Влияние вилдаглиптина на уровень экспрессии Р-гликопротеина в условиях нормы и аллоксан-индуцированного сахарного диабета 2 типа
- Авторы: Титов Д.С.1, Правкин С.К.1, Никифоров А.А.1, Савостьянова Е.С.1, Майстренко М.А.1
-
Учреждения:
- Рязанский государственный медицинский университет имени академика И. П. Павлова
- Выпуск: Том 30, № 1 (2022)
- Страницы: 29-38
- Раздел: Оригинальные исследования
- Статья получена: 10.12.2021
- Статья одобрена: 15.02.2022
- Статья опубликована: 31.03.2022
- URL: https://journals.eco-vector.com/pavlovj/article/view/90082
- DOI: https://doi.org/10.17816/PAVLOVJ90082
- ID: 90082
Цитировать
Аннотация
Актуальность. Вилдаглиптин является одним из препаратов выбора в лечении сахарного диабета (СД) 2 типа. В ходе литературного анализа не были обнаружены данные других авторов о влиянии вилдаглиптина на уровень экспрессии белка-транспортера Р-гликопротеина (P-gp, ABCB1 белка).
Цель. В исследовании in vivo изучить влияние вилдаглиптина на уровень экспрессии Р-gp на фоне нормы и экспериментального аллоксан-индуцированного СД 2 типа.
Материалы и методы. Моделирование СД 2 типа выполняли однократной внутривенной инъекцией свежеприготовленного раствора аллоксана моногидрата в цитратном буфере (pH = 4,0) в дозе 80 мг/кг массы. Содержание глюкозы (ммоль/л) определяли глюкозооксидазным методом при помощи наборов «Human» (Германия), инсулин (мкЕД/мл) ― радиоиммунным методом с использованием набора «Immunotech» (Чехия). В качестве экспресс-метода определения уровня глюкозы в цельной крови использовали электрохимический глюкометр OneTouch UltraEasy (США). Уровень экспрессии Р-gp в тканях (тощая кишка, печень, почки, кора больших полушарий головного мозга) кроликов изучали непрямым гистохимическим методом. Гистологический материал после предварительной обработки заключали в парафин. Перед реакцией иммунного окрашивания производили демаскировку антигенов. Затем инкубировали срезы с первичными антителами к P-gp (ABCB1 antibody ― middle region, 0,1 мл (Aviva Systems Biology ARP51326-P050, США)). Для иммунного окрашивания использовали полимерную систему детекции с пероксидазной меткой (Leica Microsystems, Германия). Ядра клеток докрашивали гематоксилином. Микропрепарат фотографировали с помощью цифровой камеры Canon Power Shot G5 при увеличении в 400 раз. Анализ изображения выполняли с помощью программы для анализа и обработки цифровых изображений «ImageJ» и специально разработанного для количественного иммуногистохимического анализа плагина «IHC Profiler». Сравнивали результаты, полученные у интактных животных, на фоне аллоксан-индуцированного сахарного диабета, при введении вилдаглиптина здоровым животным и на фоне смоделированного диабета.
Результаты. После 14-дневного ведения интактным кроликам, а также на 5-й день отмены вилдаглиптина (5 мг/кг массы) не наблюдалось статистически значимых изменений экспрессии P-gp в указанных тканях, а также статистически значимых изменений уровней базальных и постпрандиальных инсулина и глюкозы крови. После 14-дневной терапии вилдаглиптином (5 мг/кг массы) аллоксан-индуцированного СД 2 типа наблюдалось статистически значимое восстановление сниженной на фоне патологии экспрессии P-gp в тканях тощей кишки, печени и почек до значений интактных кроликов, сопровождающееся статистически значимой нормализацией уровней инсулина и глюкозы крови. На 5-й день отмены препарата вновь имело место статистически значимое ингибирование экспрессии P-gp в тканях тощей кишки, печени и почек, а также статистически значимое снижение постпрандиальных инсулина и глюкозы крови. Статистически значимых изменений экспрессии ABCB1 белка в гематоэнцефалическом барьере в изучаемые сроки не наблюдалось.
Заключение. Введение вилдаглиптина (5 мг/кг массы) кроликам с аллоксан-индуцированным СД 2 типа способствует восстановлению экспрессии P-gp в тканях тощей кишки, печени и почек, сниженной на фоне патологии, в то время как введение препарата здоровым животным не оказывает влияния на экспрессию анализируемого белка.
Ключевые слова
Полный текст
![Доступ закрыт](https://journals.eco-vector.com/lib/pkp/templates/images/icons/text_lock.png)
Об авторах
Дмитрий Сергеевич Титов
Рязанский государственный медицинский университет имени академика И. П. Павлова
Email: dmit.serg.titov@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-4535-9549
SPIN-код: 5642-7498
ResearcherId: V-3816-2018
к.б.н., заведующий кафедрой управления и экономики фармации
Россия, РязаньСергей Константинович Правкин
Рязанский государственный медицинский университет имени академика И. П. Павлова
Автор, ответственный за переписку.
Email: psco@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-2088-6350
SPIN-код: 3672-6695
к.м.н., доцент, профессор, заведующая кафедрой фармакологии с курсом фармации факультета дополнительного профессионального образования
Россия, РязаньАлександр Алексеевич Никифоров
Рязанский государственный медицинский университет имени академика И. П. Павлова
Email: alnik003@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-0866-9705
SPIN-код: 8366-5282
к.м.н., доцент
Россия, РязаньЕлена Сергеевна Савостьянова
Рязанский государственный медицинский университет имени академика И. П. Павлова
Email: savstelena@rambler.ru
ORCID iD: 0000-0001-9622-5674
SPIN-код: 3938-5019
Россия, Рязань
Марина Андреевна Майстренко
Рязанский государственный медицинский университет имени академика И. П. Павлова
Email: marina.maistrenko777@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-8074-8005
SPIN-код: 9893-3651
Россия, Рязань
Список литературы
- Дедов И.И., Шестакова М.В., Майоров А.Ю., и др. Сахарный диабет 2 типа у взрослых // Сахарный диабет. 2020. Т. 23, № 2S. С. 4–102. doi: 10.14341/DM12507
- Дедов И.И., Шестакова М.В., Викулова О.К. Эпидемиология сахарного диабета в Российской Федерации: клинико-статистический анализ по данным Федерального регистра сахарного диабета // Сахарный диабет. 2017. Т. 20, № 1. С. 13–41. doi: 10.14341/DM8664
- Калинин Р.Е., Сучков И.А., Деев Р.В., и др. Возможности комбинированного подхода к лечению пациентов с критической ишемией нижних конечностей при фоновом сахарном диабете // Вестник Национального медико-хирургического Центра им. Н.И. Пирогова. 2018. Т. 13, № 2. С. 12–17.
- Калинин Р.Е., Сучков И.А., Пшенников А.С., и др. Эффективность препарата для терапевтического ангиогенеза в комплексном лечении пациентов с сахарным диабетом и критической ишемией нижних конечностей // Казанский медицинский журнал. 2016. Т. 97, № 5. С. 674–680. doi: 10.17750/КМJ2016-674
- Дубинина И.И., Урясьев О.М., Карапыш Т.В. Оценка качества жизни и корреляции углеводного обмена, гормонального спектра у больных сахарным диабетом 2 типа с первичным гипотиреозом, осложненным дистальной нейропатией // Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова. 2011. № 4. С. 99–103.
- Дубинина И.И., Урясьев О.М., Берстнева С.В., и др. Артериальная гипертензия и дисфункция эндотелия при коморбидной патологии: сахарный диабет и первичный гипотиреоз // Российский медико- биологический вестник имени академика И.П. Павлова. 2016. Т. 24, № 4. С. 42–55. doi: 10.23888/PAVLOVJ2016442-55
- Дедов И.И., Мельниченко Г.А., ред. Эндокринология. Национальное руководство. Краткое издание. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2013.
- Якушева Е.Н., Титов Д.С. Структура и функционирование белка множественной лекарственной устойчивости 1 // Биохимия. 2018. Т. 83, № 8. С. 1148–1172. doi: 10.1134/S0320972518080043
- Якушева Е.Н., Щулькин А.В., Черных И.В., и др. Функциональная активность гликопротеина-Р при экспериментальных манипуляциях // Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова. 2014. № 2. С. 74–77. doi: 10.17816/PAVLOVJ2014274-77
- Якушева Е.Н., Щулькин А.В., Бирюкова А.С. Дозозависимое влияние тироксина на функциональную активность гликопротеина-Р в эксперименте // Биомедицина. 2012. № 2. С. 53–60.
- Yeh S.–Y., Pan H.–J., Lin C.–C., et al. Hyperglycemia induced down–regulation of renal P-glycoprotein expression // European Journal of Pharmacology. 2012. Vol. 690, № 1–3. P. 42–50. doi: 10.1016/j.ejphar.2012.06.013
- Ерохина П.Д., Абаленихина Ю.В., Щулькин А.В., и др. Изучение влияния прогестерона на активность гликопротеина-Р in vitro // Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова. 2020. Т. 28, № 2. С. 135–142. doi: 10.23888/PAVLOVJ2020282135-142
- Ерохина П.Д., Абаленихина Ю.В., Щулькин А.В., и др. Изучение влияния эстрадиола на активность гликопротеина-Р in vitro // Наука молодых (Eruditio Juvenium). 2020. Т. 8, № 3. С. 329–336. doi: 10.23888/HMJ202083329-336
- Колхир С.В. Клиническое значение изучения активности транспортера лекарственных средств гликопротеина-Р для оптимизации фармакотерапии: автореф. дис. канд. мед. наук. М.; 2007.
- Дедов И.И., Шестакова М.В., Майоров А.Ю., ред. Клинические рекомендации «Алгоритм специализированной медицинской помощи больным сахарным диабетом». М.: УП ПРИНТ; 2017. Вып. 8 // Сахарный диабет. 2017. Т. 20, № 1S. С. 1–112. doi: 10.14341/DM20171S8
- Миронов А.Н., отв. ред. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. М.: Гриф и К; 2012. Ч. 1.
- Babu B.V., Moorti R., Pugazhenthi S., et al. Alloxan recovered rabbits as animal models for screening the hypoglycemic activity of compounds // Indian Journal of Biochemistry & Biophysics. 1988. Vol. 25, № 6. P. 714–718.
- Shukla R., Anand K., Prabhu K.M., et al. Hypoglycaemic effect of the water extract of Ficus bengalensis in alloxan recovered, mildly diabetic and severely diabetic rabbits // International Journal of Diabetes in Developing Countries. 1994. Vol. 14. P. 78–81.
- Хабриев Р.У., отв. ред. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. 2-е изд. М.: Медицина; 2005.
- Inaba W., Mizukami H., Kamata K., et al. Effects of long-term treatment with the dipeptidyl peptidase-4 inhibitor vildagliptin on islet endocrine cells in non-obese type 2 diabetic Goto-Kakizaki rats // European Journal of Pharmacology. 2012. Vol. 691, № 1–3. P. 297–306. doi: 10.1016/j.ejphar.2012.07.030
- Burkey B.F., Li X., Bolognese L., et al. Acute and chronic effects of the incretin enhancer vildagliptin in insulin–resistant rats // The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 2005. Vol. 315, № 2. Р. 688–695. doi: 10.1124/jpet.105.087064
- Varghese F., Bukhari A.B., Malhotra R., et al. IHC Profiler: an open source plugin for the quantitative evaluation and automated scoring of immunohistochemistry images of human tissue samples // PloS One. 2014. Vol. 9, № 5. P. e96801. doi: 10.1371/journal.pone.0096801
- Якушева Е.Н., Титов Д.С., Никифоров А.А. Влияние комбинации вилдаглиптина и гликвидона на функциональную активность и экспрессию гликопротеина-Р на фоне нормы и при экспериментальном аллоксан-индуцированном сахарном диабете 2-го типа // Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова. 2016. Т. 24, № 3. C. 53–66. doi: 10.17816/PAVLOVJ2016353-66
- Li Q., Sai Y., Kato Y., et al. Influence of drugs and nutrients on transporter gene expression levels in Caco-2 and LS180 intestinalepithelial cell lines // Pharmaceutical Research. 2003. Vol. 20, № 8. P. 1119–1124. doi: 10.1023/a:1025076326061
- Nawa A., Hamabe W.F., Tokuyama S. Inducible nitric oxide synthase-mediated decrease of intestinal P-glycoprotein expression under streptozotocin-induced diabetic conditions // Life Sciences. 2010. Vol. 86, № 11–12. P. 402–409. doi: 10.1016/j.lfs.2010.01.009
Дополнительные файлы
![](/img/style/loading.gif)