ВЭЖХ анализ фармакологического препарата «Сангвиритрин»
- Авторы: Сулейманова Л.Р.1, Титова К.Е.1, Павлова Л.В.1
-
Учреждения:
- Самарский национальный исследовательский университет имени академика С.П. Королева
- Выпуск: Том 1 (2023)
- Страницы: 294-295
- Раздел: Медицина и фармация
- URL: https://journals.eco-vector.com/osnk-sr2023/article/view/408267
- ID: 408267
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Обоснование. В фармакопейную статью, определяющую порядок контроля препарата на основе настойки маклеи - «Сангвиритрин», заложен только фотометрический метод количественного анализа, содержащихся в данном препарате действующих веществ сангвинарина и хелеритрина [1]. С целью обеспечения качества при производстве «Сангвиритрина» предлагается разработать методику анализа препарата методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
Цель - разработать методику ВЭЖХ-анализа препарата «Сангвиритрин».
Методы. Объектом исследования являлся препарат «Сангвиритрин», приобретенные в аптечной сети. В качестве основы для новой методики использовали статью [1]. В качестве подвижной фазы (ПФ) использовался раствор додецилсульфата натрия (ДСН) и ацетонитрил [1], а также 0,01М фосфатный буфер и метанол. Работу проводили на ВЭЖХ-системе AZURA Knauer, колонка Phenomenex 250˟4,6 мм, С18 5 мкм. Детектирование осуществляли спектрофотометрическим детектором при λ=270 нм, а так же диодно-матричным детектором в диапазоне длин волн с 200 до 700 нм.
Результаты. В условиях анализа, представленных в статье [1], не удалось достигнуть элюирования компонентов. Оптимизацию условий элюирования проводили путем варьирования концентрации ДСН, величины рН, применения изократического варианта элюирования и градиентного. Элюирование компонентов на хроматограмме получили только при концентрации ДСН 0,0005М. Анализ с использованием диодно-матричный детектора на аналогичном приборе в аналогичных условиях показал наложение пиков 3х веществ в области пика, соответствующего сангвинарину. При варьировании содержания ацетонитрила в подвижной фазе при градиентном элюировании существенных изменений в разрешении пиков не было, при этом было установлено, что появление пиков на хроматограмме всегда соответствует 40% содержанию ацетонитрила в подвижной фазе. Для разделения компонентов оценили применение ПФ на основе 0,001М фосфатного буфера, ацетонитрила, а также рассмотрели вариант ПФ с метанолом. Классический состав подвижной фазы в виде 0,01 М фосфатного буфера и ацетонитрила позволил получить на хроматограмме только 2 пика. Четыре пика на хроматограмме удалось получить при использовании в качестве подвижной фазы смеси ацетонитрила, метанола и фосфатного буферного раствора. С точки зрения теории, сангвинарин и хелеритрин диссоциируют по щелочному типу, поэтому в кислой ПФ могут присутствовать как молекулярные, так и ионные формы, которые могут выходить разными пиками, поэтому был проведен анализ в ПФ с рН=7. Однако анализ не дал корректных результатов, и время анализа увеличилось до 3 ч. Учитывая все полученные данные, было решено скомбинировать в водной части подвижной фазы додецилсульфат натрия и фосфатный буфер для реализации всех способов взаимодействия сорбат-сорбент в одном анализе. Оптимальные результаты были получены при разделении в изократическом режиме элюирования с ПФ 60% об. 0,0005 М ДСН 0,01 М фосфатный буфер рН=2,8 и 40 %об. ацетонитрила (рис.1). Пик с временем удерживания tR = 22,8 мин соответствует сангвинарину, пик с tR = 37.9 мин – хелеритрину.
Рис. 1. ВЭЖХ-анализ препарата «Сангвиритрин» в оптимальных условиях
Выводы. Оптимальные условия ВЭЖХ-анализа препарата «Сангвиритрин» для определения содержания сангвинарина и хелеритрина: колонка 250˟4,6 мм, С18 5 мкм, детектирование при λ=270 нм; подвижная фаза: 60% раствор 0,01 М фосфатного буфера и 0,0005М додецилсульфата натрия рН=2,8 - 40 % ацетонитрил; изократический режим элюирования.
Ключевые слова
Полный текст
Обоснование. В фармакопейную статью, определяющую порядок контроля препарата на основе настойки маклеи - «Сангвиритрин», заложен только фотометрический метод количественного анализа, содержащихся в данном препарате действующих веществ сангвинарина и хелеритрина [1]. С целью обеспечения качества при производстве «Сангвиритрина» предлагается разработать методику анализа препарата методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
Цель - разработать методику ВЭЖХ-анализа препарата «Сангвиритрин».
Методы. Объектом исследования являлся препарат «Сангвиритрин», приобретенные в аптечной сети. В качестве основы для новой методики использовали статью [1]. В качестве подвижной фазы (ПФ) использовался раствор додецилсульфата натрия (ДСН) и ацетонитрил [1], а также 0,01М фосфатный буфер и метанол. Работу проводили на ВЭЖХ-системе AZURA Knauer, колонка Phenomenex 250˟4,6 мм, С18 5 мкм. Детектирование осуществляли спектрофотометрическим детектором при λ=270 нм, а так же диодно-матричным детектором в диапазоне длин волн с 200 до 700 нм.
Результаты. В условиях анализа, представленных в статье [1], не удалось достигнуть элюирования компонентов. Оптимизацию условий элюирования проводили путем варьирования концентрации ДСН, величины рН, применения изократического варианта элюирования и градиентного. Элюирование компонентов на хроматограмме получили только при концентрации ДСН 0,0005М. Анализ с использованием диодно-матричный детектора на аналогичном приборе в аналогичных условиях показал наложение пиков 3х веществ в области пика, соответствующего сангвинарину. При варьировании содержания ацетонитрила в подвижной фазе при градиентном элюировании существенных изменений в разрешении пиков не было, при этом было установлено, что появление пиков на хроматограмме всегда соответствует 40% содержанию ацетонитрила в подвижной фазе. Для разделения компонентов оценили применение ПФ на основе 0,001М фосфатного буфера, ацетонитрила, а также рассмотрели вариант ПФ с метанолом. Классический состав подвижной фазы в виде 0,01 М фосфатного буфера и ацетонитрила позволил получить на хроматограмме только 2 пика. Четыре пика на хроматограмме удалось получить при использовании в качестве подвижной фазы смеси ацетонитрила, метанола и фосфатного буферного раствора. С точки зрения теории, сангвинарин и хелеритрин диссоциируют по щелочному типу, поэтому в кислой ПФ могут присутствовать как молекулярные, так и ионные формы, которые могут выходить разными пиками, поэтому был проведен анализ в ПФ с рН=7. Однако анализ не дал корректных результатов, и время анализа увеличилось до 3 ч. Учитывая все полученные данные, было решено скомбинировать в водной части подвижной фазы додецилсульфат натрия и фосфатный буфер для реализации всех способов взаимодействия сорбат-сорбент в одном анализе. Оптимальные результаты были получены при разделении в изократическом режиме элюирования с ПФ 60% об. 0,0005 М ДСН 0,01 М фосфатный буфер рН=2,8 и 40 %об. ацетонитрила (рис.1). Пик с временем удерживания tR = 22,8 мин соответствует сангвинарину, пик с tR = 37.9 мин – хелеритрину.
Рис. 1. ВЭЖХ-анализ препарата «Сангвиритрин» в оптимальных условиях
Выводы. Оптимальные условия ВЭЖХ-анализа препарата «Сангвиритрин» для определения содержания сангвинарина и хелеритрина: колонка 250˟4,6 мм, С18 5 мкм, детектирование при λ=270 нм; подвижная фаза: 60% раствор 0,01 М фосфатного буфера и 0,0005М додецилсульфата натрия рН=2,8 - 40 % ацетонитрил; изократический режим элюирования.
Об авторах
Лия Ринатовна Сулейманова
Самарский национальный исследовательский университет имени академика С.П. Королева
Email: liyasul2002@mail.ru
студентка, группа 4325-280302D, направление наноинженерия
Россия, СамараКристина Евгеньевна Титова
Самарский национальный исследовательский университет имени академика С.П. Королева
Email: christine03@yandex.ru
студентка, группа 4325-280302D, направление наноинженерия
Россия, СамараЛариса Викторовна Павлова
Самарский национальный исследовательский университет имени академика С.П. Королева
Автор, ответственный за переписку.
Email: lora-pavlova@mail.ru
научный руководитель авторов, кандидат химических наук, доцент кафедры химии
Россия, СамараСписок литературы
- Моисеев, Д.В. Определение алкалоидов в траве чистотела большого и листьях маклеи сердцевидной методом ВЭЖХ // Бутлеровские сообщения. 2013 Т. 36 №11 – С.134-138.
Дополнительные файлы
