Condition of platelet factor of hemostasis system in pathogenesis of chronic periodontitis progression

Evgeniya V. Kondyurova; Кондюрова Евгения Викторовна; Tat`yana I. Vlasova; Власова Татьяна Ивановна; Vladimir A. Trofimov; Трофимов Владимир Александрович; Aleksey P. Vlasov; Власов Алексей Петрович; Ruslan A. Adamchik; Адамчик Руслан Александрович; Vladimir V. Akimov; Акимов Владимир Владимирович; Elena A. Tashina; Ташина Елена Андреевна

doi:10.23888/PAVLOVJ2019272209-218

Состояние тромбоцитарного звена системы гемостаза в патогенезе прогрессирования хронического пародонтита

Авторы: Кондюрова Е.В.¹, Власова Т.И.¹, Трофимов В.А.¹, Власов А.П.¹, Адамчик Р.А.¹, Акимов В.В.¹, Ташина Е.А.¹
Учреждения:
1. ФГБОУ ВО Национальный исследовательский Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарёва
Выпуск: Том 27, № 2 (2019)
Страницы: 209-218
Раздел: Оригинальные исследования
URL: https://journals.eco-vector.com/pavlovj/article/view/14545
DOI: https://doi.org/10.23888/PAVLOVJ2019272209-218
ID: 14545

Цитировать

Полный текст

Аннотация
Полный текст
Об авторах
Список литературы
Дополнительные файлы
Статистика

Аннотация

Цель. Оценить структурно-функциональное состояние тромбоцитов как клеточного компонента системы гемостаза при хроническом генерализованном пародонтите (ХГП) различной степени тяжести и установить его роль в прогрессировании заболевания.

Материалы и методы. В исследование включено 83 пациента (47 мужчин и 36 женщин) с ХГП, разделенных на три сопоставимые по возрастно-половому составу группы: в первую группу (n=21) включили пациентов с ХГП легкой степени тяжести, во вторую (n=36) – средней степени тяжести, в третью (n=26) – тяжелой степени. Методы исследования включали оценку структурно-функциональных характеристик тканей пародонта, общего гигиенического состояния полости рта, выраженности воспалительного процесса по индексным показателям; исследование микроциркуляции тканей пародонта, определение выраженности оксидативных процессов в слюне, плазме крови, тромбоцитах, изучение липидного состава тромбоцитов.

Результаты. При ХГП отмечаются патологические изменения липидного состава мембран тромбоцитов (увеличение процента лизофосфолипидов и свободных жирных кислот), связанные с системной активизацией оксидативных процессов и фосфолипазных ферментных систем, что сопровождается повышением их агрегационной активности. Степень повышения активности тромбоцитов сопряжена с выраженностью нарушений микроциркуляции в тканях пародонта. Состояние клеточного компонента системы гемостаза коррелирует со степенью тяжести патологического процесса в пародонте. При тяжелой степени ХГП структурно-функциональные изменения тромбоцитов максимальны.

Заключение. При ХГП системная активация оксидативных процессов приводит к модификации липидного состава мембран тромбоцитов, что способствует повышению их агрегационной активности, играя важную роль в формировании гиперкоагуляции, нарушении микроциркуляции и прогрессировании воспаления в тканях пародонта.

Ключевые слова

пародонтит, нарушения микроциркуляции, гемостаз, тромбоциты

Полный текст

Актуальность проблемы хронического пародонтита обусловлена быстрым прогрессированием, высокой степенью его рецидивов, низкой эффективностью терапии [1-3]. Современное взгляды на патогенетические механизмы хронического пародонтита определяют важную роль не только патологическим изменениям микроциркуляции [4], но и системным нарушениям [5, 6]. Ряд авторов при хроническом пародонтите констатирует повышение уровня и активности тромбоцитов крови [7-9], но механизм подобного рода изменений в системе гемостаза остается недостаточно изученным [10, 11]. Также не до конца ясной остается роль гиперкоагуляции в прогрессировании хронического пародонтита.

Цель – оценить функциональное состояние и липидный состав тромбоцитов при хроническом генерализованном паро-донтите (ХГП) различной степени тяжести и определить его роль в прогрессировании заболевания.

Материалы и методы

В исследование включено 83 паци-ента (47 мужчин и 36 женщин) с ХГП раз-личных степеней тяжести, обратившихся в Стоматологическую клинику ФГБОУ ВО МГУ им. Н.П. Огарева. Средний возраст пациентов составил 43,4±8,2 года, дав-ность заболевания составляла 2,4±0,6 лет.

Все пациенты были распределены на три группы, сопоставимые по возрастно-половому составу: первая группа (n=21) – пациенты с ХГП легкой степени тяжести, вторая группа (n=36) – средней степени тяжести, третья группа (n=26) – с тяжелым ХГП. В качестве группы контроля (нормы) были приняты средние показатели 25 здоровых добровольцев с гендерным и возрастным распределением, как и в исследуемых группах с ХГП.

Исследование было одобрено на за-седании Локального этического комитета при ФГБОУ ВО МГУ им. Н.П. Огарева №34 от 15.02.2017. Все процедуры прово-дились после подписания добровольного информированного согласия пациентов.

Пациенты с ХГП прошли комплексное клинико-лабораторное и рентгенологическое обследование, результаты которого легли в основу постановки диагноза и распределения пациентов по группам. Дополнительные методы исследования вклю-чали оценку структурно-функцио-нальных характеристик тканей пародонта по папиллярно-маргинально-альвеолярному индексу PMA (Parma, 1960), свидетельствующему о выраженности гингивита, индексу кровоточивости десневой борозды SBI (Muhleman, 1971), индексу гигиены апроксимальных поверхностей зубов API (Lange, 1997), оценивающему динамику формирования зубного налета, стойкости капилляров десны (метод дозированного вакуума по В.И. Кулаженко), упрощенному гигиеническому индексу OHI-s (Грин, Вермильон, 1969), пробе Шиллера-Писа-рева, расчету пародонтального индекса, исследование микроциркуляции в тканях пародонта с помощью лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ) на анализаторе «ЛАКК-02» (ООО НПП «Лазма», Россия) со специализированным программным обеспечением, определение выраженности оксидативных процессов в слюне, плазме крови, тромбоцитах по содержанию вторичных продуктов ПОЛ (Д.Ю. Егоров, А.В. Козлов, 1987), изучение липидного состава тромбоцитов (проводили после выделения на хроматограммах денситометрическим методом на денситометре Model GS-670 (BIO-RAD, США) с соответствующим программным обеспечением (Phosphor Analyst / PS Sowtware)).

Статистический анализ данных проводился с применением пакета прикладных программ «STATISTICA, Version 7,0» (StatSoft Inc., США). Проводили оценку характера распределения по каждому из оцениваемых показателей, с учетом полученных результатов в качестве статистических методов были выбраны: расчёт критерия t Стьюдента, коэффициента корреляции r Пирсона, критерия χ²для оценки значимости возрастного и полового факторов. Различия считали статистически значимым при р<0,05.

Результаты и их обсуждение

Проведенные исследования показали, что у пациентов, страдающих ХГП, на момент обращения за стоматологической помощью были зарегистрированы существенные отклонения расчетных и измеряемых характеристик состояния пародонта от нормы, выраженность которых соответствовала тяжести заболевания.

Упрощенный гигиенический индекс (OHI-s) при обращении превышал норму на 72,4% (р<0,001), 120,95% (р<0,001) и 161,2% (р<0,001) у пациентов первой, второй и третьей групп исследования соответственно. Отметим, что показатель OHI-s был больше 1, что принято рассматривать как плохое гигиеническое состояние полости рта.

Пародонтальный индекс (ПИ) у пациентов первой группы составлял 0,83±0,21, что было выше нормы в 9,2 раза. Данный показатель у пациентов второй группы был 3,89±0,23, что соответствовало среднетяжелой степени патологии пародонта, данное значение характеризует наличие гингивита с формированием клинического кармана при неподвижном зубе без нарушения функции. Наиболее выраженные изменения ПИ были отмечены у пациентов третьей группы, где он составлял 4,64±0,25.

Определение числового эквивалента пробы Шиллера–Писарева выявило достоверное повышение данного показателя у пациентов второй группы на 184,12% (4,83±0,23), что соответствовало окрашиванию альвеолярных сосочков и десневого края и характеризовалось как наличие умеренно выраженного воспалительного процесса тканей пародонта. У пациентов третьей группы балльная оценка по результатам данной пробы превосходила нормальные показатели на 354,61% (р<0,05), что характеризовалось как наличие тяжелого воспалительного процесса тканей пародонта.

Оценка папилярно-маргинально-аль-веолярного индекса на момент обращения пациентов в клинику показала увеличение данного параметра у пациентов первой, второй и третьей групп в 12,1 раза (р<0,001), 23,2 раза (р<0,001) и 38,7 раза (р<0,001) соответственно по сравнению с нормой, что свидетельствует о наличии активного воспалительного процесса в тканях пародонта.

Индекс кровоточивости десневой борозды у пациентов исследуемых групп был выше нормы в 5,4 раза (р<0,001), 16 раз (р<0,001) и 21,2 раза (р<0,001) соответственно. Индекс гигиены апроксимальных поверхностей зубов для указанных групп также возрос в 4,5 раза (р<0,001), 16,7 раза (р<0,001) и 18,3 раза (р<0,001) относительно нормальных значений, что свидетельствовало о неудовлетворительном состоянии гигиены полости рта, интенсивном образовании налета и зубного камня. Оценка пробы Кулаженко выявила снижение времени образования гематомы на 51,2% (р<0,001), 75,0% (р<0,001) и 82,4% (р<0,001) соответственно, что свидетельствовало о нарушении функционального состояния сосудов пародонта и повышенной хрупкости капилляров.

Также было установлено, что структурно-функциональные изменения в тканях пародонта при ХГП сопровождаются нарушениями микроциркуляции и явлениями оксидативного стресса не только на местном, но и на системном уровне. Так, изучение микроциркуляторного статуса тканей пародонта с использованием ЛДФ показало, что на момент обращения пациента с выраженными клиническими признаками обострения ХГП были зарегистрированы значительные отклонения ЛДФ-грамм от нормы. Исследования показали, что у пациентов первой группы показатель микроциркуляции (ПМ) в пародонте снижался незначительно, индекс эффективности микроциркуляции (ИЭМ) и другие показатели ее регуляторных компонентов были сопоставимы с нормальными. Зарегистрировано статистически значимое увеличение показателя шунтирования (ПШ) на 30,1% (р<0,05) по сравнению с нормой.

При оценке результатов микроциркуляции у пациентов второй группы отмечали значительное снижение ПМ на 41,6% (p<0,05) по сравнению с нормой, при повышении ПШ на 107,1% (p<0,05). Отношение максимальных амплитуд кардиальных и низких частот повышалось на 20,0% (p<0,05). Показатель нейрогенного тонуса возрастал на 17,3% (p<0,05), показатель миогенного тонуса снижался на 26,8% (p<0,05) относительно нормальных значений. Уменьшался ИЭМ на 19,2% (p<0,05). Полученные данные свидетельствуют о нарушении микроциркуляции в тканях пародонта в виде снижения ее эффективности и сброса крови по шунтирующим сосудам с включением кардиальных механизмов компенсации, угнетением гуморальной миогенной регуляции при активизации симпатических нервных влияний.

При тяжелом ХГП у пациентов третьей группы ПМ в пародонте уменьшался на 75,2% (р<0,05), при повышении ПШ на 210,1% (р<0,05) относительно нормы, что вероятно определяется наличием необратимых склеротических изменений тканей пародонта. Оценка механизмов регуляции сосудистого тонуса на основании данных амплитудно-частотного анализа выявила изменения микроциркуляции, соответствующие третьей степени тяжести нарушений [12]. Было выявлено истощение компенсаторных кардиальных и дыхательных механизмов, нарушение нейрогенной и гуморальной регуляции микрогемодинамики.

Известно, что расстройства микроциркуляции на фоне нарушений сосудистой стенки, патологических изменений клеточных мембран приводят к нарушению транспорта и переработки кислорода тканями, формированию смешанной гипоксии [13]. Развитие циркуляторной и тканевой гипоксии характеризуется дезорганизацией процессов метаболизма и сдвигом динамического равновесия между выраженностью активности антиоксидантной системы и темпом процессов ПОЛ в сторону последних [14].

Кроме того, на момент обращения пациента в клинику были зарегистрированы существенные отклонения маркеров оксидативного стресса в слюне обследуемых. Содержание веществ, реагирующих с тиобарбитуратовой кислотой (ТБК), было выше нормы на 141,2% (p<0,05) у пациентов первой группы, на 233,3% (p<0,05) у пациентов второй группы и на 604,3% (p<0,05) у пациентов третьей группы. Активность супероксиддисмутазы в первой и второй группах пациентов компенсаторно увеличивалась на 22,0 и 49,3% (р<0,05) соответственно, а при тяжелой форме заболевания – уменьшалась на 42,2% (р<0,05), что, вероятно, свидетельствовало о «срыве» компенсаторных механизмов антиоксидантных ферментных систем.

Активизация оксидативных процессов отмечалась и на системном уровне как компонент ответа острой фазы. В плазме крови уровень малонового диальдегида превосходил норму на 21,2% (p<0,05) в первой группе пациентов, на 63,4% (p<0,05) – во второй, на 92,8% (р<0,05) – в третьей группе.

Было зарегистрировано повышение фосфолипазной активности плазмы крови соответственно тяжести патологического процесса, исследуемый показатель был выше нормы на 49,1% (р<0,05), 113,4% (р<0,05) и 236,1% (р<0,05) в первой, второй и третьей группах исследования. Данный факт также имеет важную роль в патогенезе прогрессирования заболевания, учитывая не только мембранодестабилизирующую активность данного фермента [15], но и его роль в образовании арахидоновой кислоты с запуском ее метаболического каскада как важного источника медиаторов воспаления [16].

Анализируя полученные данные, следует отметить, что выраженность системных патологических изменений при ХГП коррелирует с тяжестью заболевания (r=0,89, рис. 1).

Рис. 1. Содержание малонового диальдегида в плазме крови пациентов с ХГП различной

Примечание: * – статистическая значимость изменений по отношению к норме (p<0,05)

Безусловно, активизация основных факторов альтерации клеточных мембран в плазме крови не может не отразится на структурно-функциональном состоянии форменных элементов крови и клеток эндотелия как первых «мишеней» самоповреждения. Особый интерес представляет исследование структурно-функциональных характеристик тромбоцитов, активизация тромбогенных свойств которых может способствовать микротромбообразованию и усугублению нарушений микроциркуляции тканей, приводя к прогрессированию патологического процесса. Рядом исследований показано, что выраженность гемостатических расстройств коррелирует со степенью тяжести ХГП [17].

Изучение активности оксидативных процессов в кровяных пластинках показало повышение содержания вторичных продуктов ПОЛ на 56,4% (р<0,05) при легкой степени тяжести ХГП, на 86,9% (р<0,05) – при средней степени, на 129,3% (р<0,05) – при тяжелой. Активность фосфолипазы А₂ тромбоцитов повышалась на 30,2%, 85,4% и 143,2% (р<0,05) соответственно (рис. 2).

Рис. 2. Показатели интенсивности ПОЛ и активности фосфолипазы А2 тромбоцитов крови больных ХГП различных степеней тяжести

Примечания: ЛХП – легкая степень тяжести ХГП; СХП – средняя степень тяжести, ТХП – тяжелая степень тяжести; * – статистическая значимость изменений по отношению к норме (p<0,05)

Повышение активности липидмодифицирующих факторов клеточных мембран сопровождалось изменениями липидного состава тромбоцитов, наибольшие изменения были зарегистрированы во фракциях свободных жирных кислот и лизофосфолипидов. Достоверным изменениям относительно нормы подвергались и другие показатели липидного состава мембран кровяных пластинок, особенно при тяжелом ХГП (табл. 1).

Также было выявлено увеличение агрегационной способности кровяных пластинок, наиболее значительное при тяжелой форме заболевания, когда степень и скорость агрегации превосходили норму на 50,0% и 89,3% (р<0,05) соответственно, а время агрегации укорачивалось на 56,0% (р<0,05) по сравнению с нормой (табл. 2).

Изменение молекулярной струк-туры липидного состава мембран тромбоцитов коррелировало с нарушением их функциональной активности (r=0,79-0,86).

Данные модификации структурно-функциональной активности тромбоцитов, могут выступать одним из факторов запуска внутрисосудистого пути активации каскада гемостатических реакций, приводящих к гиперкоагуляционному состоянию и микротромбообразованию с ухудшением микроциркуляции тканей [18]. Данный факт подтверждается наличием сильной корреляционной зависимости показателей структурно-функционального состояния тромбоцитов и индексных показателей состояния тканей пародонта, данных лазерной допплеровской флоуметрии микроциркуляции тканей десны (r=0,86-0,91).

Таблица 1 Липидный спектр тромбоцитов при хроническом генерализованном пародонтите

Показатели	Норма	Степень тяжести ХГП
Показатели	Норма	Легкая	Средняя	Тяжелая
Эфиры холестерола, %	6,71±0,46	6,56±0,58	5,17±0,39	8,28±0,67*
Холестерол, %	25,05±1,58	24,67±1,26	35,14±1,07*	42,34±2,00*
Свободные жирные кислоты, %	4,42±0,28	6,12±0,39*	6,99±0,31*	7,52±0,48*
Триглицериды, %	5,32±0,37	5,76±0,33	5,73±0,50	7,42±0,29*
Суммарные фосфолипиды, %	55,82±3,74	53,83±2,80	42,74±1,29*	38,60±2,16*
Фракционный состав суммарных фосфолипидов
Лизофосфатидилхолин	1,15±0,06	1,86±0,15*	4,02±0,28	4,86±0,11*
Сфингомиелин	23,13±2,29	22,36±1,19	17,89±0,88*	10,80±1,19*
Фосфатидилинозит	7,44±0,41	7,27±0,29	10,89±0,34*	10,86±0,30*
Фосфатидилхолин	35,96±1,13	32,51±1,43	27,26±1,67*	25,33±1,45*
Фосфатидилэтаноламин	24,82±1,28	25,23±1,36	32,02±1,29*	34,23±1,44*
Фосфатидилсерин	9,64±0,40	10,90±0,32	16,17±0,39*	18,62±0,34*

Примечание: * – статистическая значимость изменений по отношению к норме (p<0,05)

Таблица 2 Функциональная активность тромбоцитов при хроническом генерализованном пародонтите

Показатель	Норма	Степень тяжести ХГП
Показатель	Норма	Легкая	Средняя	Тяжелая
Степень агрегации тромбоцитов, %	57,46±2,99	71,34±4,71*	76,02±3,88*	86,23±5,78*
Скорость агрегации тромбоцитов, у.е.	2,05±0,14	2,87±0,19*	3,41±0,18*	3,88±0,25*
Время агрегации тромбоцитов, с	195,75±10,57	171,65±10,13	136,46±9,01*	109,64±6,36*

Примечание: * – статистическая значимость по отношению к норме при (p<0,05)

В обсуждении полученных результатов следует отметить, что в исследованиях Н.А. Георгиади с соавт. [19] и М.С. Алиевой с соавт. [20] также показано, что нарушение микроциркуляции в тканях пародонта коррелирует с выраженностью воспаления при ХГП. Выявленные нами явления системного оксидативного стресса при обострении ХГП в виде нарастания продуктов ПОЛ в плазме крови подтверждает имеющиеся в литературе данные [21]. Результаты по повышению агрегационной активности тромбоцитов при ХГП с тенденцией к нарастанию по мере прогрессирования патологии не противоречат результатам исследований В.Н. Китаевой с соавт. [22] и Е.В. Понукалиной с соавт. [23].

Заключение

При хроническом генерализованном пародонтите отмечаются патологические изменения липидного состава мембран тромбоцитов, связанные с системной активизацией оксидативных процессов и фосфолипазных ферментных систем, что сопровождается повышением их агрегационной активности. Данные изменения коррелируют с выраженностью нарушений микроциркуляции в тканях пародонта. Состояние тромбоцитарного звена системы гемостаза соответствует степени тяжести патологического процесса в пародонте. При тяжелом хроническом генерализованном пародонтите структурно-функциональные изменения тромбоцитов максимальны.

Таким образом, при хроническом пародонтите системная активизация оксидативных процессов сопряжена с модификацией липидного состава мембран тромбоцитов и повышением их агрегационной активности, что коррелирует с нарушениями микроциркуляции и выраженностью воспаления в тканях пародонта.