D.Y., Bourne H., et al. Comparison of outcomes of conventional intracytoplasmic sperm injection and intracytoplasmic sperm injection using sperm bound to the zona pellucida of immature oocytes // Fertil. Steril. 2010. Vol. 93. No. 2. P. 672–674. doi: 10.1016/J.FERTNSTERT.2009.08.063
  36. Jin R., Bao J., Tang D., et al. Outcomes of intracytoplasmic sperm injection using the zona pellucida-bound sperm or manually selected sperm // J. Assist. Reprod. Genet. 2016. Vol. 33. No. 5. P. 597–601. doi: 10.1007/s10815-016-0676-6

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рис. 1. Блок-схема эксперимента. GV — стадия зародышевого пузырька; MI — метафаза I мейоза; MII — метафаза II мейоза

Скачать (807KB)
3. Рис. 2. Число сперматозоидов, связавшихся с блестящими оболочками ооцитов у пациенток 1–9

Скачать (142KB)
4. Рис. 3. Половины блестящей оболочки ооцита после отмывки от несвязавшихся сперматозоидов: a — после добавления эякулята донора; b — после добавления эякулята пациента. Фазовый контраст, увеличение ×400

Скачать (59KB)
5. Рис. 4. Доля гамет с фрагментированной ДНК среди сперматозоидов, связавшихся с блестящими оболочками ооцитов и не связавшихся, оставшихся в капле. ZP — блестящая оболочка (Me, Q1–Q3; блочная диаграмма с ограничителями выбросов; U-критерий Манна – Уитни, p = 0,049)

Скачать (70KB)

© Эко-Вектор, 2023

Ссылка на описание лицензии: https://eco-vector.com/for_authors.php#07

СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС 77 - 66759 от 08.08.2016 г. 
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия Эл № 77 - 6389
от 15.07.2002 г.



Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах